Mylogramme et Hmogramme Normal C Roumier oct 2011

Myélogramme et Hémogramme Normal C. Roumier, oct 2011

COMPTE RENDU MINIMUM D’UN HÉMOGRAMME (ANDEM 1998) Analyse biologique la plus prescrite en france 1 : Numération Globulaire Leucocytes Ht GR VGM CCMH TCMH NP 2 : Formule Leucocytaire Granulocytes neutrophiles Granulocytes éosinophiles Granulocytes basophiles Lymphocytes Monocytes Autres types cellulaires +/- morphologie des éléments nucléés

Hémogramme : analyse biologique comprenant 3 groupes de données ØLa numération des GR associée à la détermination de la concentration en Hb et des constantes erythrocytaires VGM, IDR, CCMH, TCMH. ØLa numération et la formule leucocytaire ØLa numération plaquettaire Un prélèvement unique de sang un automate “compteur automatique de cellules ” : hémogramme automatisé. ØTrès bonne reproductibilité ØRapidité d’obtention des résultats ØAbaissement du coût de l’analyse Vérification manuelle au microscope : Présence d’ anomalies réalisation d’un frottis sanguin Interprétation au microscope, après coloration MGG Renseignements qualitatifs : établissement d’une formule « manuelle » , Description d’anomalies morphologiques des cellules normales ( hématies, leucocytes, plaquettes), et identification de cellules anormales.

Granulocytes Lymphocyte Monocyte Plaquette Blastes Hématie

• • • Anisocytose : hétérogénéité de taille des GR (défini par un IDC >15%), anisocytose plaquettaire Hypochromie : GR pâles. S’accompagne d’un TCMH <27 et un CCMH <32 Polychromasie : présence d'hématies de couleur variable (anémies régénératives, dysérythropoïèses, nouveaux-nés) Poïkilocytose : hématies de forme et de taille très variée Schizocytes : Présence de globules rouges fragmentés provenant d'un obstacle sur le parcours sanguin (SHU), demande spécifique recherche de schizocytes. Hématies en cible : Hématies au contenu clair avec renforcement central : aspect de cible Hématies en rouleaux : dysglobulinémie , anomalie de viscosité sanguine Corps de Howell-Jolly : résidu nucléaire de taille variable qui se voit sous la forme d’une inclusion de taille variable rouge foncée (normalement éliminé par la rate splénectomie (ou asplénie fonctionnelle) Sphérocytes : globule rouge de petite taille apparente avec disparition de la zone claire centrale. (sphérocytose héréditaire, AHAI) Dacryocytes : hématies en forme de larme, ou de poire. fibroses médullaires Drépanocytes : hématies allongées en forme de faux, accès drépanocytaires Hématies ponctuées : contenant de nombreuses petites ponctuations sombres, basophiles (témoin d'une anomalie de synthèse de l'hémoglobine)

Anisochromie Schizocytes CHJ

INDICATIONS DE L'HÉMOGRAMME (1) 1) Signes généraux évoquant une diminution d'une ou plusieurs lignées sanguines : • Syndrome anémique : pâleur et/ou signes d'anoxie (palpitations, dyspnée…) • Syndrome hémorragique aigu, purpura, ecchymoses ou hématomesanormaux… • Syndrome infectieux inexpliqué, persistant, récidivant ou grave. • Une atteinte de l'état général : asthénie, anorexie, amaigrissement, fièvre au long • cours, douleurs osseuses…

2) Des signes évoquant une augmentation d'une ou plusieurs lignées sanguines : • Érythrose cutanée ou prurit à l'eau chaude • Thromboses artérielles ou veineuses, • Syndrome tumoral : adénopathies, splénomégalie. 3) Certaines situations systématiques ou bilans : • Grossesse • Médecine du travail • Médecine de dépistage • Bilans pré-opératoires • Bilans pré-thérapeutiques • Suivis thérapeutiques

4) Urgence • Un état de choc • Une pâleur intense • Une angine ulcéro-nécrotique ou résistante aux antibiotiques • Une fièvre élevée après prise de médicament, surtout après chimiothérapie • Traitement antimitotique • Une fièvre résistante aux antibiotiques • Un purpura pétéchial avec syndrome hémorragique

HEMOGRAMME NORMAL Cellules sanguines : -> terminales -> éléments fonctionnels de lignées -> nombre très élevé et durée de vie courte Production / j Nombre total (en milliard) Durée de vie Production / sec (en milliard) GR 20 000 120 j 200 2 500 000 PN 500 24 h 50 625 000 PLQ 1 000 7 j 100 1 250 000 => nécessité de production importante et continue

Volume sanguin : de 250 ml chez le Nné à 5 l chez l ’adulte Étude des éléments fonctionnels des lignées hémato : -> leucocytes : formule sanguine -> hématies : Hb, Ht, VGM, TCMH, CCMH -> plaquettes : taux, VPM Valeurs normales variables en fonction de l’age et du sexe

Le temps préanalytique : de l’acte de prescription de l’analyse jusqu’à la réalisation pratique de cette même analyse. La prescription : 2 cas ØBilan systématique : pas d’information cliniques ØBilan d’exploration sur un patient ayant une situation clinique connue. Réalisation du geste ØSujet au repos assis ou couché, à distance de tous stress, effort physique, repas. ØTenir compte du cycle nycthéméral, . ØEviter les ponctions pendant perfusion , nutrition parentérale… Ømicrométhode au talon chez le nouveau-né, Ø au bout du doigt chez les patients diffciles à prélever

Anomalies majeures de l’hémogramme ØAnémie = hypoxie des organes vitaux ØAgranulocytose, lymphopénies extrêmes = infections ØThrombopénies = hémorragies ØPolyglobulies et hyperleucocytoses massives = hyperviscosité ØPolyglobulies, hyperplaquettoses = thromboses veineuses et artérielles ØHyperéosinophilies essentielles = lésions tissulaires Dangers sérieux, aspects cliniques multiples Urgence biologique annonce une urgence clinique L ’hémogramme apporte des repères chiffrés essentiels dans la démarche du diagnostic médical Des logigrammes d’investigations cliniques et paracliniques précieux et expérimentés Diagnostic du mécanisme, de la “maladie”, de l’agent étiologique causal

HÉMOGRAMME ET VALEURS DE RÉFÉRENCE Préalables ØMéthodologiques : standardisation : des condition de prélèvement (ponction veineuse franche, tube EDTA) des méthodes de mesure des paramètres (automate) du mode d ’expression des résultats ØPhysiologiques Nyctémère, alimentation, tabagisme, alcool, effort physique, altitude, prise de médicaments, stress, grossesse Groupe de population: age, sexe, ethnie Groupes physiologiquement homogènes

Valeurs ref : GR, GB, NP

Numération des Globules Rouges Les paramètres calculés • Ht = Hématocrite Ht = (GR x VGM)/10 • TCMH = Teneur cellulaire moyenne en hémoglogine. Hb g/100 ml x 10 TCMH = Nb GR 10 6/mm 3 • CCMH = Concentration cellulaire moyenne en hémoglobine. Hb en g/100 ml CCMH = x 100 Ht

Valeurs ref : constantes érythrocytaires

Valeurs de référence : numération globulaire et paramètres eryth 1ère semaine Hématies 10. 6/µL (Tera/L) Leucocytes 10³/µL (Giga/L) Plaquettes 10³/µL (Giga/L) Hémoglobine g/d. L 8 jours à 3 mois à 3 ans 3 à 6 ans 6 à 15 ans Adulte H : 4, 5 à 5, 8 5, 0 à 6, 0 3, 8 à 4, 8 3, 6 à 5, 2 4, 1 à 5, 3 4, 0 à 5, 4 F : 3, 8 à 5, 4 10, 0 à 30, 0 6, 0 à 18, 0 6, 0 à 15, 0 à 13, 0 5, 0 à 11, 0 4, 0 à 10, 0 150 à 400 150 à 400 H : 13, 5 à 17, 5 14, 5 à 22, 5 10 à 16 10, 5 à 13, 5 11, 5 à 14, 5 F : 12, 5 à 15, 5 H : 40 à 50 Hématocrite % 44 à 58 VGM fl 100 à 120 85 à 96 70 à 86 73 à 89 77 à 91 82 à 98 TCMH pg 34 à 38 24 à 34 23 à 31 24 à 30 > ou = 27 38 à 44 36 à 44 37 à 45 F : 37 à 47

Valeurs ref : formule sanguine

Valeurs de référence : formule leucocytaire en 109/L 1ère semaine 8 jours à 3 mois à 3 ans 3 à 6 ans 6 à 15 ans Adulte Polynucléaires neutrophiles 6, 0 à 26, 0 1, 5 à 8, 5 1, 8 à 8, 0 1, 8 à 7, 5 Polynucléaires éosinophiles 0, 2 à 0, 85 0, 2 à 1, 2 0, 05 à 0, 7 0, 02 à 0, 65 0 à 0, 6 0, 1 à 0, 4 Polynucléaires basophiles 0 à 0, 64 0 à 0, 2 0 à 0, 2 Lymphocytes 2, 0 à 11, 0 4, 0 à 10, 5 2, 0 à 8, 0 1, 5 à 6, 5 1, 0 à 4, 5 Monocytes 0, 4 à 3, 1 0, 05 à 1, 1 0 à 0, 8 0, 2 à 1, 0

Numération des Globules Rouges • L'IDC ou RDW Les paramètres calculés – L'IDC est une valeur statistique correspondant au CV % calculé sur la distribution des rouges = coefficient d'anisocytose. 50 100 200 IDC Normal < 15, 5% 50 100 200 IDC Elevé 18 % 50 100 200 IDC très Elevé 35 %

Numération des Plaquettes Les paramètres calculés • Le Thrombocrite – Tct = VMP x Nb de Plaquettes • L'IDP ou PDW – Indice de distribution plaquettaire

Réticulocytes La numération des réticulocytes ne fait pas partie de l’hémogramme Analyse spécifique Valeurs normales des réticulocytes : 25 à 100 (Giga/L)

Interprétation- deux temps • Paramètres de la numération ligne par ligne : variation quantitative • Paramètres de la formule (valeur absolue) • Variation qualitative (commentaire morphologie des cellules) Confronter résultats à • La population de référence • aux conditions cliniques Evaluer éventuelle hémodilution

Certaines anomalies doivent faire suspecter une hémopathie maligne. • • • anémies non microcytaires arégénératives bicytopénies et pancytopénies myélémie hyperlymphocytose en dehors du syndrome mononucléosique, monocytose en dehors d’un syndrome inflammatoire, présence de cellules anormales Examens complémentaires • Reticulocyte • Myélogramme • Bilan d’anémie etc

Myélogramme 1. DEFINITION • Le myélogramme correspond à une analyse quantitative et qualitative de frottis médullaires réalisés après ponction- aspiration de moelle osseuse généralement au niveau du sternum. • Examen est réalisé dans un but diagnostic (suspicion d’hémopathie maligne, de métastases médullaires, de leishmanioses viscérales…) ou de suivi de la pathologie préalablement diagnostiquée.

Myélogramme Le prélèvement : ØAdulte : ponction au niveau sternal ou dans l’os iliaque (épines iliaques antéro-supérieures, crête). ØEnfant : os iliaques ØNouveau-né: plateau tibial face antéro-interne. Trocart de Mallarmé et pour faible quantité de moelle (quelques frottis) on utilise une aiguille plus fine (aiguille pour PL pédiatrique avec mandrin) Aspiration mélange de moelle et de sang Suc médullaire en grumeaux étalé sur les lames de verre La ponction de MO n’a pas de véritable contre-indication (éviter de prélever lors des coagulopathies sévères).

Prescription : associer • Un hémogramme • Un minimum de renseignements cliniques indispensables à une bonne lecture et interprétation du myélogramme. Lecture • • Celle-ci comporte 3 temps successifs, tous 3 indispensables : appréciation générale des frottis médullaires appréciation cytologique et morphologique décompte des éléments cellulaires

Coloration des étalements May Grunwald Giemsa Lecture des frottis médullaire au microscope Etude cytologique fine et rapide (résultat disponible en quelques heures) Apprecier • la richesse (grossissement 10 X) (Un prélèvement pauvre peut traduire une aplasie médullaire, une myélofibrose, ou une dilution du matériel prélevé par du sang ) • la présence de MK, les pourcentages différentes lignées • la présence éventuelle de cellules non hématopoiètique (métastases) Etablir : • la répartition de cellules différentes lignées cellulaires. (Une formule est réalisée sur tous les éléments nucléés autres que les mégacaryocytes )

Explorations complémentaires éventuelles : • coloration spécifique du fer (Perls) • colorations cytochimiques utiles à la classification des leucémies aiguës (myéloperoxydase, estérases) • études immunocyto-chimiques (mise en évidence de marqueurs par l‘utilisation d'anticorps monoclonaux spécifiques: ICC ou CMF) • analyse cytogénétique avec établissement du caryotype des cellules médullaires • Analyse des marqueurs en biologie moléculaire

Enfant (1 mois - 2 ans) Adulte Nouveau né (< 2 jours) Blastes indifférenciés <2 2 - 4* 0. 5 - 2 Myéloblastes 0. 5 - 1 0. 5 - 2 Promyélocytes 1 -2 1 -5 Myélocytes 5 - 10 3 -6 5 - 15 Métamyélocytes 15 - 20 5 - 15 15 - 20 Polynucléaires 30 - 50 15 - 20 25 - 35 Lignée éosinophile 1 -4 1 -4 Lignée basophile 0. 5 - 1 Proérythroblastes 0. 5 - 2 Ery. basophiles 1 -4 1 -3 2 -5 Ery. polychromatophiles 5 - 10 5 -8 6 - 12 Ery. acidophiles 6 - 10 Lymphocytes 10 - 18 30 - 50 5 - 15 Plasmocytes 0 0 - 0. 5 - 2 Monocytes 0. 5 - 2 Lignée neutrophile Lignée érythroblastique