ENZIMAS Lcda Ayarit Suarez son molculas de naturaleza

ENZIMAS Lcda. Ayarit Suarez

son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas, siempre que sean termodinámicamente posibles: Una enzima hace que una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sustratos y su velocidad crece sólo con algunas reacciones, el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula determina el tipo de metabolismo que tendrá cada célula. A su vez, esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica.

Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación (ΔG‡) de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada. La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Asimismo, gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el p. H, la concentración de la propia enzima y del sustrato, y otros factores físico-químicos.

ESTRUCTURA Y MECANISMO Las actividades de las enzimas vienen determinadas por su estructura tridimensional, la cual viene a su vez determinada por la secuencia de aminoácidos. Sin embargo, aunque la estructura determina la función, predecir una nueva actividad enzimática basándose únicamente en la estructura de una proteína es muy difícil, y un problema aún no resuelto. Casi todas las enzimas son mucho más grandes que los sustratos sobre los que actúan, y solo una pequeña parte de la enzima (alrededor de 3 a 4 aminoácidos) está directamente involucrada en la catálisis. La región que contiene estos residuos encargados de catalizar la reacción es denominada centro activo. Las enzimas también pueden contener sitios con la capacidad de unir cofactores, necesarios a veces en el proceso de catálisis, o de unir pequeñas moléculas, como los sustratos o productos (directos o indirectos) de la reacción catalizada. Estas uniones de la enzima con sus propios sustratos o productos pueden incrementar o disminuir la actividad enzimática, dando lugar así a una regulación por retroalimentación positiva o negativa, según el caso.

Al igual que las demás proteínas, las enzimas se componen de una cadena lineal de aminoácidos que se pliegan durante el proceso de traducción para dar lugar a una estructura terciaria tridimensional de la enzima, susceptible de presentar actividad. Cada secuencia de aminoácidos es única y por tanto da lugar a una estructura única, con propiedades únicas. En ocasiones, proteínas individuales pueden unirse a otras proteínas para formar complejos, en lo que se denomina estructura cuaternaria de las proteínas. La mayoría de las enzimas, al igual que el resto de las proteínas, pueden ser desnaturalizadas si se ven sometidas a agentes desnaturalizantes como el calor, los p. H extremos o ciertos compuestos como el SDS. Estos agentes destruyen la estructura terciaria de las proteínas de forma reversible o irreversible, dependiendo de la enzima y de la condición. Especificidad Las enzimas suelen ser muy específicas tanto del tipo de reacción que catalizan como del sustrato involucrado en la reacción. La forma, la carga y las característicashidrofílicas/hidrofóbicas de las enzimas y los sustratos son los responsables de dicha especificidad. Las enzimas también pueden mostrar un elevado grado de estereoespecificidad, regioselectividad y quimioselectividad.

Modelo de la "llave-cerradura" Las enzimas son muy específicas, como sugirió Emil Fisher en 1894. Con base a sus resultados dedujo que ambas moléculas, enzima y sustrato, poseen complementariedad geométrica, es decir, sus estructuras encajan exactamente una en la otra, por lo que ha sido denominado como modelo de la "llave-cerradura", refiriéndose a la enzima como a una especie de cerradura y al sustrato como a una llave que encaja de forma perfecta en dicha cerradura. Sin embargo, si bien este modelo explica la especificidad de las enzimas, falla al intentar explicar la estabilización del estado de transición que logran adquirir las enzimas.

COFACTORES Y COENZIMAS Los cofactores pueden ser compuestos inorgánicos, como los iones metálicos y los complejos ferrosulfurosos, o compuestos orgánicos, como la flavina o el grupo hemo. Los cofactores orgánicos pueden ser a su vez grupos prostéticos, que se unen fuertemente a la enzima, o coenzimas, que son liberados del sitio activo de la enzima durante la reacción. Las coenzimas incluyen compuestos como el NADH, el NADPH y el adenosín trifosfato. Estas moléculas transfieren grupos funcionales entre enzimas. Las enzimas que requieren un cofactor pero no lo tienen unido son denominadas apoenzimas o apoproteínas. Una apoenzima junto con cofactor(es) es denominada holoenzima (que es la forma activa). La mayoría de los cofactores no se unen covalentemente a sus enzimas, pero sí lo hacen fuertemente. Sin embargo, los grupos prostéticos pueden estar covalentemente unidos, como en el caso de la tiamina pirofosfato en la enzima piruvato deshidrogenasa. El término "holoenzima" también puede ser aplicado a aquellas enzimas que contienen múltiples subunidades, como en el caso de la ADN polimerasa, donde la holoenzima es el complejo con todas las subunidades necesarias para llevar a cabo la actividad enzimática.

Las coenzimas son pequeñas moléculas orgánicas que transportan grupos químicos de una enzima a otra. Algunos de estos compuestos, como lariboflavina, la tiamina y el ácido fólico son vitaminas (las cuales no pueden ser sintetizados en cantidad suficiente por el cuerpo humano y deben ser incorporados en la dieta). Los grupos químicos intercambiados incluyen el ion hidruro (H-) transportado por NAD o NADP+, el grupo fosfato transportado por el ATP, el grupo acetilo transportado por la coenzima A, los grupos formil, metenil o metil transportados por el ácido fólico y el grupo metil transportado por la S-Adenosil metionina. Debido a que las coenzimas sufren una modificación química como consecuencia de la actividad enzimática, es útil considerar a las coenzimas como una clase especial de sustratos, o como segundos sustratos, que son comunes a muchas enzimas diferentes. Por ejemplo, se conocen alrededor de 700 enzimas que utilizan la coenzima NADH.

Haloenzima • Complejo funcional de proteína (enzima) mas compuesto orgánico no proteico temoestable (coenzima). • Enzima * coenzima = haloenzima Apoenzima • Es la parte proteica de la haloenzima, osea la enzima propiamente dicha.

Grupo prostético Inhibición • Parte no proteica de la haloenzima. Se usa este termino a las coenzimas unidas firmemente a las enzimas. • Puede suceder que ante determinada sustancia una enzima disminuya su actividad o deje de actuar, estas sustancias se les conoce como inhibidores. •

Inhibidor competitivo Inhibidor permanente • Sustancia parecida al sustrato que puede unir al centro activo de la enzima pero no da producto. • Cuando el inhibidor se une permanentemente a la enzima , esta pierde su función definitivamente. • E * I= EI (sin producto)

Inhibidor temporal Inhibidor no competitivo • Cuando la unión con la enzima no es permanente, la enzima recupera su función luego de separarse de la molécula inhibidora. • Es aquel que también afecta la actividad enzimática, es una molécula diferente al sustrato que no “compite” con este y se va a unir con una parte de la enzima que no sea el centro activo , no impide la formación del complejo enzima-suatrato, pero disminuye la liberación del producto.

Transaminasas o aminotransferasas. • Entre estas enzimas las mas frecuentes que se dosifican: transaminasa glutamo- oxalacetica (TGO). Aspartato aminotransferasa (AST), que transfiere el grupo amino al acido glutamico al axalacetico: y también la transaminasa glutamopiruvica (TGP) o Alanina aminotranferasa (ALT) que tranfiere un grupo amino del acido glutamico al acido piruvico. Valores Normales. • TGO (AST) = 12 m. U/ml • TGP (ALT)= 12 m. U/ml es patológico si aumente mayor a 16.

Amilasa sérica Deshidrogenasa láctica • Se considera como secreción externa. Los órganos productores de amilasa son: glándulas parótidas (degrada almidones). Amilasa pancreática: a la segunda porción del duodeno a través conductos sartori. Fuentes menores: hígado, trompas uterinas. Aumento: inflamación: páncreas, parótidas, y ruptura de TU por embarazo ectópico. • VN= 200 m. U/ml. Aumento mayor 500 m. U/ml = pancreatitis aguda. • Es una enzima intracelular verdadera , cataliza la interconversion o conversión reversible del piruvato en lactato. • VN= 130 -500 m. U/ml • Enfermedades neoplasicas, infartos pulmonares (isomerasas)

Creatin quinasa CK • Significa transferir fosforo desde ATP hasta un sustrato. Abundante: musculo esquelético, corazón, y cerebro. También existe riñón, pulmón, estomago pero en pequeñas cantidades. VN= 32 -162 m. U/ml. • La CK aumenta: daño muscular esquelético, distrofias muscular, procesos inflamatorios locales y nerviosos.

Clasificación de las Enzimas • • • Seis grupos principales, correspondientes por sus términos a las raciones que cada enzima ejerce sobre el sustrato. Estos grupos se subdividen en otro, según el tipo de sustrato y los átomos concretos que son sensibles a sus acciones. Estos seis grupos son los siguientes: Oxidoreductasas Transferasas Hidrolasas Isomerasa Liasas

1. Oxido-reductasas: Son las enzimas relacionadas con las oxidaciones y las reducciones biológicas que intervienen de modo fundamental en los procesos de respiración y fermentación. Las oxidoreductasas son importantes a nivel de algunas cadenas metabólicas, como la escisión enzimática de la glucosa, fabricando también el ATP, verdadero almacén de energía. Extrayendo dos átomos de hidrógeno, catalizan las oxidaciones de muchas moléculas orgánicas presentes en el protoplasma; los átomos de hidrógeno tomados del sustrato son cedidos a algún captor. En esta clase se encuentran las siguientes subclases principales: Deshidrogenasas y oxidasas. Son más de un centenar de enzimas en cuyos sistemas actúan como donadores, alcoholes, oxácidos aldehidos, cetonas, aminoácidos, DPNH 2, TPNH 2, y muchos otros compuestos y, como receptores, las propias coenzimas DPN y TPN, citocromos, O 2, etc. 2. Las Transferasas: Estas enzimas catalizan la transferencia de una parte de la molécula (dadora) a otra (aceptora). Su clasificación se basa en la naturaleza química del sustrato atacado y en la del aceptor. También este grupo de enzimas actúan sobre los sustratos mas diversos, transfiriendo grupos metilo, aldehído, glucosilo, amina, sulfató, sulfúrico, etc.

3. Las Hidrolasas: Esta clase de enzimas actúan normalmente sobre las grandes moléculas del protoplasma, como son la de glicógeno, las grasas y las proteínas. La acción catalítica se expresa en la escisión de los enlaces entre átomos de carbono y nitrógeno (C-Ni) o carbono oxigeno (C-O); Simultáneamente se obtiene la hidrólisis (reacción de un compuesto con el agua)de una molécula de agua. El hidrógeno y el oxidrilo resultantes de la hidrólisis se unen respectivamente a las dos moléculas obtenidas por la ruptura de los mencionados enlaces. La clasificación de estas enzimas se realiza en función del tipo de enlace químico sobre el que actúan. A este grupo pertenecen proteínas muy conocidas: la pepsina, presente en el jugo gástrico, y la tripsina y la quimiotripsina, segregada por el páncreas. Desempeñan un papel esencial en los procesos digestivos, puesto que hidrolizan enlaces pépticos, estéricos y glucosídicos. 4. Las isomerasas: Transforman ciertas sustancias en otras isómeras, es decir, de idéntica formula empírica pero con distinto desarrollo. Son las enzimas que catalizan diversos tipos de isomerización, sea óptica, geométrica, funcional, de posición, etc. Se dividen en varias subclases.

5. Las Liasas: Estas enzimas escinden (raramente construyen) enlaces entre átomos de carbono, o bien entre carbono y oxigeno, carbono y nitrógeno, y carbono y azufre. Los grupos separados de las moléculas que de sustrato son casi el agua, el anhídrido carbónico, y el amoniaco. Algunas liasa actúan sobre compuestos orgánicos fosforados muy tóxicos, escindiéndolos; otros separan el carbono de numerosos sustratos. 6. Las Ligasas: Es un grupo de enzimas que permite la unión de dos moléculas, lo cual sucede simultáneamente a la degradación del ATP, que, en rigor, libera la energía necesaria para llevar a cabo la unión de las primeras. Se trata de un grupo de enzimas muy importantes y recién conocidas, pues antes se pensaba que este efecto se llevaba a cabo por la acción conjunta de dos enzimas, una fosfocinasa, para fosforilar a una sustancia A (A + ATP A - ℗ + ADP) y una transferasa que pasaría y uniría esa sustancia A, con otra, B (A -℗ + B A – B + Pi ). A este grupo pertenecen enzimas de gran relevancia reciente, como las aminoácido –ARNt ligasas conocidas habitualmente con el nombre de sintetasas de aminoácidos –ARNt o enzimas activadoras de aminoácidos que representan el primer paso en el proceso biosintético de las proteínas, y que forman uniones C-O; las ácido-tiol ligasas, un ejemplo típico de las cuales es la acetil coenzima. A sintetasa, que forma acetil coenzima.

Grupo 1. Oxidoreductasas 2. Transferasas 3. Hidrolasas 4. Isomerasas Accion ejemplos Catalizan reacciones de oxidorreducción. Tras la acción Dehidrogenasas catálica quedan modificados en su grado de oxidación Aminooxidasa por lo que debe ser transformados antes de volver a Deaminasas actuar de nuevo. Catalasas Transfieren grupos activos (obtenidos de la ruptura de Transaldolasas ciertas moléculas)a otras sustancias receptoras. Suelen Transcetolasas actuar en procesos de interconversiones de azucares, Transaminasas de aminoácidos, etc Verifican reacciones de hidrólisis con la consiguiente Glucosidasas obtención de monómeros a partir de polímeros. Suele Lipasas ser de tipo digestivo, por lo que normalmente actúan Peptidasas en primer lugar Esterasas Fosfatasas Actúan sobre determinadas moléculas obteniendo de Isomerasas de azúcar ellas sus isómeros de función o de posición. Suelen Epimerasas actuar en procesos de interconversion Mutasas 5. Liasas Realizan la degradación o síntesis (entonces se llaman Aldolasas sintetasas) de los enlaces denominados fuertes sin ir Decarboxilasas acoplados a sustancias de alto valorenergético. 6. Ligasas Realizan la degradación o síntesis de los enlaces Carboxilasas fuertes mediante el acoplamiento a sustancias ricas en Peptidosintetasas energía como los nucleosidos del ATP