Zanimanje Prehrambeni tehniar Nastavni predmet Prehrambena mikrobiologija vjebe

Zanimanje: Prehrambeni tehničar Nastavni predmet: Prehrambena mikrobiologija (vježbe) Razred: Treći Vježba br. 21: Mikroorganizmi na predmetima koji nas okružuju Predmetni nastavnik: Tihana Jaković, dipl. ing. Prehrambeno-tehnološka škola, Zagreb Ishod učenja: • usvojiti temeljna znanja o mikroorganizmima i njihov utjecaj na hranu, zdravlje i okoliš Primjer vrednovanja • navesti utjecaj mikroorganizama na hranu, zdravlje i okoliš.

CILJ VJEŽBE: Dokazati prisutnost m. o. na mobitelu i odrediti njihov približan broj Prvo napiši u dnevnik rada naslov vježbe te MATERIJAL I PRIBOR: Sterilna Petrijeva zdjelica, sterilne Erlenmeyerove tikvice (2), kuhinjska sol Na. Cl, hranjivi agar u prahu, destilirana voda, stakleni štapići, sterilizator, aluminijska folija, vateni čepovi, plamenik, digitalna vaga, sterilni aplikator za uzimanje brisa, predmet koji svakodnevno koristiš, npr. mobitel. Nacrtaj tipične bakterije koje se mogu naći u okolišu:

Coxiella burnetii Shigella sonnei Campylobacter jejuni

PROČITAJ: Coxiella burnetii je vrsta unutarstaničnih, patogenih bakterija (patogene bakterije su one koje uzrokuju zarazne bolesti), te je uzročnik Q groznice. Bakterija može preživjeti standardne dezinficijense i otporna je na mnoge druge promjene u okolišu.

PROČITAJ: Shigella sonnei spada u skupinu bakterija koje nazivamo enterobakterijaceje (Enterobacteriaceae). Ova skupina bakterija može uzrokovati infekcije želučanocrijevnog sustava ili drugih tjelesnih organa. Bolest koju uzrokuje se zove šigeloza. Shigella sonnei

PROČITAJ: Kampilobakterioza je zarazna bolest uzrokovana bakterijama iz roda Campylobacteri su bakterije u obliku spirale, slova S ili zakrivljene. Postoji 17 vrsta kampilobaktera i 6 podvrsta. Najčešći uzročnici ove bolesti su C. jejuni i C. coli. Lako se uništava visokom temperaturom, a budući je hrana glavni put prijenosa, to znači da će dobra toplinska obrada hrane uništiti bakteriju. Gdje se nalaze kampilobakteri? Campylobacter je bakterija koja normalno naseljava probavni sustav većine toplokrvnih životinja kao što su divlje ptice, perad, goveda, svinje, ovce, psi i mačke, ali se nalazi i u kamenicama i drugim školjkašima. Campylobacter jejuni

Potom napiši POSTUPAK RADA: Pripremi hranjivu podlogu, hranjivi agar, na već poznati način (tj. kao i u vježbi 16 i 20). Također pripremi i fiziološku otopinu. Oboje steriliziraj u sterilizatoru na 121°C/15 min. U sterilni aplikator za uzimanje brisa sterilnom pipetom sterilno otpipetiraj 10 m. L sterilne fiziološke otopine. Štapić na čijem se vrhu nalazi namotaj vate, vrati natrag u aplikator i umoči u fiziološku otopinu. Namočenim vatenim štapićem uzmi bris predmeta koji često koristiš. Mi ćemo pretpostaviti da smo uzeli bris mobitela tako da smo vatenim štapićem prebrisali cijeli ekran mobitela. Štapić vrati natrag u aplikator i dobro homogeniziraj. Na ovaj način si dobio razrjeđenje 10 -1, tj. uzeti bris smo razrijedili 10 puta (u omjeru 1: 10). Sterilnom pipetom sterilno otpipetiraj 1 m. L uzorka iz aplikatora, prenesi u sterilnu Petrijevu zdjelicu i zalij steriliziranim i na 45°C ohlađenim hranjivim agarom, u blizini upaljenog plamenika. Na poklopac Petrijeve zdjelice napiši stupanj razrjeđenja i grupu. Potom zatvori Petrijevu zdjelicu i stavi na inkubaciju do sljedećih vježbi. VAŽNO: Cijelo vrijeme radimo na sterilan način, tj. u blizini upaljenog plamenika i sa streilnim priborom, kako bi na hranjivi agar nacijepili samo m. o. s mobitela, a NE i one sa suđa, iz zraka, iz vode i sl.

Aplikator za bris

OČITAVANJE REZULTATA NAKON INKUBACIJE Na hranjivom agaru su nakon inkubacije porasle kolonije bakterija, što znači da su na mobitelu prisutne različite vrste bakterija. Mnoge od bakterija koje su narasle na hranjivom agaru su potpuno bezopasne (nepatogene) i normalno žive u zajednici s čovjekom.

Izgled Petrijeve zdjelice (pogled kroz dno zdjelice) nakon inkubacije Vaš zadatak je izbrojati kolonije koje su porasle (dakle ovo je neizravna metoda određivanja broja m. o. , pa u njoj brojimo KOLONIJE, a nakon toga CFU-formulom računamo približan broj ŽIVIH STANICA BAKTERIJA – zašto ŽIVIH? ? ? Jer samo žive stanice bakterija mogu rasti na agaru i stvarati kolonije) Pomoću formule za CFU izračunaj približan broj živih stanica bakterija

Opišite izgled kolonija prema natuknicama na str. 24 u skripti i prebroj kolonije: ZAPAŽANJA: • Oblik: • Rub: • Površina: • Uzdignutost: • Boja: • Veličina: • Struktura: Broj izbrojanih kolonija bakterija = ? ZAKLJUČAK: M. o. na mobitelu smo dokazali tako da smo uzeli bris ekrana mobitela i prenjeli smo m. o. na agar (nacijepili smo m. o. ) i nakon inkubacije su narasle kolonije bakterija, što znači da su na mobitelu prisutni m. o. , točnije bakterije.

Nakon inkubacije, za P. zdjelicu izračunamo približan broj živih bakterijskih stanica pomoću CFU formule: Razrjeđenje = 10 -1 (uzeti bris smo razrijedili 10 puta (u omjeru 1: 10)). Volumen zraka = 1 m. L CFU = ?

https: //www. youtube. com/watch? v=vz 1 Sc. SZ 5 oc. A Pogledajte video na you tube-u i odgovorite na ova kratka pitanja: • Kakvog je oblika bakterija Campylobacter jejuni? • Kako se ova bakterija pokreće? • Koju bolest izaziva? • U kojim namirnicama se može naći?

Za kraj odgovori na pitanja za ponavljanje: PITANJA ZA PONAVLJANJE: 1. Po čemu se međusobno razlikuju kolonije bakterija porasle u Petrijevoj zdjelici? 2. Što iz toga zaključuješ? 3. Jesu li rezultati vježbe u skladu s tvojim očekivanjima (broj kolonija)? Obrazloži svoj odgovor. 4. Kako se zove ova metoda određivanja broja mikroorganizama? Hvala na marljivom radu Sve što napišete u dnevnik rada fotografirajte te pošaljite na „školska zadaća” Sretno

Iz nastavnog pisma: Vježba broj 21 Mikroorganizmi na predmetima koji nas okružuju dnevnik U MATERIJAL I PRIBOR: Sterilna Petrijeva zdjelica, sterilne Erlenmeyerove tikvice (2), kuhinjska sol Na. Cl, hranjivi agar u prahu, destilirana voda, stakleni štapići, sterilizator, aluminijska folija, vateni čepovi, plamenik, digitalna vaga, sterilni aplikator za uzimanje brisa, predmet koji svakodnevno koristiš. POSTUPAK: koji nas okružuju (prozirnica ili folija). Pripremi hranjivu podlogu, hranjivi agar, na već poznati način (tj. kao i u vježbi 16 i 20). Također pripremi i fiziološku otopinu. Oboje steriliziraj u sterilizatoru na 121°C/15 min. U sterilni aplikator za uzimanje brisa sterilnom pipetom sterilno otpipetiraj 10 m. L sterilne fiziološke otopine. Štapić na čijem se vrhu nalazi namotaj vate, vrati natrag u aplikator i umoči u fiziološku otopinu. Namočenim vatenim štapićem uzmi bris predmeta koji često koristiš. Štapić vrati natrag u aplikator i dobro homogeniziraj. Na ovaj način si dobio razrjeđenje 10 -1. Sterilnom pipetom sterilno otpipetiraj 1 m. L uzorka iz aplikatora, prenesi u sterilnu Petrijevu zdjelicu i zalij steriliziranim i na 45°C ohlađenim hranjivim agarom, u blizini upaljenog plamenika. Na poklopac Petrijeve zdjelice napiši stupanj razrjeđenja i grupu. Potom zatvori Petrijevu zdjelicu i stavi na inkubaciju do sljedećih vježbi. Možeš vježbu provesti i ne razrjeđujući uzorak fiziološkom otopinom, već direktno nacjepljujući na površinu hranjivog agara uzorak s vatenog štapića, u cik-cak potezima. U tom slučaju razrjeđenje je 1, tj. nisi razrijedio uzorak koji ispituješ. Opisani postupak je metoda brisa, a dokazivanje m. o. se vrši indirektnom (neizravnom) Kochovom metodom nacjepljivanja uzorka na hranjivu podlogu. U dnevnik rada napiši detaljan postupak svog rada, kao i svoja zapažanja. Fotografiraj bitne trenutke tijekom provedbe postupka. Operi korišteni pribor i posuđe te očisti radni stol.

Očitavanje rezultata nakon inkubacije Uzmi Petrijevu zdjelice nakon proteklog vremena inkubacije, na kojoj je došlo do porasta bakterijskih kolonija. Koristeći marker, izbroji točan broj izraslih kolonija (točkanjem markerom s donje strane Petrijeve zdjelice). Pomoću formule za CFU izračunaj približan broj živih bakterijskih stanica na predmetu kojega svakodnevno koristiš. Promotri kolonije bakterija i opiši ih (boja, veličina, rub, prozirnost. . . izgled kolonija na agaru s točnim opisom pojedinih karakteristika se nalazi u teorijskom dijelu ove skripte pod vježbom Determinacija bakterija). 1. 2. 3. 4. PITANJA ZA PONAVLJANJE: Po čemu se međusobno razlikuju kolonije bakterija porasle u Petrijevoj zdjelici? Što iz toga zaključuješ? Jesu li rezultati vježbe u skladu s tvojim očekivanjima (broj kolonija)? Obrazloži svoj odgovor? Kako se zove ova metoda određivanja broja mikroorganizama?