DENGUE Seminrio Rede DENGUE desafios para Polticas Integradas

DENGUE Seminário Rede DENGUE: desafios para Políticas Integradas de Ambiente, Atenção e Promoção da Saúde Rita M R Nogueira , Ph. D Laboratório de Flavivirus, IOC/FIOCRUZ rita@ioc. fiocruz. br

VÍRUS DENGUE Família Flaviviridae Gênero Flavivirus n n n Possui 4 sorotipos distintos (DENV-1, 2, 3, 4) Causa DC e FHD É um arbovirus, transmitidos por mosquitos

Organização da Partícula e Genoma Virais Nucleocapsídeo M Bicamada Lipídica E pr. M 30 -50 nm RNA fita simples (+) 3 ptns estruturais 7 ptns não- estruturais

Introdução dos Vírus Dengue no Brasil Roraima 1982 - DENV-1 DENV-4 Agosto de 2010 - DENV-4 Belém 1989 - DENV-2 Caso Importado Rio de Janeiro São Paulo 1998 - DENV-3 Caso Importado 1986 - DENV-1 1990 - DENV-2 2000 - DENV-3

Casos de Dengue, FDH, Óbitos e sorotipos circulantes no Brasil, 2010* RR Isolamento DENV-4 DEN 1 DEN 2 DEN 3 DEN 1, DEN 2 Casos NOTIFICADOS : 942. 153 Casos CONFIRMADOS: 482. 284 FHD: 2. 271 Óbitos : 367 Predomínio DENV -1 Isolamento DENV-4 DEN 2, DEN 3 DEN 1, DEN 2, DEN 3 Sem positivvos sem circulação Até a 22º SE Fonte: SVS-MS

Rede Nacional de Diagnóstico de Dengue *5 Laboratórios de Referencia Regional AP RR (IAL/SP, FIOCRUZ/RJ, LACEN/DF, LACEN/PE e IEC/PA) ** Laboratorio de Referencia Nacional PA** AM (IEC/PA) CE RN MA PI AC TO RO SE BA MT Isolamento de Virus 18 estados GO DF-* (RR, AP, PA, TO, CE, RN, PE, AL, BA, MG, ES, RJ, SP, DF, GO, MS, PR e RS) MS SP* Sorologia: 118 labs em estados RT-PCR: 4 estados (CE, PE, AL, GO) e 3 instituto PE* MG ES RJ* PR SC (IEC/PA, IAL/SP e RS FIOCRUZ/RJ) Unidades Sentinelas que utilizam o NS 1 como Triagem: 59 SOURCE: SES/FUNASA

Sorotipos de Dengue circulantes no Rio de Janeiro, 2001 -2009 Re-emergência do Dengue tipo 2 2001 2002 2004 2003 2005 DENV-2 Abril/2007 DENV-1 Dezembro/2009 2006 2007 2008 2009 2010

Diagnóstico Laboratorial do Dengue Isolamento Viral • Cultura de células de mosquito A. albopictus clone C 6/36 Detecção de ácido nucléico viral • RT-PCR, PCR em tempo real Sorologia • Mac-ELISA, Ig. G-ELISA, Captura de antígeno NS 1, Kits comerciais, PRNT Histopatologia e Imunohistoquímica

Proteína NS 1 Proteína de 46 k. Da altamente conservada Essencial para a replicação viral Produzida associada à membrana e sob a forma secretada no soro Encontrada abundantemente no soro de paciente de dengue na fase aguda da doença

RESPOSTA IMUNE NAS INFECÇÕES POR DENGUE Infecção Primária Níveis de anticorpos e antígeno (início dos sintomas) Infecção Secundária (início dos sintomas) Ig. G Vírus Ig. M NS 1 Tempo Ig. M

Sensibilidade dos testes de captura de NS 1 de acordo com o número de dias de sintomas (n=220)

Detecção de DENV-3 por RT-PCR em casos suspeitos de dengue (n=326), 2002 0 -1 2 3 4 5 6 7 8 Número de dias após o início dos sintomas 9 10 Desconhecido

Diagnóstico de Dengue, Rio de Janeiro LABFLA, IOC/FIOCRUZ 2010* * Preliminares até 13/09/2010 Diagnóstico Positivo/ Testado(%) MAC-ELISA (Panbio) 29/106 (27, 4) Isolamento Viral RT-PCR 76/254 (30, 6) 170/381 (44, 6) Sorotipo - 23 DENV-1 52 DENV-2 1 DENV-3 33 DENV-1 134 DENV-2 3 DENV-3 NS 1 Platelia (Biorad) 26/85 (30, 6) - NS 1 AG STRIP (Biorad) 26/73 (35, 6) -

Genótipos dos Vírus Dengue Weaver & Vasilakis (2009) Sorotipo DENV-1 DENV-2 DENV-3 DENV-4 Genótipos I II IV V Asiático II Cosmopolita Americano Sudeste Asiático/Americano Selvagem Distribuição geográfica Sudeste Asiático, China, Leste da África Tailândia (1950 -1960) Malásia (cepas selvagens) Ilhas do Oeste do Pacífico e Austrália Américas, Oeste da África Africano, Ásia Malásia e Tailândia Vietnã, da China, Taiwan, Sri Lanka e Filipinas Austrália, Leste e Oeste Africano, Ilhas dos oceanos Pacífico e Índico, Subcontinente Indiano e Oriente Médio América Latina, Caribe (1950 -1960), Subcontinente Indiano e Ilhas do Pacífico Tailândia, Vietnã, Américas (últimos 20 anos) Oeste Africano e Sudeste Asiático (cepas isoladas em humanos, mosquitos silvestres ou macacos sentinelas) I II IV Indonésia, Malásia, Filipinas e Sul da Ilhas do Pacífico V I Filipinas (1956), Japão (1973), China (1980) América do Sul (2002 -2004) Tailândia, Vietnã e Bangladesh Sri Lanka, India, África, Samoa, Tailândia (1962) Porto Rico, Américas Latina e Central, Taiti (1965) Tailândia, Filipinas, Sri Lanka e Japão (provenientes do Sudeste Asiático) II Indonésia, Malásia, Taiti, Caribe e Américas IV Malásia (cepas selvagens) Tailândia (cepas recentes)

Análise filogenética de 25 amostras de DENV-2 baseada na seqüência dos genes C/pr. M/M/E , 1991 -2010 Método de neighbor-joining, modelo Tamura Nei e bootstrap de 1000 pseudoréplicas

Análise filogenética de 7 amostras de DENV-1 baseada na seqüência do gene E Método de neighbor-joining, modelo Tamura Nei e bootstrap de 1000 pseudoréplicas

Investigação de casos fatais (n=29) por dengue Rio de Janeiro, 2002

RESPOSTA IMUNE EM MENORES DE 15 ANOS COM AMOSTRAS PAREADAS EM 2007, HMSF Nº CASOS n= 49 Primária Secundária

CASOS FATAIS DE DENGUE CONFIRMADOS LABORATORIALMENTE NO RIO DE JANEIRO DE ACORDO COM A IDADE Nº CASOS 2007 2008 FAIXA ETÁRIA 2007 n = 22 2008 n = 15 Laboratório de Flavivírus, Departamento de Virologia, IOC - FIOCRUZ

Casos Fatais confirmados de Dengue em 2007 -2008 no Estado do Rio de Janeiro, de acordo com sorotipo e resposta imune Primário Secundário Total: 94/195 (48, 2%)

Presença de sinais de gravidade de acordo com o sorotipo, Rio de Janeiro, 2007 -2008 (plaquetopenia < 50. 000/mm 3; choque; sangramento digestivo; derrame cavitário; insuficiência renal, respiratória ou hepática) DENV-3 (n = 364) DENV-2 (n = 189) Risco relativo = 3, 85 (IC 95% = 2, 67 – 5, 55) p < 0. 001

Obrigada !