VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA
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VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA
VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA Familia Retroviridae Subfamilia Orthoretrovirinae Género Lentivirus Tipos: VIH-1 y VIH-2 ü Virus esférico envuelto (90– 130 nm) ü Genoma: 2 hebras simples de ARN + (9, 8 kb) ü Proteínas de Superficie gp 120 -gp 41 // gp 105 -gp 36 ü Polimerasas unidas al ARN p 65/51; p 31 // p 68 – p 34 ü Proteinas del Core p 17 -p 24 // p 16 - p 26
• Los viriones contienen 2% de ácido nucleico. (2 ARN (+) y 1 ARNt (trp, pro, lys) • Genoma : 2 moléculas de ARN de sentido positivo que poseen cap en el extremo 5’ y una cadena poly. A en su extremo 3’. • Su tamaño varía entre 8 a 11 kb. R: repetidos directos (18 -250 nt) U 5: región no codificante. Comienza retrotranscripción PBS: sitio de union del primer para la retrotranscripción Leader: aprox 90 -500 nt. Está en el extremo 5’ de todos los ARNm VIH-1 VIH-2 PPT: zona de polipurinas. (aprox 10 nt). Lugar de iniciación de la síntesis de la hebra + durante la retrotranscripción U 3: Contiene los elementos promotores de la transcripción del provirus gag: codifica proteinas del Core y la PR pol: codifica enzimas (RT, IN) env: codifica glicoproteinas de superficie
Organización genómica del HIV-1
Ciclo replicativo del HIV
DIVERSIDAD GENETICA DEL VIH TIPO HIV-1 HIV-2 GRUPO SUBTIPO M A, B, C, D, E, F G, H, I, J, K, L (mayor) O (outlier) N (no M, no O) RECOMBINANTES A, B, C, D, E, F B/F, A/G, A/E, A/C, A/G/J
Alta tasa de variabilidad • Alta tasa de error en la lectura de la Retrotranscriptasa: 1 nucleótido/ciclo replicativo • Alta tasa de replicación viral: 4, 4 x 1010 particulas virales por dia. • Recombinacion retroviral: “Formas Recombinantes Circulantes” (CRFs), “Formas Recombinantes Unicas” (URFs) VIRUS HETEROCIGOTO VIRUS RECOMBINANTE
ESTRUCTURA GENÓMICA DE LAS FORMAS RECOMBINANTES CRFs URFs A B C D E F G H J K Sin Clasificar Sin Secuenciar
Distribución geográfica del VIH (Tipos, Subtipos y CRFs) A A A, B A, D, E, O B, A, C, D, G A, C, D, F A, B B A A, B, B , C, D A, B B, D C, D B/F, B/D A ? CRF 12 -BF B, F, C VIH-1 VIH-2
HISTORIA NATURAL DE LA INFECCION POR VIH Seroconversión 4 -8 semanas Infección asintomática aprox. 10 años SIDA 2 -3 años
CICLO DEL VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA PCR DNA proviral (cualitativa) ARN viral HIV RNA viral (cualitativa) Carga Viral (nºde copias ARNv /ml) (cuantitativa) Células blanco: Linfocitos T CD 4, Monocitos, Macrofagos, Células de Langherans, Células dendríticas
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Estudio de respuesta inmune humoral: Ig. M, Ig. A, Ig. G • Test de Tamizaje : • Enzimo inmuno análisis (EIA) • Test rápidos • Aglutinación de partículas • Test Confirmatorios • Western Blot (WB) • Ensayo en Línea (LIA) Detección directa de presencia viral • Estudio de Proteinas virales (Ag p 24) • Estudio de Acidos nucleicos: ADN proviral ARN viral
Estudio de respuesta inmune humoral: Ig. M, Ig. A, Ig. G Los test serológicos se basan en la interacción Antígeno – Anticuerpo. • Test de Tamizaje • Son altamente sensibles para poder detectar los Ac en la muestra. • Detectan anticuerpos para HIV-1 y HIV-2 (sin lograr discriminar) • Detectan anticuerpos contra grupo M y O • Antígenos: Lisado total de virus, Proteinas recombinantes, Peptidos sintéticos • Test Confirmatorios • Son altamente específicos para confirmar con certeza la presencia de Ac. Específicos contra HIV. • Pueden discriminar infección por HIV-1 o por HIV-2
EIA 4ª GENERACION HIV-2 env HIV-1 env Proteinas recombinantes HIV-1 gag Peptidos sinteticos HIV-O Ac paciente Sustrato Ag viral E Ac conjugado • Muy buena especificidad v -1 en l V I o H -1 p HIV -2 en v -1 en l V I o H -1 p HIV E E E HIV E v • Detecta bajos títulos de Anticuerpos (seroconversión) HIV-2 nv He. IV-1 env HIV 1 gag HIV-O HIV-2 Soporte Solido • Buena sensibilidad para Ac. anti HIV-2 y Ac. anti grupo M y O de HIV-1, • Detecta Ig. G e Ig. M • Detecta Ag virales HIV-1 (grupo M y O) HIV-2
TEST RAPIDOS
TEST CONFIRMATORIOS Western Blot LIA ID muestra 3. + 1+ +/gp 120 gp 41 p 31 p 24 P 17 Criterios: WB Positivo: p 24, gp 41, gp 120/160 (p 24 con al menos otra) WB Negativo: Ausencia total de Bandas gp 105 gp 36 WB mejorado
Algoritmo para el diagnóstico serológico de la infección por VIH No Reactivo informar Laboratorio Periférico Técnicas de Tamizaje Banco de Sangre Reactivo No Reactivo (-/-) informar Laboratorio de Referencia 2 Técnicas de Tamizaje Distinta Configuración antigénica Reactivo (+/+) Discordante (+/-) WESTERN BLOT INFORMAR Positivo * Indeterminado Repetir serología en 30 días Negativo
Diagnostico Molecular de la Infección por HIV Detección cualitativa de Acido Nucleico (ADN proviral o ARN viral) • Diagnóstico en niños nacidos de madres seropositivas • Serología indeterminada • Hipoglobulinemia Detección cuantitativa de Acido Nucleico (ARN viral) Carga Viral ( nº copias de ARN v/ml) en pacientes infectados Inicio de tratamiento Evaluación de tratamiento Cambios de tratamiento Estudio resistencia a drogas antiretrovirales
infectado serorrevertido Ig. A en sangre: indicador de una respuesta inmunológica específica a la infección viral en el niño.
Seguimiento en el laboratorio del niño nacido de madre VIH + 48 hs – 2 semanas de vida PCR, Elisa, Western Blot PCR - 1 – 2 meses de vida PCR - >5 meses de vida PCR + PCR Carga Viral Población Linfocitaria PCR - Infección poco probable PCR + nueva PCR+- • PCR • Carga Viral • Población Linfocitaria PCR + PCR - PCR Carga Viral Población Linfocitaria PCR PCR + PCR - infectado PCR + nueva PCR
Seguimiento en el laboratorio del niño nacido de madre VIH + • Diagnostico de no infección: 3 PCR – 2 muestras negativas en dos momentos distintos en niños >1 mes de vida, más 1 muestra negativa en > 4 meses de vida • Diagnostico de infección: 3 PCR + 3 muestras positivas en dos momentos distintos y al menos una de ellas en niños > 4 meses • Diagnostico de serorreversión: 2 o más muestras con ELISA y Western Blot negativos entre los 6 y 18 meses de edad y dosificación de inmunoglobulinas normales En todos los casos seguir con ELISA hasta 18 meses de edad
El LABORATORIO de VIROLOGÍA EN LA INFECCIÓN POR VIH EN PEDIATRIA Diagnostico de la Infección por VIH • Niños mayores de 18 meses: ELISA - Western Blot • Niños menores de 18 meses: Determinación Cualitativa ADN proviral ARN viral Seguimiento de Niños infectados • Carga Viral : nº de copias de ARN v/ ml Inicio de tratamiento Evaluación de tratamiento Cambios de tratamiento • Estudio de Resistencia a drogas antirretrovirales
ADULTOS Y NIÑOS QUE VIVIAN CON EL VIH A FINES DEL 2006
Epidemia de SIDA en Uruguay 1983 inicio de la epidemia del VIH/SIDA 6. 463 casos acumulados de VIH + (1983 - 06/2006) 2. 895 casos acumulados de SIDA (1983 - 06/2006) 9. 358 casos acumulados VIH/SIDA (1983 -06/2006)
MECANISMO DE TRANSMISIÓN SIDA EN URUGUAY - 2006
RELACION H/M EN SIDA ANUAL URUGUAY. - Años 1991 -2005.
VIH Y SIDA POR GRUPOS ETARIOS URUGUAY. - Años 1983 -2005.
Estado de Situación • Tendencia creciente del VIH /SIDA Prevalencia de 0, 23% en el 2000 a 0, 45% 2004 • Pico máxima incidencia en población joven, con aumento progresivo de las mujeres. JUVENILIZACIÓN Y FEMINIZACIÓN DE LA EPIDEMIA • La situación de vulnerabilidad de mujeres y adolescentes / jóvenes, y de las poblaciones con prevalencia mayor a 5%: usuarios de drogas, hombres que tienen sexo con hombres (HSH), personas privadas de libertad,
Uno de los riesgos de ésta epidemia es el Silencio Rompamos el silencio y derribemos los obstáculos que impiden una prevención y atención del VIH/SIDA eficaces.
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