MTAMFA Nyri Iskola 2011 jnius 27 jlius 1
- Slides: 12
MTA-MFA Nyári Iskola 2011. június 27 - július 1. Budapest Mérések ellipszométerrel - Fehérjerétegek vizsgálata Készítette: Kozák Olívia Krisztina Tanár: Dvorák Cecília Témavezetők: Németh Andrea és Fodor Bálint
Áttekintés n Bioszenzorikai fejlesztés (pl. vércukorszintmérő) n Mérési előkészületek a biolaborban n Ellipszométer működésének megértése és használatának elsajátítása n Mérés során fehérjerétegek leválasztása n Fehérjeréteg optikai minősítése és jellemzése az ellipszometriai kiértékelés alapján
Mi az a bioszenzor? n n n bioszenzor = felismerő elem + jelátvivő egység Felismerő elemek felületi adszorpciója Célmolekulák szelektív, nagy érzékenységű megkötése J. P. Chambers et al. Curr. Issues Mol. Biol. 10: 1– 12 (2008).
Fehérjék FIBRINOGÉN n Plazmafehérje n Véralvadásban van szerepe n FLAGELLÁRIS FILAMENTUM n Bakteriális flagellum sejten kívüli része (~ 5 -10 µm) Több tízezer flagellin Májban és a csontvelőben monomer n Specifikus ligandum (As, Ni) képződik megkötésére alkalmazható n
Spektroszkópiai Ellipszometria (SE) n Optikai felületvizsgálati módszer n Reflexió során bekövetkező polarizációváltozás mérése n SE spektrum: Psi(λ) és Delta(λ) Indirekt eljárás => optikai modellek megalkotása
n n Érintés- és roncsolásmentes Időbeli változások nyomon követése a hordozó felületén Nanométeres érzékenység, nagy pontosság Mindezt 1 másodperc alatt! Mérés +2 nm
Folyadékcella Térfogat Beesési szög Ablakok átmérője Mintaméret (O-gyűrű) Áramlási sebesség 200 μl 75° 4 mm 27 x 7 mm 2 0, 5 ml/perc alatt
Lépésről lépésre… n Minták előkészítése: ¨ Szubsztrát tisztítása (H 2 O 2: H 2 SO 4=1: 3) ¨ PBS (pufferoldat) készítése Fehérjeoldat (c ~ 0, 2 mg/ml) ¨ n Mérés: ¨ Spektrum felvétele 1. 2. 3. ¨ Folyamat közben (in situ) mérés 1. 2. 3. ¨ Hordozó: Si + Si. O 2 + Folyadékcella (ablak korrekció) + Puffer Alapvonal (puffer) Fehérje adszorpció Pufferes mosás Felülettérképezés Puffer közeg Fehérjeréteg Si. O 2 Szubsztrát (Si)
Mérési eredmények Optikai modell + de Feijter formula:
Térképezés Mérési pontok: Fibrinogén leszárított mintán: [nm] Gumigyűrű helye Si hordozó + termikus oxid: Flagelláris filamentum leszárított mintán: [Delta] [nm]
Összefoglalás Alapkutatás Orvosi alkalmazások Kutatás menetének megismerése Középiskolai ismeretek (optika, hullámtan, fehérjék…) egészen új, és gyakorlati oldalú megközelítése, bővítése Új mérési eljárás elsajátítása Gyakorlatok egy laborban Megismerkedés új emberekkel
Köszönöm a figyelmet! Köszönetnyílvánítás: n Hálás vagyok a lehetőségért és köszönöm szépen mindazoknak, akik segítettek, támogattak! n Szüleimnek n Fizikatanáromnak, Dvorák Ceciliának n A szervezőnek, pártfogónknak, Daróczi Csabának n Témavezetőmnek, Németh Andreának és Fodor Bálintnak n A Fotonika Osztály munkatársainak; Fried Miklós, Patkós Dániel, Kurunczi Sándor, Horváth Róbert, Petrik Péter, Lohner Tivadar