Tincion Histologica Kinesiologia Professor Vernica Pantoja Lic MSP

Tincion Histologica “Kinesiologia” Professor: Verónica Pantoja. Lic. MSP. Reconocer las principales funciones y características fisiológicas de la sangre y relación con el sistema inmune. . IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Técnica Histológica • • Fijación Deshidratación Aclaramiento Inclusión Corte Tinción Montaje Seminario Anterior IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Colorantes • ¿Por qué muestra? colorear una Los diversos elementos de los tejidos poseen prácticamente el mismo índice de refracción, lo que hace que el reconocimiento de distintas estructuras sea una tarea difícil. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Tipos de Colorantes • Colorantes que diferencian los componentes ácidos y básicos de la célula. • Colorantes especializados que distinguen los componentes fibrosos de la matriz extracelular. • Sales metálicas que se precipitan en los tejidos y forman depósitos de metales en ellos. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Tipos de Coloraciones • Directas: se producen por inmersión en el baño colorante. • Indirectas: en este tipo de coloración, el colorante no puede actuar directamente, el objeto a colorear debe ser tratado de antemano por otra sustancia que lo prepare para admitir el colorante, esta se llama mordiente. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Fundamentos Químicos de la Coloración • Clasificación colorantes según afinidad: – Colorantes nucleares o básicos: su componente colorante activo es una base coloreada que se combina con los ácidos nucleicos. – Colorantes citoplasmáticos o ácidos: su componente activo es un ácido coloreado que se combina con el citoplasma. – Colorantes neutros, tanto el ácido como la base son coloreadas. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Colorantes básicos ANILINA+ Cl • Los colorantes básicos reaccionan con los GRUPOS ANIÓNICOS de los componentes texturales, que son los grupos fosfato de los ácidos nucleicos (ADN y RNA), los grupos SULFATO de los glucosaminoglucanos y los GRUPOS CARBOXILO de las proteínas. La reacción de estos grupos varía según el p. H. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Colorantes ácidos Na+ ANILINA • Los colorantes ácidos se unen primariamente a los componentes texturales por medio de enlaces electrostáticos de manera similar pero opuesta a la de los colorantes básicos. Las anilinas ácidas reaccionan con grupos catiónicos, como los grupos amino ionizados de las proteínas. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Entonces: • Elementos que se tiñan colorantes básicos (ej. Hematoxilina) son basófilos: – La Heterocromatina y los Nucleolos por los grupos Fosfato ionizados. – Ergatoplasma por grupos Fosfato ionizados. – Matriz del Cartílago por grupos Sulfato ionizados • Elementos que se tiñan colorantes ácidos (ej. Eosina) son acidófilos: – La mayor parte del citoplasma no especializado. – Filamentos Citoplasmáticos. – Fibras extracelulares. Todos estos debidos a grupos Amino ionizados. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Tinción (coloración) de cortes • Diferentes componentes celulares y tisulares poseen diferentes afinidades tintoriales. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Tinción (coloración) de cortes IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Hematoxilina-Eosina Técnica de tinción más usada. • Hematoxilina: – Colorante natural. – Propiedades similares a las anilinas básicas. – Tiñe todas las estructuras celulares, pero principalmente el núcleo (Histonas). • Eosina: – Colorante ácido. – Acción es la de una anilina ácida. – Tiñe ppalmente citoplasma celular. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Cortes de piel Tinción Hematoxilina-Eosina IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Tinciones Especiales IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Tinciones para Amiloide Rojo Congo (cortes ± 30 mm) H/E IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Tinciones para Amiloide Birrefringencia IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Bacterias c c Gram negativo: colonias bacterianas se tiñen rojas a d b a y b Gram positivos: tinción azul d FITE: bacilos ácido resistentes rojo IPCHILE - Kinesiologia se tiñen DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Bacterias II Ambas placas con tinción Ziehl Neelsen Bacilos ácido resistentes se tiñen rojo brillante IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Calcio Von Kossa-Azul Toluidina Von Kossa: depósitos de calcio Se tiñen café oscuro-negro IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Colágeno I: proteína extracelular, predominante en dermis, función estructural bb a a y b Picrosirius: Colágeno I color amarillo-rojizo e e Van Gieson: colágeno I rojo d c c y d Tricromico IPCHILE - Kinesiologia Veronica Pantoja S. 2014 Masson: DOCENTE: colágeno I verde

Colágeno III: o fibras de Reticulina, en dermis perineural, perivascular Impregnación con Nitrato de Plata: fibras de reticulina se tiñen negras IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Eosinófilos Tinción Giemsa, eosinófilos se ven rojos IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Fibras elásticas HE Orceína ácida de Pinkus/Giemsa: IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja 2014 coloración pardo oscura fibras. S. de

Fibrina ambas, Tinción de Picro-Mallory: Fibrina se tiñe rojo claro También PAS IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

b Hongos b b PAS para Criptococo (rojo) a a Mucicarmin para teñir Criptococo: hongos de coloración azul-violácea c Tinción de PAS evidenciando c Blastomicosis IPCHILE - c Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Lípidos sólo en tj fijado en formalina + cortes por congelación bb Sudan III: adipocitos rojos a a Sudan IV: adipocitos anaranjados c IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014 c Sudan black b: Lípidos azul-negruzcos

Mastocitos ambas, Tinción con Azul de Toluidina: gránulos de Mastocitos azul-púrpura (metacromasia) IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Mastocitos ambas, Tinción de Giemsa, donde los gránulos de los Mastocitos son teñidos púrpura IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Melanina ambas, Tinción de Fontana Masson pigmento melánico se tiñe negro IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Principales colorantes IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Tricrómico de Masson • Principal Uso: Colágeno. • Tiñe: – Colágeno Verde. – Núcleo, músculo y nervios Rojo oscuro. – Citoplasma amarillo IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Van Gieson • Principal Uso: Tejido Fibroso • Tiñe: – Colágeno rojo. – Núcleo azul negro – Músculos, nervios amarillos – (+Verhoeff) fibras elásticas negro IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

PAS • Principales Usos: Glucógeno, MPS neutros y Hongos, Membrana basal. • Tiñe: – Glucógeno Diastasa lábil. – MPS neutros y Paredes micóticas Diastasa resistentes. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

• Reacción positiva para glucógeno y polisacáridos neutros. • Reacción positiva sólo para polisacáridos neutros. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014 + DIASTASA

Azul de toluidina • Principal Uso: Mucopolisacáridos ácidos • Tiñe – Mucopolisacáridos ácidos Purpura metacrómico. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Giemsa • Principales usos: Gránulos mastocitarios, MPS ácidos, eosinófilos, leishmanias, médula ósea • Tiñe: – Gránulos mastocitarios, Mucopolisacaridos ácidos Púrpura. – Eosinófilos, leishmanias Rojo. Eosinófilos en mucosa gástrica IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Orceína ácida de Pinkus/Giemsa • Principal Uso: Fibras elásticas. • Tiñe: – Fibras elásticas Pardo oscuro. IPCHILE - Kinesiologia DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

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