Alteraes Morfolgicas e Quantitativas dos Granulcitos Neutrofilos Eosinfilos

Alterações Morfológicas e Quantitativas dos Granulócitos (Neutrofilos Eosinófilos e Basófilos)

Granulócitos: Neutrófilos , Eosinófilos e Basófilos - Neutrófilos: 60 -70% - Eosinófilos: 2 -4% - Basófilos: 0, 5 -1%

ALTERAÇÕES QUANTITATIVAS BENIGNAS E MALIGNAS DOS NEUTRÓFILOS

NEUTROFILIA Valor normal: 4. 000 a 10. 000 x 106/L (ou 4 a 10 x 109/L) • WBC (10 -50 x 109/L) provavelmente reacional, raramente leucémico; • Reação leucemóide considera-se quando a contagem de WBC superior a 30 x 109/L • WBC (50 - 100 x 109/L) Provável leucémico; raro reacional • Wb. C ( > 100 x 109/L ) muito provável leucémico

CAUSAS DE NEUTROFILIA ABORDAGEM INICIAL • Crianças respondem mais do que adultos • Bactérias piogénicas induzem maior neutrofilia • Corticóides reduzem a saída dos neutrofilos do SP para os tecidos • Deficiências de Fe, VIT B 12, folato dificultam a neutrofilia

Classificação da neutrofilia quanto à causa • FISIOLÓGICAS * EXERCÍCIO FÍSICO, RN, GESTAÇÃO • REACIONAIS * DOENÇA INFECCIOSA * PROCESSO INFLAMATÓRIO * MEDICAÇÕES • NEOPLÁSICAS * LEUCEMIAS • LINFOMAS

Classificação da neutrofilia quanto ao tempo • NEUTROFILIA AGUDA: * Ocorre súbitamente por desmarginação * Rápida libertação de do pool de reservado da MO • NEUTROFILIA CRÓNICA: * Aumento da produção medular por longos períodos

CAUSAS DE NEUTROFILIA 1. Neutrofilias fisiológicas: Na leucocitose fisiológica não há aumento da produção da mo ou dano tecidual, existe apenas desmarginação excepção: gravidez e RN ( há aumento da produção na mo ) Ocorre normalmente por re-distribuição dos pools * Aumento da saída do pool da MO * Desmarginação do pool periférico * Maior permanência no SP * Ausência do baço ou da função do baço • Associações acima • Na neutrofilias patológicas: Há aumento na geralmente associado a dano tecidual produção da mo

• Neutrofilias reacionais * Doença infecciosa * Processo inflamatório * Medicação üAumento da granulopoiese neutrofílica: Inflamação, infecção, drogas ( lítio ), fumo, intoxicação por mercúrio ü Diminuição da saída de neutrófilos da circulação; ü Má distribuição dos neutrófilos üAdesão defeituosa dos neutrófilos ( drogas ) üLocomoção ; quimiotaxia defeituosa; Fagocitose defeituosa ü Metabólica: uremia, acidose, eclampsia, azotémia, acidose diabética, necrose hepática, etc)

CAUSAS DE NEUTROFILIA AGUDA NEUTROFILIA CRÓNICA ESTÍMULOS FÍSICOS: ANESTESIA, FRIO, CONVULSÕES, EXERCÍCIO, CALOR, PARTO, DOR, CIRÚRGIA INFECÇÕES P NICO, RAIVA, STRESSE GRAVE INFLAMAÇÕES EM GERAL INFECÇÕES TUMORES: MAMA, RIM, FÍGADO, PULMÃO, P NCREAS, ESTÔMAGO, ÚTERO INFLAMAÇÃO OU NECROSES TECIDUAIS: ATIVAÇÃO DO COMPLEMENTO, CHOQUE ELÉTRICO, GOTA, VASCULITE TABAGISMO, LÍTIO DROGAS HORMONAS E TOXINAS: CORTICÓIDES, EPINEFRINA, VACINAS, VENENOS DISTÚRBIOS ENDÓCRINOS E METABÓLICOS: ECL MPSIA, PRODUÇÃO DE ACTH OU CORTICÓIDE, TIRÓIDE DISTÚRBIOS HEMATOLÓGICOS DISTÚRBIOS HEREDITÁRIOS E CONGéNITOS: SÍNDROME DE DOWN

NEUTROPENIA DEFINIÇÃO: DIMINUIÇÃO DA CONTAGEM ABSOLUTA DE NEUTRÓFILOS NO SANGUE PERIFÉRICO • NEUTROPENIA LEVE 1– 4 x 109/L • NEUTROPENIA SEVERA <0. 5 NEUTROPENIA FISIOPATOLOGIA Resulta de alterações da célula tronco, • • Defeitos nos processos de proliferação e diferenciação, • Anormalidades na distribuição e turnover.

CLASSIFICAÇÃO DAS NEUTROPENIAS • A- FACTORES INTRÍNSECOS ( PRIMÁRIAS ) * Neutropenia congenita severa * Neutropenia cíclica B. FACTORES EXTRÍNSECOS ( SECUNDÁRIAS ) * Induzida por drogas (aminopirina, penicilina, clorazapina, … * Auto-Imune * Hiperesplenismo * Pré- eclâmpsia * Secundária a infecções

CAUSAS DE NEUTROPENIA � Doenças hematológicas (neutropenias crónicas, neutropenia cíclica, leucemia, anemia aplástica, ) � Iatrogénica (drogas mielotóxicas) � Deficiências nutricionais (B 12, folatos, Cu) � Secundárias (febre tifoide, malária, sepsis; hiperesplenismo, Gaucher, Felty, sarcoidose; infiltação medular por neoplasia)

Anormalidades Morfológicas dos Leucócitos 1. Granulações tóxicas 2. Corpos de Döhle 3. Corpusculos de Barr 4. Vacúolos citoplasmáticos 5. Célula de Mott 6. *Anomalia de Pelger-Huët 7. *Anomalia de Alder-Reilly 8. *Anomalia de Chediak-Higase 9. Desvio à esquerda 10. Reação leucemóide 11. Reação leuco-eritroblástica * Anomalias hereditárias

Anormalidades Morfológicas dos Leucócitos 1. Granulações tóxicas neutrófilos CARACTERISTICAS: Presença de grânulos imaturos de mucopolissacarídeos com coloração azurófila no citoplasma OCORRÊNCIA: üInfecções üinflamações ügravidez üanemia aplástica ORIGEM: maturação incompleta do neutrófilo associada à rápida libertação na corrente sanguínea

Anormalidades Morfológicas dos Leucócitos 2. Corpos de Döhle Características morfológicas: Corpúsculos azuis-claros na periferia do citoplasma. Origem: Inclusões basofílicas de RNA desnaturada no citoplasma. Formado pelo empilhamento de retículo endoplasmático e grânulos de glicogênio. Ocorrência: Infecções, inflamações, queimaduras, gravidez, agentes citotóxicos (quimioterápicos).

Anormalidades Morfológicas dos Leucócitos 3. Vacúolos citoplasmáticos Células afetadsa: NEUTRÓFILOS / MONÓCITOS Características morfológicas: Estruturas circulares sem fixação de coloração distribuídas unitariamente ou em número variável. Origem: Resultante da fusão de grânulos com vacúolo fagocitário.

Anormalidades Morfológicas dos Leucócitos 3. Vacúolos citoplasmáticos Ocorrência: Infecções, terapia com G-CSF, intoxicação alcoólica, anormalida de Jordan (deficiência de carnitina), intoxicação por benzeno Artefato: Provocado por anticoagulante Relatório: Vacúolos citoplasmáticos em x % dos Neutrófilos e ou monócitos.

Anormalidades Morfológicas dos Leucócitos 4. Corpúsculo de Barr: pequeno apêndice em forma de raquete no núcleo de neutrófilos de mulheres: cromossoma X condensado hematologia mary duro UFP

Anormalidades Morfológicas dos Leucócitos • Neutrófilos com núcleo “em banda” característicos de todas as situações em que há uma produção e libertação rápida na corrente sanguínea, • Representam um menor grau de maturidade

Anormalidades Morfológicas dos Leucócitos Reação leucemóide considera-se quando a contagem de WBC superior a 30. 000

EOSINÓFILOS üGranulócitos pouco numerosos Representam apenas de 2 a 4% do total de leucócitos; concentram-se na pele e mucosas. üDiametro : 12 -17 µm üGranulações grosseiras cor laranja-castanho (acidófilas) que coram pela eosina Eosinófilos üO seu núcleo normalmente é bilobulado

EOSINÓFILOS GRANULOS ESPECÍFICOS GRANULÓCITOS üSão fagócitos fracos üDestroem os complexos antígenos-anticorpos particularmente os mediados por Igs tipo Ig. E (os intervenientes nas reações alergicas e parasitoses) Função ~> Defesa específica PROCESSOS PARASITÁRIOS E ALÉRGICOS (ASMA)

EOSINÓFILOS � Os grânulos específicos contêm proteinas básicas que são tóxicas para os parasitas e células, neutralisam a heparina e induzem a libertação de histamina pelos basófilos � Contêm também 1 proteina cationica que inibe a coagulação, altera a fibrinolise e inibe a proliferação linfocitaria. � Ambas as proteinas são neurotóxicas

Eosinofilia EOSINOFILIA > 600 X 106/L …. HIPEREOSINOFILIA > 1500 X 106 /L 1 - Alergia: Asma, urticária, angioedema, tabagismo 2 - Infecções fúngicas: coccidióidomicose, criptococose, aspergilose pulmonar alérgica, infecções fúngicas sistêmicas, 3 – Parasitose: toxocara, esquistossomose, equinococose 4 -Outras infecções: Escarlatina, Clamídia, Gonorreia 5 -Neoplasia metastática, doença de hodgkin, linfomas de células T, LLA, LMC, adenocarcinoma, carcinoma de ovário 6 -Dermopatias: Penfigo, dermatite herpetiforme, Foliculite pustular eosinofílica 7 - Doenças endócrinas: Addison, hipopituitarismo 8 - Afecções intestinais: Gastroenterite, … 9 – Certas imunodeficiências: Neutropenia cíclica, …. . 10 –Diálise peritoneal,

RESPOSTA EOSINOFÍLICA AOS PARASITAS üProtozoários não produzem eosinofilia ü Helmintas localizados no lumen intestinal não causam eosinofilia, apenas os que estão no tecido üAncylostoma e strongyloides são os que apresentam maior eosinofilia üEnterobius vermicularis causa leve eosinofilia em 50% dos pacientes üAscaris lumbricoides causa leve eosinofilia em 33% dos pacientes üFilárias produzem eosinofilia na fase aguda ü Taenia sp. não produz eosinofilia üA migração de nematódos causa eosinofilia transitória; üNa Hidatidose ( cisto hidático) só ocorre eosinofilia se houver rompimento do cisto e em 30% dos pacientes

BASÓFILOS

BASÓFILOS ü Menos 1% dos leucócitos (os Gr. mais raros) ü Tamanho: 14 -16 µm ü Núcleo volumoso com forma retorcida e irregular – aspecto da letra S ü Grandes grânulos citoplasmáticos, grosseiros, fortemente basofílicos (azul intenso) que cobrem também o núcleo ü Grânulos metacromáticos histamina, fatores quimiotáticos para eosinófilos (ECFA), heparina ü Receptores para Ig. E na membrana, ü Envolvidos em processos alérgicos e parasitários; fagocitose lenta

ORIGEM HEMATOPOÉTICA DOS BASÓFILOS ü Medula óssea ü Fígado fetal ü Sangue de cordão umbilical üSangue periférico ü Linhagens de células leucémicas

BASÓFILOS ü Grânulos específicos intensamente basófilicos • Em basófilos normais o maior conteúdo é heparina • Os grânulos dos basófilos são a maior fonte da histamina circulante • • A histamina é um potente factor quimiotático de eosinófilos, Possuem tripsina e enzimas do tipo quimiotripsina ( Processos inflamatórios crônicos -> dano capilar ) • Calicreína ( reações de hipersensibilidade e anafilaxia ) • As cininas libertadas ativam a coagulação e sistema complemento

Basófilos ü Função ü Receptores para Ig. E ü Maior importância nas reações de hipersensibilidade imediata * Asma brônquica * Urticária * Rinite alérgica * Anafilaxia às drogas * Reações anafiláticas locais contra alguns parasitas ü Próximos dos capilares libertam heparina, histamina, bradicinina e serotonina ü Ingestão de GR sensibilizadas por AC

FUNÇÃO ESTÍMULO À DESGRANULAÇÃO: ü Proteínas lisossómicas dos neutrófilos ü Venenos de insectos ü Frio ü Algumas hormonas ü Narcóticos, relaxantes musculares, radiocontrastes

CAUSAS de BASOFILIA � Reacções de hipersensibilidade (a drogas, alimentos, inalações, …) � Doenças mieloproliferativas (LMC, …) � Leucemia de basófilos � Outras (mixedema, colite ulcerosa, carcinoma, anemia hemolítica, pós -esplenectomia, …)

ASPECTOS CLÍNICO-LABORATORIAIS ü Possuem concentração máxima durante à noite e mínima pela manhã ü Não possuem flutuações relacionadas às refeições ou exercício físico ü As hormonas esteróides diminuem os basófilos sanguíneos ü Podem aumentar nos primeiros dias de hemorragia do ciclo menstrual 1. AUMENTO DO Nº DE BASÓFILOS ( REACIONAIS ) * Estados de hipersensibilidade; * Administração de estrógenos * Hiperlipidemia; *Mixedema * Colite ulcerativa 2. AUMENTO DO Nº DE BASÓFILOS ( MALIGNIDADE ) * LMC; * Outras síndromes mieloproliferativas * Basofilia em LMC é mau prognóstico

LEUCÓCITOS AGRANULÓCITOS - Linfócitos 20 - 30% - Monócitos 3 - 8%

MONÓCITOS ü São precursores de macrófagos, nos quais se transformam a partir do momento que deixam os vasos sanguíneos e migram para os tecidos ü Ovais com núcleo ovóide em forma de rim ou ferradura, excêntrico (cromatina pouco densa); ü Citoplasma basófilo; ü Representam de 3 a 8% dos leucócitos sanguíneos.

MONÓCITOS AGRANULÓCITOS ü Microvilosidades e vesículas de pinocitose üÉ a maior das células sanguíneas

Cinética • A proliferação dos monócitos desde os estadíos iniciais até monócito maduro leva de 48 a 55 h • Os pró- monócitos fazem no mínimo 3 divisões celulares até maturarem como monócitos • São libertados no sangue periférico após o final das divisões celulares, • A maturação completa–se no sp (sangue periférico) ao final de 12 h; Permanecem no sp em média 70 H , nos tecidos meses ou até anos. • Não existe grande pool de reserva de monócitos na MO (medula óssea) em comparação com os neutrófilos • Estão divididos, no sp, em pools: circulante e marginal, O pool marginal é 3, 5 vezes maior que o pool circulante • Depois entram nos tecidos onde se transformam em macrófagos e não retornam ao sp • A produção de monócitos pode quadruplicar em 12 H após o estímulo inflamatório

Maturação dos monócitos � - Monoblastos => Pró monócito => Monócito hematologia mary duro UFP

Principais atividades do macrófago/monócito 1. Manutenção / Reparo tecidual 2. Regulação da proliferação celular 3. Remoção tecidual 4. Função secretora + Citocinas + Proteases + Componentes do complemento + Fatores de coagulação + Prostaglandinas

PRINCIPAIS ATIVIDADES DO MACRÓFAGO/MONÓCITO 5. Metabolismo do cálcio 6. Regulação imune * Apresentação e processamento do AG * Função acessória imunidade humoral e celular 7. Controlo de patógeneos * Atividade anti- viral * Atividade anti- microbiana * Atividade anti-tumoral

Defesa: Modos de acção 1. Destruição de bactérias ou vírus por fagocitose 2. Formação de anticorpos e linfócitos sensibilizados Monócitos+ Ganulócitos Linfócitos e plasmócitos

Fagocitose É a principal função dos neutrófilos e macrófagos Selectividade do material a ser fagocitado para evitar a ingestão de células do próprio organismo: ü Superfície rugosa ü Ausência de camada protéica protectora ü Presença de anticorpos de superfície que identificam o agressor

Diferenças na fagocitose Neutrófilos-fixação, emissão de pseudópodes e invaginação da partícula –capacidade de fagocitar 3 a 20 bactérias. Macrófagos-são activados pelo sistema imune � fagocitam até 100 bactérias � partículas maiores , � podem expelir produtos residuais e sobreviverem por vários meses.

Características da fagocitose � Os neutrófilos e macrófagos contêm lisossomas e enzimas proteolíticas capazes de digerir bactérias e outras proteínas estranhas � Nos macrófagos existem ainda lípases que digerem membranas lipidicas espessas de certas bactérias como o B. K. � Se as suas enzimas são activadas e libertadas fora da célula podem provocar necrose cistica, lesão cistica, …

CAUSAS de MONOCITOSE � Infecções ( bk, brucelose, endocardite bacteriana, , malária, …) � Doenças granulomatosas (Crohn, …) � Doenças do colagénio � Leucemias e síndromes mielodisplásticos � Linfomas � Neutropenia � Anemias crónica idiopática hemolíticas

CAUSAS DE MONOCITOPENIA � Corticoterapia � Anemia e stress aplástica � Leucemias agudas � Terapêutica � Algumas imunosupressora infecções (VIH)

LINFÓCITO

LINFÓCITO ü Segunda célula mais comum do sangue: 20 -50% ü Tamanho: Há grandes (18 µm) e pequenos (6 -8 µm) mais comuns ü Núcleo redondo e escuro cromatina densa ü Citoplasma escasso e periférico , discreta basofilia (ribossomos) azul claro, pode conter grânulos azurófilos üLinfócitos B e T ü Linfócitos B plasmócitos anticorpos ü Linfócito T: maturação no timo, imunidade celular destruição de células infectadas por vírus (ação citotóxica)

Linfopoiese LINFOBLASTO �Produção PROLINFÓCITO na medula óssea; �Maturação e diferenciação nos órgãos e tecidos linfóides (timo, baço, nódulos linfóides) �Distribuição: � Orgãos linfóides primários, secundários, sangue periférico Função 1. Imunidade mediada por células; 2. Produção de anticorpos (humoral)

LINFÓCITOS üDIFERENCIAÇÃO: AGRANULÓCITOS Linfócito B, T, NK Plasmócitos (Ac), Célula B de memória IMUNIDADE HUMORAL Célula T auxiliar, Célula T supressora, Célula T citotóxica, Célula NK IMUNIDADE CELULAR

Linfópoiese � São produzidos e diferenciados face a um estimulo antígenico � Ocorre a produção de células T para destruição dos antígenos e células B e T de memória imunológica � Os Linfócito B são produzidos na medula óssea e posteriormente armazenados nos órgãos linfoides (fígado, baço e linfonodos) � Os Linfócito T são produzidos na medula óssea , maturados no timo e posteriormente armazenados nos órgãos linfoides (fígado, baço e linfonodos)

Diferenciação dos linfocitos B Os Linfócito B são produzidos na medula óssea e posteriormente armazenados nos órgãos linfoides (fígado, baço e linfonodos) Quando saem dos órgãos linfoides ficam algumas horas na circulação e vão para os tecidos(semanas, meses ou anos) Função: No sangue diferenciam-se em plasmócitos que segregam anticorpos ; estes são agentes reactivos capazes de se combinar com antígenos e destruí-los A ativação dos LB é mediada LT e por citocinas Quando há exposição subsequente ao mesmo antígeno, a libertação de células B activadas ou plasmócitos ocorre de maneira muito mais rápida e mais potente do que da primeira vez

Diferenciação dos linfocitos T • Os Linfócitos T são produzidos na medula óssea , maturam no timo e posteriormente armazenados nos órgãos linfoides (fígado, baço e linfonodos) • O timo possui uma região com células precurssoras • 5% dos linfócitos que amadurecem no timo são libertados • Os LT adquirem no timo marcadores de superfície: * cd 1 * cd 2 * cd 3 * Cd 4 * cd 5 * cd 8 • Funções do timo: * Produção de células T maduras * Seleção de clones não auto-reactivos

CINÉTICA DE CÉLULAS NK • Comprendem 10 a 15% dos linfócitos • São células efectoras de reacção citolítica • Atividades: * Destruição de células tumorais * Resistência às infecções bacterianas, fúngicas, virícas e por protozoários * Regulação da hematopoiese

CINÉTICA DE CÉLULAS NK • A sua atividade não depende de sensibilização prévia • Ocorre poucas horas após a exposição ao ag • A célula nk pode lisar uma outra célula por: * Lise espontânea * Citotoxicidade dependente de AC