Contrastantes em materiais Nanobiotecnolgicos Disciplina Microscopia Eletrnica de

Contrastantes em materiais Nanobiotecnológicos Disciplina: Microscopia Eletrônica de Transmissão Profa. Dra. Sônia Nair Báo Alunos: Mara Núbia Guimarães dos Santos Michel Albarrán

NANOPARTÍCULAS PREPARO DAS AMOSTRAS Solução: Pó + Líquido inerte (água); Obs. : verificar protocolo para cada amostra. Homogeneização: Microondas ou Sonicação Diluição Adição da Solução: (1 gota) na grade (com filme de Formvar) Secagem (por 24 horas) Adição de Contrastante Negativo Análise MET

PREPARO DO FILME DE FORMVAR Recipiente com água destilada Cortar película formada (gilete) Película na superfície: colocar telinha em cima Limpar lâmina (água destilada e acetona) Colocar lâmina no recipiente com água Retirar a película da água (papel filtro) Colocar Formvar Mergulhar lâmina no Formvar (10 s) Secagem em Becker

Preparo do filme de Formvar

PREPARO DE AMOSTRAS DE NANOPARTÍCULAS Figura 3: Formvar na Grade (Tela). Figura 4: Grade (Tela).

TIPOS DE NANOPARTÍCULAS Lipossoma Nanopartículas Metálicas Nanopartículas Lipídicas Sólidas Fulerenos Nanopartículas Poliméricas Nanotubo de Carbono

CONTRASTANTES AMOSTRAS NÃO METÁLICAS Ø Adiciona-se um agente contrastante. Maximizar a área de observação do material. - Exemplos: - Acetato de Uranila - UA; - Ácido Fosfotúngstico – PTA; - Tetróxido de Ósmio (Contrastante +).

CONTRASTANTES Contrastação Negativa Ø Ácido Fosfotúngstico – PTA: ü Serve para todo tipo de amostra; ü Concentração 2%; ü Imagem “suave”. Ø Acetato de Uranila – UA: ü Concentração de 3% em H 20. ü Melhor visualização da estrutura celular; ü Desvantagem.

CONTRASTANTES Contrastação Positiva x Contrastação Negativa Ø Tetróxido de ósmio: ü Facilita a interação da molécula do tetróxido de ósmio com os lipídios insaturados, contrastando fortemente as inclusões lipídicas. ü Procedimento – feito com vapor de ósmio, 10 minutos – contrastação negativa. ü Imagem “Dura“.

PTA – “Suave”

Materiais Nanoparticulados Amostras Metálicas Ø Não necessitam de agente de contrastação, devido a alta eletrodensidade e assim a formação da imagem é nítida.

Metálicas

OBRIGADO!!!