Biofizyka komrki Komrka jako ukad fizyczny Rnorodno komrek
Biofizyka komórki Komórka jako układ fizyczny
Różnorodność komórek Od 100 czy też kilkunastu cm (włókna nerwowe, jednokomórkowe glony) do 1 m (organizmy jednokomórkowe)
Cechy komórki „typowej” Wymiary 1 – 3 m, Objętość 2 – 3 m 3, Skład: 70% białka, 15% kwasów nukleinowych, 10% lipidów i 5% cukrowców Ogólna liczba makrocząsteczek wynosi 107
Przykłady „typowych” komórek (a) Typowa komórka zwierzęca (b) Typowa komórka roślinna
Charakterystyka komórki „typowej” c. d. Otoczona jest błoną cytoplazmatyczną, Zawiera jądro i cytoplazmę otoczone podobnymi błonami, W cytoplazmie występuje retikulum endoplazmatyczne i organella, tj. mitochondria, rybosomy, pęcherzyki pinocytarne, układ Golgiego, plastydy (u roślin) i in.
jednokomórkowego) traktowanego jako układ fizyczny a) Odrębność od otoczenia: b) Wynika z obecności błon komórkowych, pełniących funkcję granicy faz Struktury te pokryte są często dodatkowymi warstwami (np. śluzem, ścianą komórkową i innymi. Podobne granice występują wewnątrz cytoplazmy, oddzielając poszczególne organella. Cecha ta zapewnia odrębność składu chemicznego komórki w stosunku do otoczenia Dotyczy to np. stężenia jonów K, Na i Cl. Stosunek Na/K jest z reguły wyższy wewnątrz komórek niż na zewnątrz. Odrębność składu chemicznego komórki utrzymywana jest do śmierci organizmu.
jednokomórkowego) traktowanego jako układ fizyczny c. d. b) Wysoki stopień organizacji Złożoność ta uwidacznia się na poziomie: - cząsteczkowym, - struktur subkomórkowych, - wyższym (tkanek, narządów, organizmów, gatunków i biocenoz), Złożoność procesów zachodzących w żywych organizmach znacznie przewyższa reakcje mające miejsce w materii nieożywionej Wiąże się ona m. in. z koniecznością precyzyjnej kontroli metabolizmu
Cechy żywego organizmu (np. jednokomórkowego) traktowanego jako układ fizyczny c. d. c) Wzrost i rozmarzanie się Traktowane jako tendencje do powiększania ilości materii wysoko zorganizowanej, kosztem nieuporządkowanych składników otoczenia. W ujęciu termodynamicznym powstawanie komórki prowadzi do obniżenia entropii 1
Przykłady odpowiadających sobie układów o niskiej i 1 wysokiej entropii Niska entropia Lód w temperaturze 273 K Diament w temperaturze 0 K Cząsteczka białka o regularnej, natywnej strukturze Wysoka entropia Woda w temperaturze 273 K Opary węgla w temperaturze 1 000 K Ta sama cząsteczka w postaci rozwiniętej, przypadkowej wstęgi Sonet Szekspira Przypadkowy ciąg liter
Cechy żywego organizmu (np. jednokomórkowego) traktowanego jako układ fizyczny c. d. d) Przemiany energii Uzyskiwanie energii z utleniania składników pokarmowych. W przypadku roślin istnieje możliwość bezpośredniego przekształcania energii słonecznej w chemiczną (głównie na drodze biosyntezy ATP 1) na drodze fosforylacji fotosyntetycznej. Przemiany te stanowią sprzężenie między procesami zwiększającymi entropię oraz lokalnie ją obniżającymi (anabolizm – katabolizm)
Termodynamiczne konsekwencje wartości entalpii swobodnej procesu gdzie µi i ni – stanowią odpowiednio potencjał chemiczny i liczbę moli itego składnika Jeżeli G jest. . . Ujemna Zerowa Dodatnia Proces jest. . . Termodynamicznie korzystny Odwracalny; w równowadze niekorzystny; korzystniejszy jest
ATP 1 jako główny nośnik energii w żywych organizma ch Podczas hydrolizy ATP do ADP wydzielane jest 31 k. J energii ( G = -31 k. J) Podczas hydrolizy ADP do AMP wydzielane jest 31 k. J energii ( G = -31 k. J) Podczas hydrolizy AMP do adenozyny i Pi wydzielane jest 14 k. J energii ( G = -14 k. J)
fosforany uczestniczą ce w transporcie energii w żywych organizmach
Cechy żywego organizmu (np. jednokomórkowego) traktowanego jako układ fizyczny c. d. e) Pobudliwość Zdolność specyficznego reagowania na bodźce Złożoność tych reakcji wynika z bardzo dużego wzmocnienia na drodze między bodźcem a skutkiem
Cechy żywego organizmu (np. jednokomórkowego) traktowanego jako układ fizyczny c. d. f) Homeostaza Samoregulacja przejawiająca się działaniami zmierzającymi do zaadoptowania się do zmian środowiska zewnętrznego kosztem jak najmniejszych zmian środowiska wewnętrznego organizmu
Źródła energii żywej komórki Utlenianie biologiczne Fotosynteza
Oddychanie biologiczne: Przeniesienie atomów wodoru z substratów na atomy tlenu, Zlokalizowane głównie w mitochondriach, Odpowiednie rozmieszczenie przestrzenne cząsteczek substratów i enzymów, zapewniające sprzężenie oddychania z fosforylacją, gwarantowane jest odpowiednim związkiem czynnych elementów z
funkcje mitochondri um Utlenianiu biologicznemu zaczynającemu się od substratów o potencjale Błona zewnętrzna Cytozol Matriks Grzebienie – 0, 60 do – 0, 50 m. V Przestrzeń między błonami Matriks -0, 30 m. V i kończącemu na tlenie (+82 m. V) towarzyszy G = - 218 k. J · mol-1 Potencjał redoks najbardziej zredukowanych substratów występujących w organizmach wynosi od Błona wewnętrzna Membrana wewnętrzna Przestrzeń między błonami
Wędrówka elektronów w mitochondriach
Fotosynteza Odbywa się w chloroplastach (obecnych tylko w komórkach roślinnych), zawierających barwniki rozmieszczone w błonie lipidowo-białkowej, Istotą jest absorpcja kwantów promieniowania świetlnego w zakresie 600 -700 nm i przeniesienie elektronów z substratów o wysokim potencjale redoks (H 2 O) na substraty o potencjale niskim, W sensie fizycznym jest więc odwróceniem oddychania
Budowa chloroplastu Błona wewnętrzna Błona zewnętrzna Tylakoid Światło tylakoidu Stroma lamelli
Przebieg i lokalizacja procesów fotosyntezy
Fotosynteza c. d. Fotosynteza sprzężona jest z fosforylacją (biosyntezą ATP), Wydajność fotosyntezy i oddychania w komórce wynosi 20 -30%, a pozostałą część energii (70 -80%) ulega rozproszeniu w postaci ciepła
Reakcje redoks w komórkach Reakcje redoks zwiększają entropię, entropię są więc potencjalnie, a często także faktycznie, samorzutne W komórkach żywych, stanowiących układ otwarty, reakcje redoks pozostają w powiązaniu z fosforylacją, która obniża entropię
Schemat sprzężenia reakcji redoks z fosforylacją Bodziec termodynamiczny: Różnica potencjałów redoks Skoniugowany przepływ: Wtórny bodziec termodynamiczny: Potencjał chemiczny ATP Sprzężony przepływ: Reakcja oksydoredukcji (przeniesienie elektronów) Powstanie ATP (fosforylacja)
Zużytkowywanie energii: Chemiczna praca (biosyntezy), Praca osmotyczna (transportu), Praca mechaniczna
Nakłady energii potrzebne do biosyntezy wiązań w makrocząsteczkach Makro. Monome Typ cząsteczk r wiązania a + G’m na wiązanie w k. J mol Liczba wiązań w cząstecz ce 17 120 10000 3000 1000000 -1 Białko Aminokw Peptydow as e Kwas Nukleoty Fosfodinukleinow d estrowe y Polisachar Cukier Glikozy- 21 17 2000 -
Przykłady procesów biosyntezy w ciągu 1 sekundy w komórce E. coli 10 cząsteczek RNA, 1400 cząsteczek białek, 30 cząsteczek polisacharydów, 4 cząsteczki DNA o masie 2 x 106 (w ciągu 20 min. – pełen cykl życia komórki), Zapotrzebowanie na 2, 5 x 109 cząsteczek ATP, którego pula musi być w ciągu sekundy kilkakrotnie odnawiana (komórka E. coli zawiera ich zaledwie 1 x 106)
Schemat sprzężenia reakcji biosyntezy makrocząsteczek z hydrolizą ATP Bodziec termodynamiczny: Potencjał chemiczny ATP Wtórny bodziec termodynamiczny: Potencjał chemiczny makrocząsteczek Przepływ termodynamiczny: Rozkład (hydroliza) ATP Sprzężony przepływ: Biosynteza makrocząsteczek
Praca osmotyczna (transportu) Zdolność komórek do wychwytywania z otoczenia i gromadzenia w swym wnętrzu składników pokarmowych, Umiejętność wychwytywania bądź wydalania jonów wbrew gradientowi stężeń (pompa jonowa), Powyższe zjawiska odnoszą się także do różnych części tej samej komórki (np. mitochondria – cytoplazma, cytoplazma – jądro),
Praca osmotyczna (transportu) c. d. Zmiana potencjału chemicznego w wyniku transportu 1 mola substancji o stężeniu c 1 do c 2: Konsekwencją transportu jonów są zjawiska elektryczne zachodzące w komórkach
Schemat sprzężenia pracy osmotycznej z hydrolizą ATP Bodziec termodynamiczny: Potencjał chemiczny ATP Wtórny bodziec termodynamiczny: Gradient stężeń Przepływ termodynamiczny: Rozkład (hydroliza) ATP Sprzężony przepływ: Transport jonów
Praca mechaniczna Skurcz komórki mięśniowej, Ruch protoplazmy, mogący prowadzić do powstawania uwypukleń błony komórkowej, a w dalszej konsekwencji do zmian położenia (poruszania się) komórki, Ruch elementów komórki w czasie mitozy, Ruch rzęsek komórek eukariotycznych
Ruch elementów komórki w czasie mitozy Podstawą ruchu rozdwojonych chromosomów do biegunów jądra są mikrotubule o średnicy 15 -20 nm zbudowane z białek globularnych o masie 55 k. Da, Włókna połączone z chromosomami przemieszczają się aktywnie wzdłuż pozostałych mikrotubul, pociągając chromosomy ku biegunom wrzeciona. Prędkość ruchu wynosi 0, 2 -4 m · min-1, Po osiągnięciu biegunów włókna ulegają depolimeryzacji i zanikają
Ruch elementów komórki w czasie mitozy c. d.
Ruch rzęsek komórek eukariotycznych Wymiary rzęsek; grubość ok. 0, 25 nm i długość 10 – 20 nm, Mają zdolność wykonywania ruchów falistych z częstotliwością 10 – 40 cykli · min-1, Struktura: układ włókien 2 centralnych + 9 obwodowych o wymiarach 15 nm długości i 8 nm – grubości, Włókna zbudowane są z dwóch białek: tubuliny i dyneiny, mającej zdolność rozkładania ATP, Ruch rzęski spowodowany jest przesuwaniem
Przekrój rzęski komórek eukariotycznych Włókienka tubuliny Cząsteczka dyneiny
Mechanizm ruchu rzęsek komórek eukariotycznych a b c d
Ruch rzęsek komórek eukariotycznych c. d. Mechanizm ten zdaje się być podstawowym mechanizmem ruchu w żywych organizmach – występuje m. in. we włóknach mięśniowych i przy ruchach trombocytów
Termoregulacja Część energii nie wykorzystana do wykonania pracy ulega rozproszeniu w postaci ciepła, Organizmy zwierząt stałocieplnych wykorzystują ją do utrzymywania stałej temperatury ciała (termoregulacja).
Bioenergetyka w ujęciu globalnym CO 2 ATP Utlenione substraty O 2 Biosynteza Utlenianie ADP P Praca mechaniczna Praca osmotyczna
Bioenergetyka w ujęciu globalnym c. d. Roczna produkcja wszystkich substancji organicznych przez organizmy fotosyntetyzujące na Ziemi wymaga ok. 1018 J energii, Po uwzględnieniu strat energetycznych fotosyntezy otrzymuje się 1021 J (0, 001 energii słonecznej docierającej rocznie do Ziemi), Biorąc pod uwagę powyższe dane oraz fakt, że procesy wzrostu i rozmnażania się żywych organizmów zmniejszają entropię, można sądzić, że żywe organizmy nie stosują się do II zasady termodynamiki,
Bioenergetyka w ujęciu globalnym c. d. Organizmy żywe nie są jednak układami zamkniętymi, bowiem jednym z warunków życia jest ciągłą wymiana materii i energii z otoczeniem, co z kolei zwiększa entropię, Procesy kataboliczne (zwiększające entropię) i metaboliczne (zmniejszające entropię) są w organizmach żywych sprzężone termodynamicznie.
Błona komórkowa
Rola błony komórkowej Odgraniczenie komórki od otoczenia, Kompartmentacja komórki (podział na obszary, w których równocześnie odbywać się mogą różne, a często przeciwstawne procesy metaboliczne), Odgraniczenie jądra i innych organelli cytoplazmatycznych.
Rola błony komórkowej c. d. Nadaje reakcjom określony kierunek w sensie geometrycznym, Na skutek obecności w błonach enzymów, reakcje przez nie katalizowane zorientowane są przestrzennie, co stwarza możliwość sprzężenia z innymi procesami, np. transportem jonów.
Budowa błony komórkowej
Składniki błony komórkowej Lipidy – składnik podstawowy. Strukturę błony zapewniają oddziaływania van Der Wallsa i hydrofobowe między częściami apolarnymi ich cząsteczek oraz siły elektrostatyczne między częściami polarnymi a dipolami wody,
Składniki błony komórkowej Białka: stanowią 40 – 50% suchej masy błony. Często mają charakter enzymów. Dzielą się na: a) peryferyczne: luźno związane z wewnętrzną lub wewnętrzną powierzchnią błony; stanowią 30% wszystkich białek błony, b) integralne: trwale związane ze strukturą błony – stanowią 70% wszystkich białek błony. Zawierają znaczne ilości aminokwasów o apolarnych łańcuchach bocznych łączących się z lipidami oddziaływaniami hydrofobowymi
Białka błony komórkowej Białko integralne Białko penetrujące Białka peryferyczne
Składniki błony komórkowej c. d. Białka penetrujące błonę na wskroś mogą tworzyć kanały do transportu substancji niskocząsteczkowych. Błony są półprzepuszczalne, tzn. że łatwo przenika przez nie woda. Przepuszczalność innych substancji zależy od ich rozpuszczalności w tłuszczach. Najtrudniej przenikają przez błony substancje polarne (np. sacharoza) oraz jony.
Transport substancji przez błonę komórkową
Transport substancji przez błonę komórkową c. d. Rodzaj cząstecz ki Na+ K+ Cl- Współczynnik przepuszczalno ści 10 -12 cm/s 5 x 10 -12 cm/s 10 -10 cm/s Rodzaj cząstecz ki tryptofan glicerol indol Współczynnik przepuszczaln ości 10 -7 cm/s 5 x 10 -6 cm/s 5 x 10 -4 cm/s glukoza 5 x 10 -8 cm/s H 2 O 5 x 10 -3 cm/s
Transport substancji przez błonę komórkową c. d. Zmiana entalpii swobodnej w wyniku transportu 1 mola substancji o stężeniu c 1 do c 2: a) Dla cząsteczek pozbawionych ładunku b) Dla cząsteczek obdarzonych ładunkiem R – stała gazowa, T – temperatura bezwzględna, c 2, c 1 – stężenie substancji w środowisku 2 i 1, z. F - ładunek elektryczny
Rodzaje transportu przez błonę komórkową a) Transport bierny b) Transport czynny
Rodzaje transportu przez błonę komórkową c. d. Transportowana molekuła
Transport przez błony: bierny (dyfuzja) Błona Czas Stan początkowy Stan końcowy
Transport przez błony: ułatwiony na nośnikach Transport ułatwiony na nośnikach: przebiega zgodnie z gradientem stężeń. Wykazuje jednak większą specyficzność niż transport bierny oraz ma związek ze stanem funkcjonalnym błony, Mechanizm polega na tworzeniu przez substraty kompleksów ze związkami o większym powinowactwie do fazy lipidowej, Przykłady: kompleksy jonów Na i K z cyklicznymi peptydami oraz cukrów i aminokwasów z permeazami – specyficznymi
Rodzaje transportu nośnikowego Uniport: Uniport jedna cząsteczka jest przenoszona w jedną stronę zgodnie z gradientem stężeń, Symport: Symport dwie cząsteczki przenoszone w jedną stronę – jedna zgodnie z gradientem stężeń, a druga wbrew (z wykorzystaniem energii wytworzonej podczas samorzutnego transportu pierwszej cząsteczki, Antyport: Antyport dwie cząsteczki przenoszone w przeciwne strony – najczęściej jedna
Rodzaje transportu nośnikowego c. d.
Transport przez błony: aktywny Przebiega wbrew gradientowi stężeń, wymaga energii pochodzącej ze sprzężenia z odpowiednią reakcją egzoergiczną (np. rozpadem ATP), Powyższe sprzężenie stanowi tzw. pompę jonową, jonową Ilość niezbędnej energii zależy od stężenia transportowanej substancji po obu stronach błony, Transport jonów wymaga do 107 większych nakładów energii niż transport
Transport przez błony: aktywny
Schemat pompy jonowej Bodziec termodynamiczny: Potencjał chemiczny ATP Wtórny bodziec termodynamiczny: Gradient stężeń Przepływ termodynamiczny: Rozkład (hydroliza) ATP Sprzężony przepływ: Transport jonów
Potencjał błony komórkowej Różnica między potencjałem wnętrza komórki i środowiska zewnętrznego wynosi od – 20 do – 200 m. V, Wynika z potencjału błonowego wynoszącego od – 50 do – 55 m. V, Potencjał błonowy wynika z nierównomiernego rozmieszczenia jonów Na, K i Cl po obu stronach błony
Stężenie jonów w m. M · (dm 3) – 1 po dwóch stronach błony mięśnia szkieletowego ssaków oraz odpowiadające im wartości potencjału równowagi ( V) Jony Wnętrz Zewnątr Ce / Ci V = 0, 06 log Ce / e z Ci komórki Dla T = 310 K i Ci Ce Na+ 12 145 12 : 1 + 65 m. V K+ 155 4 1 : 39 - 95 m. V Cl- 3, 8 120 32 : 1 Potencjał błonowy zmierzony: V = -90 m. V - 90 m. V
Komórki pobudliwe Charakteryzują się niższą wartością potencjału błonowego (< - 65 m. V), Wartość ich potencjału błonowego nazywamy potencjałem spoczynkowym, spoczynkowym Przykłady komórek pobudliwych: a) komórka nerwowa, b) komórka mięśniowa
Porównanie funkcjonowania komórek typowych i pobudliwych Komórka typowa Komórka pobudliwa - wraz z transportem jonów zmienia się potencjał błony w sposób płynny, aż do jej całkowitej depolaryzacji - po osiągnięciu potencjału – 15 m. V następuje jego dalszy spontaniczny wzrost do wartości + 30 m. V, a następnie powrót do wartości wyjściowej - - 65 m. V
Potencjał czynnościowy Gwałtowne zmiany wartości potencjału błonowego komórek pobudliwych
Budowa komórki nerwowej
Czynność komórki nerwowej jako przykładu komórki pobudliwej Potencjał spoczynkowy wynosi – 90 m. V, Potencjał czynnościowy pojawia się po osiągnięciu prze napięcie depolaryzujące wartości 20 – 40 m. V (tzw. wartość progowa), W ciągu kilku sekund ulega depolaryzacji do 0 m. V, a następnie przepolaryzowaniu do ok. + 40 m. V, po czym spada do wartości potencjału
Czynność komórki nerwowej jako przykładu komórki pobudliwej
jako przykładu komórki pobudliwej c. d. Wynika z gwałtownego wzrostu przepuszczalności błony dla kationów (szczególnie sodu), a następnie szybkiego jej zminiejszania, Przenikanie kationów do wnętrza komórki neutralizuje jej potencjał ujemny, a następnie zmienia na dodatni. W chwili osiągnięcia maksimum potencjału przepuszczalność błony dla jonów Na spada, a wzrasta dla jonów K, W komórce pobudzonej przepuszczalność dla jonów Na jest ok. 500 -krotnie większa, czemu towarzyszy zmiana przewodnictwa elektrycznego, Zmiany w stężeniu jonów są po pewnym czasie wyrównywane przez pompę jonową
Komórka mięśnia poprzecznie prążkowanego - budowa Kształt wydłużonego włókna o średnicy 0, 01 mm i długości 0, 1 mm, Zawiera do kilkunastu jąder i inne składniki cytoplazmy typowe dla innych komórek, Wypełniona jest włóknistymi strukturami – mikrofibrylami o średnicy 1 µm stanowiącymi 70% białkowych składników komórki, Błona komórkowa – sarkolemma tworzy system kanałów T skierowanych do wnętrza komórki oraz system kanałów podłużnych, mających za zadanie wprowadzenie do
Komórka mięśnia poprzecznie prążkowanego - struktura Linia Z Pasmo I Pasmo A Miofibryle System T Błona komórkowa Retikulum sarkoplazmatyczne Mitochondrium
Komórka mięśnia poprzecznie prążkowanego jako przykład komórki pobudliwej Potencjał spoczynkowy – 90 m. V, Wnętrz komórki zawiera więcej jonów K oraz mniej jonów Na i Ca niż otoczenie
Funkcjonowanie komórki mięśniowej Impuls nerwowy docierający za pośrednictwem synapsy do sarkolemmy depolaryzuje ją analogicznie do procesu zachodzącego w komórce nerwowej, Stan depolaryzacji, za pośrednictwem kanałów T przekazywany jest wnętrza komórki, w bezpośrednie sąsiedztwo mikrofibryli, Zmiana potencjału błony powoduje uwolnienie jonów Ca, które w stanie spoczynku związane są ze specyficznym białkiem, Jony dyfundują do wnętrza komórki
- Slides: 76