MTAMFA Nyri Iskola 2011 jnius 27 jlius 1

  • Slides: 12
Download presentation
MTA-MFA Nyári Iskola 2011. június 27 - július 1. Budapest Mérések ellipszométerrel - Fehérjerétegek

MTA-MFA Nyári Iskola 2011. június 27 - július 1. Budapest Mérések ellipszométerrel - Fehérjerétegek vizsgálata Készítette: Kozák Olívia Krisztina Tanár: Dvorák Cecília Témavezetők: Németh Andrea és Fodor Bálint

Áttekintés n Bioszenzorikai fejlesztés (pl. vércukorszintmérő) n Mérési előkészületek a biolaborban n Ellipszométer működésének

Áttekintés n Bioszenzorikai fejlesztés (pl. vércukorszintmérő) n Mérési előkészületek a biolaborban n Ellipszométer működésének megértése és használatának elsajátítása n Mérés során fehérjerétegek leválasztása n Fehérjeréteg optikai minősítése és jellemzése az ellipszometriai kiértékelés alapján

Mi az a bioszenzor? n n n bioszenzor = felismerő elem + jelátvivő egység

Mi az a bioszenzor? n n n bioszenzor = felismerő elem + jelátvivő egység Felismerő elemek felületi adszorpciója Célmolekulák szelektív, nagy érzékenységű megkötése J. P. Chambers et al. Curr. Issues Mol. Biol. 10: 1– 12 (2008).

Fehérjék FIBRINOGÉN n Plazmafehérje n Véralvadásban van szerepe n FLAGELLÁRIS FILAMENTUM n Bakteriális flagellum

Fehérjék FIBRINOGÉN n Plazmafehérje n Véralvadásban van szerepe n FLAGELLÁRIS FILAMENTUM n Bakteriális flagellum sejten kívüli része (~ 5 -10 µm) Több tízezer flagellin Májban és a csontvelőben monomer n Specifikus ligandum (As, Ni) képződik megkötésére alkalmazható n

Spektroszkópiai Ellipszometria (SE) n Optikai felületvizsgálati módszer n Reflexió során bekövetkező polarizációváltozás mérése n

Spektroszkópiai Ellipszometria (SE) n Optikai felületvizsgálati módszer n Reflexió során bekövetkező polarizációváltozás mérése n SE spektrum: Psi(λ) és Delta(λ) Indirekt eljárás => optikai modellek megalkotása

n n Érintés- és roncsolásmentes Időbeli változások nyomon követése a hordozó felületén Nanométeres érzékenység,

n n Érintés- és roncsolásmentes Időbeli változások nyomon követése a hordozó felületén Nanométeres érzékenység, nagy pontosság Mindezt 1 másodperc alatt! Mérés +2 nm

Folyadékcella Térfogat Beesési szög Ablakok átmérője Mintaméret (O-gyűrű) Áramlási sebesség 200 μl 75° 4

Folyadékcella Térfogat Beesési szög Ablakok átmérője Mintaméret (O-gyűrű) Áramlási sebesség 200 μl 75° 4 mm 27 x 7 mm 2 0, 5 ml/perc alatt

Lépésről lépésre… n Minták előkészítése: ¨ Szubsztrát tisztítása (H 2 O 2: H 2

Lépésről lépésre… n Minták előkészítése: ¨ Szubsztrát tisztítása (H 2 O 2: H 2 SO 4=1: 3) ¨ PBS (pufferoldat) készítése Fehérjeoldat (c ~ 0, 2 mg/ml) ¨ n Mérés: ¨ Spektrum felvétele 1. 2. 3. ¨ Folyamat közben (in situ) mérés 1. 2. 3. ¨ Hordozó: Si + Si. O 2 + Folyadékcella (ablak korrekció) + Puffer Alapvonal (puffer) Fehérje adszorpció Pufferes mosás Felülettérképezés Puffer közeg Fehérjeréteg Si. O 2 Szubsztrát (Si)

Mérési eredmények Optikai modell + de Feijter formula:

Mérési eredmények Optikai modell + de Feijter formula:

Térképezés Mérési pontok: Fibrinogén leszárított mintán: [nm] Gumigyűrű helye Si hordozó + termikus oxid:

Térképezés Mérési pontok: Fibrinogén leszárított mintán: [nm] Gumigyűrű helye Si hordozó + termikus oxid: Flagelláris filamentum leszárított mintán: [Delta] [nm]

Összefoglalás Alapkutatás Orvosi alkalmazások Kutatás menetének megismerése Középiskolai ismeretek (optika, hullámtan, fehérjék…) egészen új,

Összefoglalás Alapkutatás Orvosi alkalmazások Kutatás menetének megismerése Középiskolai ismeretek (optika, hullámtan, fehérjék…) egészen új, és gyakorlati oldalú megközelítése, bővítése Új mérési eljárás elsajátítása Gyakorlatok egy laborban Megismerkedés új emberekkel

Köszönöm a figyelmet! Köszönetnyílvánítás: n Hálás vagyok a lehetőségért és köszönöm szépen mindazoknak, akik

Köszönöm a figyelmet! Köszönetnyílvánítás: n Hálás vagyok a lehetőségért és köszönöm szépen mindazoknak, akik segítettek, támogattak! n Szüleimnek n Fizikatanáromnak, Dvorák Ceciliának n A szervezőnek, pártfogónknak, Daróczi Csabának n Témavezetőmnek, Németh Andreának és Fodor Bálintnak n A Fotonika Osztály munkatársainak; Fried Miklós, Patkós Dániel, Kurunczi Sándor, Horváth Róbert, Petrik Péter, Lohner Tivadar