III SIMPSIO INTERNACIONAL DE VIGIL NCIA DAS DOENAS

III SIMPÓSIO INTERNACIONAL DE VIGIL NCIA DAS DOENÇAS DE TRANSMISSÃO HÍDRICA E ALIMENTAR 21 de Novembro de 2005 Centro de Convenções Rebouças, São Paulo, SP, Brasil. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DA FEBRE TIFÓIDE SUELI APARECIDA FERNANDES INSTITUTO ADOLFO LUTZ

Nomenclatura Família: Enterobacteriaceae Gênero: Salmonella S. enterica subsp. enterica sorotipo Typhi ( Salmonella Typhi)

Diagnóstico Laboratorial -Isolamento bacteriano (materiais clínicos) -Identificação -Sorodiagnóstico

Febre tifóide (bacteremia) Métodos: -Hemocultura (principal) -Mielocultura -Urocultura -Cultura de petéquias -Coprocultura (2 a – 4 a semana)

Métodos de cultura para S. Typhi (Gilman RH, et al, 1975) Percentual M. óssea Hemocultura Petéquis Fezes Semanas

Febre tifóide (bacteremia) Sorodiagnóstico: Teste de Widal (Uso limitado mesmo com amostras pareadas) Novos testes de diagnóstico rápido: Dip-S-Ticks (Ig. G) Typhi. Dot (Ig. G, Ig. M) TUBEX (Ig. M)

Diagnóstico Sorológico: Typhidot

Diagnóstico sorológico: TUBEX

Detecção: Estado Portador Método-Coprocultura -Doente tratado e curado: manipulador de alimentos (7 amostras sequenciais) não manipulador de alimentos (3 amostras) -Portador crônico Suspeito de contaminação de alimento (7 amostras)

Coleta e transporte Sangue: coletado em meio de cultura padronizado (rotina manual ou automatizada) Fezes: -“in natura” transporte: T. A 2 hs, refrigerada até 5 hs - swab fecal meio de transporte Cary-Blair T. A- (tempo transporte: maior)

Isolamento Meios de cultura padronizados: -Meios liquidos de enriquecimento (selenito) -Meios sólidos diferenciais (Mac Conkey) -Meios sólidos seletivos (SS) Verde Brilhante (BG): inibe S. Typhi

Identificação Presuntiva Colônias isoladas em meios presuntivos: -IAL -TSI -EPM-Milli e outros Diagnóstico Presuntivo: -testes bioquímicos compatíveis com o gênero Salmonella -aglutinação antisoro polivaente O e H

Encaminhamento das cepas: Laboratório de Referência–Instituto Adolfo Lutz, S. P. -Confirmação Bioquímica -Sorotipagem -Caracterização das cepas identificadas

Identificação Bioquímica Características bioquímicas diferenciais de S. Typhi: -Pouca produção de H 2 S ou ausência -Não produção de gás -Citrato de Simmons (-) -Descarboxilação da ornitina (-) Descarboxilacão da lisina (+) Fermentação da lactose (-) Fermentação da xilose (v) Fermentação da arabinose (-) Redução do tetrationato (v)

Identificação do Sorotipo Detecção dos antígenos Somático (O), Flagelar (H) e antígeno capsular (Vi) Utilização de antisoros específicos para Salmonella: Salmonella Typhi 9, 12, [Vi]: d: -

Caracterização de cepas de S. Typhi Métodos: -Fagotipagem -Testes de susceptibilidade aos antimicrobianos -PFGE (Pulsed Field Gel Electrophoresis)

Cepas de S. Typhi identificadas no IAL-Setor de Enterobactérias 1895 -Adolfo Lutz enviou culturas a Eberth (próprio descobridor da febre fifóide) Resultado: Confirmação de S. Typhi Cepas isoladas de hemocultura/ 1950 -66 1970 -76 1977 -82 1983 -90 1991 -95 1996 -05 1565 cepas (98, 6%) 500 cepas (72, 3%) 325 cepas (20, 7%) 292 cepas (27, 3%) 42 cepas (18, 8%) 99 cepas (20, 7%) Coprocultura 110 120 96 15 46

Percentual de cepas de S. Typhi isoladas de hemoculturas no período de 1950 a 2005

Resistência antimicrobiana de 71 cepas de S. Typhi Antimicrobianos Ampicilina Amoxicilina/Ac. Clavulânico Ácido Nalidíxico Aztreonam Ceftazidima Cefalotina Ciprofloxacina Cloranfenicol Ceftriaxiona Doxiciclina Estreptomicina Gentamicina Imipenem Kanamicina Netilmicina Sulfonamidas Sulfametoxazol/Trimetroprim Tetraciclina N° (%) 3 2 1 2 24 1 1 (4, 2) (2, 8) (1, 4) (2, 8) (33, 8) (1, 4) 68 (95, 7%) cepas de S. Typhi: susceptíveis aos antimicrobianos testados. Uma cepa multirresistente: TT, CO, ATM, DO e AN.

PFGE de cepas de S. Typhi Kb 1135 668. 9 310. 1 33. 3 1, 8 -marcador de massa molecular; 2, 3 -casos esporádicos 4, 5 -surto Carapicuiba; 6, 7 –surto Santos