Exploration de lallergie Ig E dpendante Place de

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Exploration de l’allergie Ig. E dépendante Place de la biologie (aspects pratiques) sylvain. dubucquoi@chru-lille.

Exploration de l’allergie Ig. E dépendante Place de la biologie (aspects pratiques) sylvain. dubucquoi@chru-lille. fr pour récupérer l’enseignement : http: //biologiepathologie. chru-lille. fr/enseignement/

Plan Exploration biologique de l’allergie Éosinophiles Ig. E Totales Rappel ( « brefs »

Plan Exploration biologique de l’allergie Éosinophiles Ig. E Totales Rappel ( « brefs » ), nomenclature, conseils, informations pratiques Ig. E spécifiques - Comment on les dose - Comment on les prescrit (contraintes de la nomenclature) - Que peut-on attendre des résultats quantitatifs ( « mélanges » , « tests unitaires » ; « recombinants » ) Exploration des médiateurs de l’anaphylaxie Tryptase sanguine Histamine sanguine Méthylhistaminurie (autre ? ) Bonus (? )

PLACE DE LA BIOLOGIE Dr Guillaume LEFEVRE http: //www. reseau-eosinophile. fr/website/accueil_du_site_du_reseau_eosino_&1. html ■NFS :

PLACE DE LA BIOLOGIE Dr Guillaume LEFEVRE http: //www. reseau-eosinophile. fr/website/accueil_du_site_du_reseau_eosino_&1. html ■NFS : hyperéosinophilie → Parasitoses, viroses, tabagisme, toxiques (benzène, mercure), connectivites, dermatose bulleuse, cancers, médicaments : antibiotiques, anti-épileptiques, → Allergie ■(Ig. E totales) : NON ère e c n a n n o d or On ne prescrit pas le dosage des Ig. E totales dans le cadre de l’exploration de l’allergie ! 2017 38 000 dosages 3 800 Ig. E totales > 53 000 €/ an ! Ig. E totales : aucune valeur diagnostique ! ➠ 20% des sujets sains : valeur élevée ➠ 20% des sujets allergiques : concentrations faibles On observe une augmentation des Ig. E totales au cours de : - Dermatite atopique, urticaire chronique, polysensibilisations - Infections (parasitaires, virales) - Aspergillose BP - Déficits immunitaires congénitaux (Wiskott - Aldrich ; Job-Buckley) - Maladies inflammatoires, dysimmunitaires (pemphigoïde bulleuse) - Traitement de l’asthme par omalizumab 1 – Résultats exprimés en unités internationales (1 UI = 2, 4 ng d’Ig. E) – Taux variables selon l’âge 3

Dosage des Ig. E spécifiques

Dosage des Ig. E spécifiques

DOSAGES DES Ig E SPECIFIQUES : quand les prescrire ? – Permet d’attester présence

DOSAGES DES Ig E SPECIFIQUES : quand les prescrire ? – Permet d’attester présence d’Ac spécifiques ; mais aussi déterminer d’éventuelles réactions croisées –Intérêt pour le clinicien si prick-test impossible +++ –Dermographisme –Tt anti-histaminiques –Eczéma étendu – ou si doute sur résultat Prick Test En pratique… « tout le temps » , car apporte (en plus) certaines réponses à des questions non explorées par la clinique ou les tests cutanés (justifie d’une prescription ciblée +++)

Technique de dosage (Ig. E totales / spécifiques) Allergène Ac anti-Ig. E humaines couplé

Technique de dosage (Ig. E totales / spécifiques) Allergène Ac anti-Ig. E humaines couplé à un traceur Ig. E spécifiques Immunocap 250 Substrat Fluorescence Sur tube sec : sérum Gamme : 0, 1 k. Ua/L à >100 k. Ua/L Fluorescent Enzyme Immuno Assay (FEIA) 6

Le détail, on passe… La même méthode (le même principe) pour - Ig. E

Le détail, on passe… La même méthode (le même principe) pour - Ig. E totales - Ig. E spécifiques - mélanges - unitaires - recombinants, natifs… - Ig. G 4 spécifiques - Tryptase - ECP une calibration spécifique pour ces 2 derniers Lavage

 • > 600 allergènes au catalogue (450 au CHR de Lille) • Une

• > 600 allergènes au catalogue (450 au CHR de Lille) • Une seule calibration pour 600 allergènes ! (dite « universelle » ) • Avantages : pratique, économique* • Inconvénients : « faussement sécurisant » : si problème avec la production d’un allergène (stabilité, représentation de l’allergène cible…) : pas d’information !! * pour tout autre paramètre : 1 dosage quantitatif = 12 points de gamme + 4 contrôles (en pratique pour une série de 50 à 100 dosages)

… « Les investigations sont toujours en cours, nous ne pouvons malheureusement donc pas

… « Les investigations sont toujours en cours, nous ne pouvons malheureusement donc pas vous indiquer une nouvelle durée de conservation pour l’instant. Et selon nos premières estimations, le retour des produits Immuno. CAP c 5 et c 6 n’est pas prévu avant le 3ème trimestre 2018. Il ne vous est donc pas possible d’identifier les sérums discordants vous-même, c’est pourquoi nous vous conseillons de demander aux médecins de reconsidérer sur la période concernée les dossiers pour lesquels ils soupçonneraient une discordance, en analysant ce risque dans le contexte global du dossier. Le risque de résultats faussement négatifs peut cependant être relativisé, parce que nous n’avons eu aucun signalement jusqu’à présent, et parce que dans le cas de prescriptions faites par des allergologues : • d’autres outils de diagnostic sont à leur disposition • les médicaments sont connus par ces allergologues comme étant complexes et qu’ils ne posent pas leur diagnostic uniquement sur les résultats in vitro • la grande majorité des patients qui leur sont adressés ne sont pour la plupart pas allergiques (90% selon nos sources) Cordialement » Pauline D… Product Manager Allergy Immuno. Diagnostics

Dosages des Ig. E spécifiques : - vis-à-vis d’allergènes en mélange - ou test

Dosages des Ig. E spécifiques : - vis-à-vis d’allergènes en mélange - ou test unitaires …Règles de prescription et interprétation

ALLERGOLOGIE MOLECULAIRE Tests de provocation 1880 Découverte des Ig. E 1967 1 e allergènes

ALLERGOLOGIE MOLECULAIRE Tests de provocation 1880 Découverte des Ig. E 1967 1 e allergènes clonés Tests commerciaux 1988 -1991 ~ 2005 Allergène « RAST » Source, "extrait" allergénique Source hétérogène Composé de différents composants (±) allergéniques = Protéines / glycoprotéines pour les sources naturelles Un composant, une protéine Natif ou Recombinant ALLERGENE NATIF : Provient d’une source allergénique qui a été purifiée après que les différentes protéines ont été séparées. ALLERGENE RECOMBINANT : Séquence génique clonée au sein de bactéries (E. coli)* ou de levures (Pichia pastoris) : protéine recombinante * attention à la glycosylation de la protéine : misfolding ? 11

■ TEST DE DEPISTAGE : RECHERCHE d’Ig. E spécifiques : TESTS MULTI-ALLERGENIQUES - AÉRO-ALLERGÈNES

■ TEST DE DEPISTAGE : RECHERCHE d’Ig. E spécifiques : TESTS MULTI-ALLERGENIQUES - AÉRO-ALLERGÈNES : Phadiatop® → Mélangede protéines (de composition imprécise) : animaux, acariens, moisissures, de pollens d’arbres, de graminées, et d’herbacées → Spécificité de 92% (N. E. Eriksson Allergy 1990, 45: 285 -292) LA NOMENCLATURE : 1 MELANGE "PNEUMALLERGENES" par ordonnance +++ (Phadiatop®) ■ TESTS MULTIALLERGÉNIQUES : ALLERGÈNES ALIMENTAIRES (Trophatop® Enfant, Trophatop® Adulte, Phadiatop® Nourrisson) → TROPHATOP® Enfant : Dépistage de l‘allergie alimentaire chez l’enfant fx 26 Blanc d’œuf Lait Arachide Moutarde et fx 27 Poisson Soja Noisette Blé fx 28 Crevette Bœuf Kiwi Sésame ère 1 e c n a n n o d or → TROPHATOP® Adulte : ou fx 5 fx 24 fx 25 Blanc d’œuf Lait Arachide Blé Poisson Soja Crevette Noisette Kiwi Banane Céleri Ail Levure Césame → PHADIATOP® Nourrisson : (contient des pneumallergènes et des trophallergènes) LA NOMENCLATURE : 3 MELANGES ALIMENTAIRES par ordonnance 12

Choix guidé(s) par la clinique, les tests cutanés, la connaissance de l’allergologie (allergies croisées)…

Choix guidé(s) par la clinique, les tests cutanés, la connaissance de l’allergologie (allergies croisées)… ■ Dosage d’Ig. E SPECIFIQUES des PNEUMALLERGENES : tests unitaires Symptomatologie per annuelle d 1 Dermatophagoïdes pteronyssinus e 1 chat (squames) / e 5 chien (squames) ou e 3 cheval (poils et squames) i 6 blatte germanique m 6 alternaria alternata ème ordonnance 2 aliste i c é p s e d e r i (une affa Symptomatologie saisonnière février à avril : t 2 Aulne, t 4 noisetier, t 15 frêne avril - mai : t 3 bouleau ou t 7 chêne mai à septembre : g 3 dactyle, w 20 ortie, m 2 ou m 6 LA NOMENCLATURE : 5 Ig. E antipneumallergènes SPECIFIQUES par ordonnance +++ !) ou ■ DOSAGE DES Ig. E SPECIFIQUES des TROPHALLERGÈNES : test unitaires Enquête alimentaire f 13 Arachide f 2 Lait de vache f 3 poisson. . LA NOMENCLATURE : 5 Ig. E antitrophallergènes SPECIFIQUES par ordonnance +++ 13

Nomenclature : Arrêté du 28 novembre 2003 TESTS DE DEPISTAGE TESTS D’IDENTIFICATION Recherche d’Ig.

Nomenclature : Arrêté du 28 novembre 2003 TESTS DE DEPISTAGE TESTS D’IDENTIFICATION Recherche d’Ig. E spécifiques vis à vis de MÉLANGES d’allergènes 1 Ordonnance indiquant au maximum : Tests de quantification des Ig. E spécifiques vis à vis d’ALLERGENES UNITAIRES 1 Ordonnance indiquant au maximum : 5 tests pour les catégories : 1 mélange respiratoire ■ ■ ■ 3 mélanges alimentaires ■ Aliments Pneumallergènes Venins Médicaments 1 test pour le latex Ig. E Totales …pourrait être pertinent de réviser la nomenclature ! 14

LES COMPOSANTS MOLECULAIRES des allergènes Recherche d’Ig. E spécifiques vis-à-vis d’allergènes recombinants ou natifs

LES COMPOSANTS MOLECULAIRES des allergènes Recherche d’Ig. E spécifiques vis-à-vis d’allergènes recombinants ou natifs (3ème niveau de complexité) - …Sont des protéines spécifiques : marqueurs de réactivités spécifiques ou croisées - De stabilité différente (c’est-à-dire au cours de l’exposition de l’individu) - (En quantité différente d’un allergène à l’autre) ? L’identification d’Ig. E spécifiques dirigées contre ces composants moléculaires PERMET : - Meilleure évaluation du risque de symptômes et de sévérité : quels aliments, sous quelle forme (exclusion stricte / aliments cuits ou non) - Évaluation des réactions croisées (et de leurs risques) - Meilleure prise en charge (besoin d’une trousse d’urgence, ou non) et donne une orientation pour l’immunothérapie allergénique (ITA) - Suivi du développement d’une tolérance (quand réintroduire l’aliment) Ces tests sont : « Standardisables » donc plus reproductibles

INTERPRETATION DES DOSAGES → Tests de dépistage : Résultat « POSITIF » ou «

INTERPRETATION DES DOSAGES → Tests de dépistage : Résultat « POSITIF » ou « NEGATIF » (seuil à 0, 35 k. UA/L) ( « ½ quantitatif » ) → Tests unitaires : seuil à 0, 10 k. UA/L (quantification possible) - Présence, ou non, d’Ig. E spécifiques pour l’allergène testé ? - Ig. E = SENSIBILISATION SI CLINIQUE ÉVOCATRICE = ALLERGIE - Plus la concentration en Ig. E mesurée est élevée, plus le risque d’allergie est élevé. - Le diagnostic d’allergie sera posé en fonction des autres éléments du bilan allergologique : CLINIQUE +++ - Le taux d’Ig. E n’est pas proportionnel au risque de gravité +++ (choc anaphylactique avec des taux faibles !!) 16

QUE DIRE DE CES TESTS ? . . . en termes de perfomances ■

QUE DIRE DE CES TESTS ? . . . en termes de perfomances ■ TESTS D’ORIENTATION PAR GROUPE D’ALLERGENES in vitro ( « mélanges » ) sensibilité (%) Fx 5 (aliments enfant) 80 - 90 Fx 10 (viandes) 80 - 90 Fx 9 (fruits exotiques) 50 - 60 Fx 7 (légumes) 40 - 50 • • • LIMITES Réponse « qualitative » >> « quantitative » Valeur prédictive variable : selon les tests et l’âge • • • Variabilité inter-lots de l’extrait allergénique !! • FAUX POSITIFS Taux élevés d’Ig. E totales (> 3 000 UI/m. L) Polysensibilisations Réactivités croisées pollens/aliments • • (seuil à 0, 35 k. UA/L) FAUX NEGATIFS Absence de l’allergène du mélange composition Phadiatop® ? Monosensibilisation Taux faibles d’Ig. E spécifiques ■ TESTS MONOSPECIFIQUES in vitro « (tests unitaires) » Seuil à 0, 10 k. UA/L Sensibilité : meilleure Incertitude de mesure : (voir plus loin) Attention : variations inter-lots CE QUE COÛTE CES TESTS D’ALLERGIE ? 1ère ordonnance Entre 13, 8 et 55, 1 € 2ème ordonnance Entre 41, 3 et 344, 25 € Mélanges d’allergènes ou pneumallergènes : entre 6, 20 € et 7, 72 € TTC (hors personnel) B 51 (13, 77 €) Tests unitaires (coûts réactifs) : entre 6, 20 € et 12, 45 € TTC B 51 (13, 77 €) 17

Petit exercice k. UA/ L Évolution des titres d'Ig. E Spécifiques « ara h

Petit exercice k. UA/ L Évolution des titres d'Ig. E Spécifiques « ara h 1 » 12 11 10 9 ITA 8 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Comment jugez vous l’évolution des titres ?

0, 7 k. Ua/L 0, 5 k. Ua/L e r u s e m

0, 7 k. Ua/L 0, 5 k. Ua/L e r u s e m e d u Incertit ) % 0 1 ± ( ! % 0 2 = Évolution des titres du CQI F 13 novembre 2016 - janv 2018

Cas 1 Ig. E (k. U/L) 23/12/2015 f 13 f 352 r. Ara h

Cas 1 Ig. E (k. U/L) 23/12/2015 f 13 f 352 r. Ara h 8 f 422 r. Ara h 1 f 423 r. Ara h 2 f 424 r. Ara h 3 f 427 r. Ara h 9 Cas 2 54. 5 <0, 1 10. 4 28. 4 0. 16 01/06/2016 63. 4 <0, 1 14. 7 43. 2 0. 27 <0, 1 30/11/2016 22/11/2017 88. 9 <0, 1 27. 2 57. 7 0. 54 <0, 1 66. 6 <0, 1 15. 5 45. 6 0. 29 <0, 1 09/03/2017 13/10/2017 Ig. E (k. U/L) f 13 f 352 r. Ara h 8 f 422 r. Ara h 1 f 423 r. Ara h 2 f 424 r. Ara h 3 f 427 r. Ara h 9 >100 0. 1 >100 19. 7 >100 58. 7 <0, 1 31. 1 9. 22 19. 1 0. 14 Cas 3 16/07/2009 04/11/2016 07/08/2017 Ig. E (k. U/L) f 13 77 >100 81. 6 f 352 r. Ara h 8 f 422 r. Ara h 1 <0, 1 12. 7 45. 2 f 423 r. Ara h 2 f 424 r. Ara h 3 f 427 r. Ara h 9 97. 8 14. 7 <0, 1 69. 4 14. 1

Interprétation : - Je ne sais pas… - Que me faut-il pour m’exprimer ?

Interprétation : - Je ne sais pas… - Que me faut-il pour m’exprimer ? - Je ne peux pas me prononcer sur des seuls résultats biologiques !

23/12/2015 Ig. E (k. U/L) Ig. G 4 (mg/L) f 13 f 352 r.

23/12/2015 Ig. E (k. U/L) Ig. G 4 (mg/L) f 13 f 352 r. Ara h 8 f 422 r. Ara h 1 f 423 r. Ara h 2 f 424 r. Ara h 3 f 427 r. Ara h 9 54. 5 <0, 1 10. 4 28. 4 0. 16 f 13 f 423 r. Ara h 2 01/06/2016 30/11/2016 22/11/2017 63. 4 <0, 1 14. 7 43. 2 0. 27 <0, 1 88. 9 <0, 1 27. 2 57. 7 0. 54 <0, 1 66. 6 <0, 1 15. 5 45. 6 0. 29 <0, 1 0. 33 0. 77 2. 85 3. 49 2. 92 3. 78 Test dégranulation des basophiles : F 13 Test dégranulation des basophiles : ara h 2 100 90 90 80 70 seuil positivité 60 Témoin neg nov 2016 50 40 TAB f 13 11/17 nov 2017 30 20 juin 2016 80 juin 2016 70 seuil positivité 60 nov 2016 50 TAB f 13 11/16 40 TAB f 13 06/16 30 Témoin neg TAB Ara h 2 11/17 nov 2017 TABAra h 2 11/16 TAB Ara h 2 06/16 20 10 10 0 1 1/5 1/100 1/1000

09/03/2017 13/10/2017 Ig. E (k. U/L) f 13 f 352 r. Ara h 8

09/03/2017 13/10/2017 Ig. E (k. U/L) f 13 f 352 r. Ara h 8 f 422 r. Ara h 1 f 423 r. Ara h 2 f 424 r. Ara h 3 f 427 r. Ara h 9 >100 0. 1 >100 19. 7 >100 58. 7 <0, 1 31. 1 9. 22 19. 1 0. 14 Ig. G 4 (mg/L) f 13 f 423 r. Ara h 2 0. 79 0. 27 11. 5 8. 68 Test dégranulation des basophiles : F 13 120 Test dégranulation des basophiles : ara h 2 100 90 100 80 80 60 seuil positivité 70 Témoin neg 60 seuil positivité Témoin neg 50 40 TAB f 13 10/17 40 TAB f 13 03/17 30 TAB Arah 2 10/17 TAB Arah 2 03/17 20 20 10 0 1 1/5 1/100 1/1000

16/07/2009 Ig. E (k. U/L) 77 07/08/2017 >100 81. 6 f 352 r. Ara

16/07/2009 Ig. E (k. U/L) 77 07/08/2017 >100 81. 6 f 352 r. Ara h 8 f 422 r. Ara h 1 <0, 1 12. 7 45. 2 f 423 r. Ara h 2 f 424 r. Ara h 3 f 427 r. Ara h 9 97. 8 14. 7 <0, 1 69. 4 14. 1 Ig. G 4 (mg/L) f 13 f 423 r. Ara h 2 0. 37 <0, 15 29. 3 25. 6 120 f 13 04/11/2016 Test dégranulation des basophiles : F 13 100 120 100 nov 2016 80 60 Test dégranulation des basophiles : ara h 2 seuil positivité Témoin neg août 2017 TAB f 13 08/17 40 TAB f 13 11/16 20 nov 2016 80 60 40 seuil positivité Témoin neg août 2017 TAB Ara h 2 08/17 TAB Ara h 2 11/16 20 0 0 1 1/5 1/100 1/1000

Conclusion ?

Conclusion ?

Médiateurs de l’anaphylaxie

Médiateurs de l’anaphylaxie

TRYPTASE Reflet de l'activation mastocytaire tissulaire ++ – (très peu présente dans les PN

TRYPTASE Reflet de l'activation mastocytaire tissulaire ++ – (très peu présente dans les PN Basophiles) Si allergie Hyménoptères : tryptase totale dans les 15 à 60 mn Si accident per-anesthésique : tryptase totale dès la 10ème min avec pic entre 20 à 30 mn si Hypo. TA Prélèvement dans les 2 heures après le début des symptômes

TRYPTASEMIE (TOTALE) • Dosages possibles depuis 1997 Uni. CAP, Thermofisher – Scientific (ex Pharmacia,

TRYPTASEMIE (TOTALE) • Dosages possibles depuis 1997 Uni. CAP, Thermofisher – Scientific (ex Pharmacia, Phadia) • Dosage Immunofluorométrique sur PLASMA (tube avec anti-coagulant : EDTA, citrate) ou SÉRUM (tube sec) y=1. 004 x+0. 08257 r 2=0. 9949 http: //biologiepathologie. chru-lille. fr/catalogueanalyses/Detail. php? code. Catalogue. Analyses=4584 Coût B 80, remboursé sécu (21. 6 €)

 • Conservation facile : 1 semaine à +4°C (au-delà : congeler) n =

• Conservation facile : 1 semaine à +4°C (au-delà : congeler) n = 604 médiane = 4. 9 µg/L min = 0 max = 296 µg/L n = 1076 médiane = 5. 0 µg/L min = 0 max = 890 µg/L Figure 1 : Dispersion des résultats de tryptase entre les demandes intérieures et extérieures pour l’année

TRYPTASE TOTALE - « Valeur normale » = variable +++ selon les individus !

TRYPTASE TOTALE - « Valeur normale » = variable +++ selon les individus ! Médiane de 1 400 valeurs (CHU Lille) : [4 - 4. 4] µg/l (IC 95%) hoc ! c le s è r p a t Pas trop tô ation im t s e s u o s risque de - Selon fournisseur de réactifs : Normale < 11 µg/L Il existe pourtant de véritables chocs avec libération de tryptase < 11 µg/L (grades 1 ou 2 !) Intérêt d’un dosage à distance ( « taux de base » , fait à 24 / 48 h de l’épisode) alors « POSITIF » si - « doublement du taux de base » (exemple : 5 10µg/L) me Dans le mê !!! laboratoire + « fin » : - si « 1. 2 x taux de base + 2 » (exemple : 5 8 µg/L) Incertitude de mesure = 20% ! (pour les « bons » laboratoires !!) : Un résultat rendu à 10 µg/L est compris entre 9 et 11 µg/L

CONCLUSION « TRYPTASE » – Prélèvement sur tube sec (ou EDTA) après les gestes

CONCLUSION « TRYPTASE » – Prélèvement sur tube sec (ou EDTA) après les gestes d'urgence dans les 60 mn après les 1 ers signes – Prélèvement à répéter à 24 ou 48 h si réaction modérée (=témoin de la tryptase de base) – Éviter prélèvement en post-mortem – Taux élevé si prélèvement difficile, mastocytose systémique, ischémie myocardique, massage cardiaque

Histaminémie Le dosage de l’histaminémie plasmatique serait un marqueur plus sensible que la tryptasémie

Histaminémie Le dosage de l’histaminémie plasmatique serait un marqueur plus sensible que la tryptasémie au cours des réactions (chocs, tests de provocation) faibles à modérées. sur EDTA, ça marche aussi

Méthode de dosage : Radio Immuno Assay (RIA = utilisation d’isotopes radioactifs) ; possible

Méthode de dosage : Radio Immuno Assay (RIA = utilisation d’isotopes radioactifs) ; possible spectrométrie de masse Les valeurs usuelles : < 10 nmol/l (<1 μg/l) (sensibilité analytique : 0. 05 nmol/l) Difficultés : • Demi-vie extrêmement courte : ≤ 2 minutes de l’histamine (sujets sains) impose un prélèvement dans les 10 – 30 minutes suivant un accident anaphylactique • Les basophiles peuvent libérer in vitro une fraction variable de leur contenu en histamine, et ainsi conduire à des erreurs par excès • Des quantités importantes d’histamine peuvent être retrouvées dans les urines (notamment de sujets de sexe féminin) du fait de la présence dans le tractus urogénital de bactéries commensales productrices d’histamine. Le dosage de l’histamine sera confronté à celui de la tryptase mastocytaire : sensibilité Autre indication ? tests de provocation (alimentaires, médicamenteux) sous surveillance médicale stricte en milieu hospitalier (T 0, T + 5, T + 10, T + 15, T + 30 et T + 60 minutes de l’épreuve). Coût : 40. 5 € / non remboursé par la SS

METHYL-HISTAMINE URINAIRE Avantages Inconvénients Recueil facile et retardé (1 heure après les 1 ers

METHYL-HISTAMINE URINAIRE Avantages Inconvénients Recueil facile et retardé (1 heure après les 1 ers Filtration glomérulaire non perturbée ? (IRF, IRC) signes) Il existe plusieurs dosages possibles (RIA, spectrométrie de masse) Myorelaxant (responsable d’un inhibition de N- méthyltransférase) Pour tenir compte de effet dilution : résultat Variabilité liée au régime alimentaire +++ rapporté à créatinurie sur le même échantillon Métabolite stable (> 1 semaine) Tx élevés dans la mastocytose systémique Commercialisation du Kit arrêtée depuis peu… Coût : 54 € / non remboursé par la SS

ECP = Eosinophil Cationic Protein Tests commerciaux de dosage : Immunocap (Thermofisher) – À

ECP = Eosinophil Cationic Protein Tests commerciaux de dosage : Immunocap (Thermofisher) – À partir du sérum… donc dosage non reflet de ECP circulant mais de ECP libérée par les éosinophiles du tube ! – Mauvais examen…car difficulté de reproduire pour chaque test – Même condition de prélèvement – Même délai d’acheminement, conditions de transport

Statistiques dossiers tryptase/histamine 2015 (1/01 -31/07) N=209 patients ayant eu à la fois au

Statistiques dossiers tryptase/histamine 2015 (1/01 -31/07) N=209 patients ayant eu à la fois au moins 1 dosage d’histamine et de tryptase N ↗ N 63% (n=132) 16% (n=34) ↗ 6% (n=12) 15% (n=31) Histamine Tryptase Sur les 34 patients présentant une tryptase N et une histamine ↗ (≥ 30 ): § 31 dossiers extérieurs o 2 dossiers Tél: suspi choc anaphylactique • • suspicion de choc anaphyl au latex des gants, Ig. E spé latex nég: Trypt=4 puis 5, 6 à +1 h 30 et 3, 1 à +24 h et Histam= 74, 2 patient dcd : choc anaphyl? , Ig. E spé N IVaire=2, 54 et latex nég: Trypt=10, 1 et 9, 3 à +1 h 30 et Histam= 87 puis 10, 3 (délai inconnu) o 29 dossiers contexte inconnu • Ig. E spé ou demande RAST, CLA pour 13 patients/29 v Ig. E spé N IVaire nég pr 3 patients, à 0, 41 pr 1 patient et 1, 5 pr 1 patient v Ig. E spé latex et N IVaire nég pr 1 patient, Ig. E spé latex 0, 85 et N IVaire nég pr 1 patient v Ig. E spé latex, N IVaire et cephalosporium nég pr 1 patient v Ig. E spé crevette 4, 06 pr 1 patient et Ig. E spé carotte 1, 43 et gliadine nég pr 1 patient v CLA pneum et trophallergènes nég pr 1 patient v 1 demande de RAST vanco et 1 demande de RAST esmeron ms NSFP § 3 patients du CHRU (2 chocs/1 pas d’explication) o o o Choc anaphylactique aux pénicillines dès les IDR lors d’un bilan allergo pour suspicion d’allergie Trypt=9, 3 Histam=93, 4 puis 72 à +45 min Choc grade I (urticaire+hypo. T) à altim + pdc iodés lors d’une infiltration genou (tests cut+) Trypt=18, 2 Histam=136, 1 Bloc pour lobectomie – pas de notion de choc ? : raison de réalisation des dosages? , Ig. E spé suxamethonium 1, 05 k. Ua/ L Trypt=1, 1 puis 1, 2 à +2 h et <1 à +24 h Histam=10 puis 204 à +30 min

Statistiques dossiers tryptase/histamine 2014 N=270 patients ayant eu à la fois au moins 1

Statistiques dossiers tryptase/histamine 2014 N=270 patients ayant eu à la fois au moins 1 dosage d’histamine et de tryptase N ↗ N 74% (n=200) 10% (n=27) ↗ 4% (n=12) 11% (n=31) Histamine Tryptase Sur les 27 patients présentant une tryptase N et une histamine ↗: § 25 dossiers extérieurs o 3 dossiers Tél: choc anaphylactique • • • injection Profenid: bronchospasme, cyanose, érythème galisé, choc: Trypt=11, 5 et Histam= 85 et 9, 3 à +4 h choc anaphyl grade 3: hypo. T, érythème galisé, tachy. C, Ig. E spé N IVaire=77, 1: Trypt=14, 2 et Histam= 480 choc anaphylactique tavanic ou claforan? : Trypt=14, 1 et 10, 2 à +1 h et 16, 9 à +2 h 30 et Histam= 249 et 40 à +1 h et 7, 5 à +2 h 30 o 22 dossiers contexte inconnu • Ig. E spé pour 3 patients/22 v latex et N IVaire nég v latex 0, 33 cefaclor neg v suxamethonium 0, 17 N IVaire 0, 45 § 2 patients du CHRU (2 chocs) o o Choc anaphylactique (V, œdème, urticaire) aux pdc iodés lors d’un scanner (tests cut. NR pour le moment) Trypt=2, 8 Histam=41 Choc anaphylactique à l’augmentin pr suspi de pneumopathie d’inhalation aux urg (pas de test cut) - contexte a posteriori : scan + bloc neurochir pr hématome Trypt=19, 2 puis 12, 6 à +2 h Histam=116 puis 18, 9 à +2 h

Remerciements Dr Stéphanie ROGEAU (Lille) Dr Séverine BRABANT (Lille) Dr Cyril HOARAU (Tours) Dr

Remerciements Dr Stéphanie ROGEAU (Lille) Dr Séverine BRABANT (Lille) Dr Cyril HOARAU (Tours) Dr Joana VITTE (Marseille) Pr Frédéric BERRARD (Lyon) Madame Véronique HARDOUIN (Thermo. Fisher) Merci de votre attention (voir quand même après ) Qui contacter au laboratoire ? Dr Stéphanie ROGEAU : 03 20 44 55 74 stephanie. rogeau@chru-lille. fr sylvain. dubucquoi@chru-lille. fr pour récupérer l’enseignement : http: //biologiepathologie. chru-lille. fr/enseignement/

Informations utiles ? Sources : Madame Véronique HARDOUIN, Thermofisher Scientific

Informations utiles ? Sources : Madame Véronique HARDOUIN, Thermofisher Scientific

Allergologie Moléculaire: Les familles de protéines Asymptomatique 1 (habituellement) Réactions locales 1 (principalement) Réactions

Allergologie Moléculaire: Les familles de protéines Asymptomatique 1 (habituellement) Réactions locales 1 (principalement) Réactions locales et systémiques 1 Réactivité croisée Risque Niveau croissant de réactivité croisée Profiline 1 Réactions systémiques 1 Risque croissant de réactions et de symptômes sévères PR-101 LTP 1 Protéines de stockage 1

INDICATION D’UNE IMMUNOTHERAPIE (1) 43

INDICATION D’UNE IMMUNOTHERAPIE (1) 43

INDICATION D’UNE IMMUNOTHERAPIE (2) 44

INDICATION D’UNE IMMUNOTHERAPIE (2) 44

ACARIENS 45

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ALPHA-GAL 46

ALPHA-GAL 46

ANIMAUX 47

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ARACHIDE 48

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BLE 49

BLE 49

BOULEAU 50

BOULEAU 50

GRAMINEES 51

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LAIT 52

LAIT 52

NOISETTE 53

NOISETTE 53

NOIX 54

NOIX 54

NOIX DE CAJOU 55

NOIX DE CAJOU 55

ŒUF 56

ŒUF 56

POMME 57

POMME 57

SOJA 58

SOJA 58

VENINS D’HYMENOPTERES 59

VENINS D’HYMENOPTERES 59