Zlepovn podmnek pro vuku technickch vehlovy stedn obor
Zlepšování podmínek pro výuku technických Švehlovy střední oborů školy a řemesel polytechnické Prostějov registrační číslo : CZ. 1. 07/1. 1. 26/02. 0010
Živné půdy Ing. Renata Grulichová
Definice živné půdy Živná půda (růstové médium nebo kultivační médium) = je substrát poskytující výživu a další vhodné podmínky organismům a jejich částem pěstovaným in vitro. Nejrozšířenějšího využití má v bakteriologii, mykologii a rostlinných biotechnologií.
Příprava živných půd Kultivace mikroorganismů se obvykle provádí ve sterilních živných médiích (půdách), které musí vyhovovat : �všem nárokům příslušného mikroorganismu na výživu �p. H �osmotický tlak.
Složení živných půd Základní složkou všech živných médií je voda. Dále obsahují živiny ve vhodných koncentracích, které slouží jako zdroj: �energie �uhlíku, �dusíku �fosforu �biogenních prvků (P, S, Mg, Cl, Ca, Fe, K, Na) �stopových prvků (Co, Zn, Mo, Cu). V některých případech mohou živné půdy obsahovat i růstové faktory (vitaminy, aminokyseliny) nebo jiné specifické sloučeniny podle nároků kultivovaných mikroorganismů nebo dle účelu kultivace.
Rozdělení živných půd podle konzistence Tekuté půdy = pomnožovací �Používají se jako pomnožovaní půdy. �Jsou nalévány obvykle do zkumavek. �Nehodí se k jejich rozlišení bakterií.
Rozdělení živných půd podle konzistence Pevné půdy = agarové �Tekuté půdy zahuštěné agarem (1, 5 -2%) nebo želatinou, případně koagulací bílkovin teplem (krevního séra, vaječné hmoty apod. ). �Plní se většinou do Petriho misek (agarová plotna) nebo do zkumavek v šikmé pozici (tzv. šikmý agar). �Jsou vhodné k izolaci čistých kultur (izolační půdy). Polotuhé = semisolidní �s přídavkem 0, 1 až 0, 5 % agaru
Rozdělení živných půd podle účelu jejich použití �univerzální živné půdy �selektivní živné půdy �diagnostické živné půdy
Univerzální živné půdy �Na těchto médiích roste velký počet fyziologicky různorodých mikroorganismů. �např. kasein-sojový nebo masopeptonový agar pro chemoorganotrofní bakterie, sladina pro kvasinky a vláknité plísně.
Univerzální živné půdy – čokoládový agar, masopeptonový krevní agar http: //fvl. vfu. cz/sekce_ustavy/mikrobiologie_pro_farmaceuty/praktikum 03 /
Selektivní živné půdy �Tyto půdy podporují svým složením růst pouze určité skupiny mikroorganismů a ostatní potlačují. �Selektivity se dosahuje přidáváním některých chemikálií (antibiotik, barviv) nebo úpravou p. H. �Používají se často v potravinářské mikrobiologii.
Selektivní živné půdy http: //fvl. vfu. cz/sekce_ustavy/mikrobiologie/praktikum 06/index. html
Diagnostické živné půdy � obsahují určitý substrát, který je schopna využívat pouze určitá skupina mikroorganismů, a indikátor, signalizující využívání tohoto substrátu. � Mikroorganismy na těchto půdách rostou v charakteristických koloniích. � Příkladem jsou živné agary pro koliformní bakterie Mc. Conkey agar, Tergitolový agar, VRB agar, Endův agar a další, které jsou určeny pro předběžnou detekci těchto mikroorganismů. � Všechny obsahují určitý inhibitor růstu grampozitivních bakterií (koliformní bakterie jsou gramnegativní) a laktosu, která je koliformními bakteriemi rozkládána a jejíž rozklad je určitým způsobem detekován (obvykle barvou narostených kolonií).
Diagnostické živné půdy – Endův agar http: //fvl. vfu. cz/sekce_ustavy/mikrobiologie_pro_farmaceuty/praktikum 03/06. jpg
Některé běžně užívané půdy �Peptonová voda- nažloutlá barva, diagnostika cholery �Živný bujon- žlutohnědá barva, příprava z masového extraktu a peptonu s malým přídavkem soli. Užívá se pro přípravu dalších půd. �Živný agar- z bujonu s přídavkem 2% agaru, slouží ke kultivaci nenáročných mikrobů a k přípravě selektivních a diagnostických půd. �Krevní agar- rudé barvy, je nejpoužívanější. K živnému agaru přidáváme 7% beraních ERY. Slouží k diagnostice patogenních bakterií které rozlišujeme dle jejich hemolytických vlastností. �Čokoládový agar- hnědý, jedná se vlastně o KA který je zahřátý na 80°C, čímž se rozpadnou ERY a uvolní se růstové faktory, které jsou nutné pro růst náročnějších bakterií jako jsou Naisserie. �Levinthalův agar- bohatá půda podobná živnému agaru, připravena filtrací čokoládového agaru. Slouží k diagnostice hemofilů.
Některé běžně užívané půdy �Lővenstein- Jensenova půda- žlutě zelený šikmý agar, slouží k diagnostice TBC( kolonie jsou podobné květáku) Je to vaječná půda, růst je pomalý 3 - 9 týdnů. �Šulova půda- tekutá, nažloutlá, slouží k diagnostice myko. TBC, roste zde jako zrníčka sedimentu. �Selenitová půda- tekutá růžovo oranžová, slabě kalná, selektivní pro salmonely. �ENDOva půda- nejčastější půda, je růžová, obsahuje laktózu a cudin. Je to selektivně diagnostická půda- G+ nerostou, G- jako červené pokud zkvašují laktózu, pokud světle tak ji nezkvašují. �Mac. Conkeyho agar- podobá se ENDOvě půdě. �XLD( xylóza-lyzin-deoxycholát sodný)- slouží k diagnostice salmonel. �MAL(maltóza-arabinosa-lakton)- slouží k diagnostice salmonel.
Zdroje �http: //old. botany. upol. cz/prezentace/sedlarova/Cvice ni 9_11. pdf �Veselá, M. , Drdák, M. : Praktikum z obecné mikrobiologie, 1999, VUT Brno
Děkuji za pozornost !
- Slides: 18