VERIFICATIE IMPLEMENTATIE VALIDATIE VAN EEN HPLC ANALYZER VOOR

VERIFICATIE (IMPLEMENTATIE VALIDATIE) VAN EEN HPLC ANALYZER VOOR DE BEPALING VAN HBA 1 C Door Sharon Vuylsteke

INHOUD Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

HEMOGLOBINE Ingebouwd in RBC Globine ketens + haemgroep Transport zuurstof 400 verschillende soorten hemoglobine Hb. A Hb. F Hb. A 2 Andere mutaties Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

HEMOGLOBINE A 1 C Geglyceerd hemoglobine, glycohemoglobine Hoe meer glucose in bloed, hoe meer glycohemoglobine Indruk glucose gehalte van afgelopen 6 -8 weken Maillard reactie: Evaluatie behandeling van diabetes patiënten Diagnose Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

DIABETES Glucose opgenomen uit voeding => energie bron Insuline Glucose van bloed naar weefsels Hormoon geproduceerd door eilandjes van Langerhans Vrijstelling afhankelijk van glucosespiegel bloed Diabetes door absoluut of relatief te kort aan insuline 3 types Type 1: IADM Type 2 NIADM Zwangerschapsdiabetes diagnose: nuchtere bloedglucose ≥ 126 mg/dl ad random bloedglucose > 200 mg/dl Hb. A 1 c > 48 mmol/mol ( 6, 5%) Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

WERKINGSPRINCIPE Ionuitwisselingschromatografie SF: geladen functionele groepen gaan bipolaire reactie aan met verschillende componenten van monster Grotere lading = meer tegen gehouden door SF MF: eluenten met verandering van p. H en ionensterkte Buffer A: elueert alles t. e. m Hb. A 1 c ( Hb. A 1 a, Hb. F, Hb. A 1 c-labiel en Hb. A 1 c-stabiel) Buffer B: varianten S en C Buffer C: Hb. A 0 Fotometrische detectie: 420 nm en 500 nm Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

WERKINGSPRINCIPE Sample Light source Gel Column Chromo-pattern Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

VALIDATIE / VERIFICATIE Basisvalidatie door fabrikant Verificatie door labo zelf Belangrijkste analytische aspecten Testen op gekende monsters Correlatie tussen oud en nieuw toestel Within-run meetonzekerheid Between-run meetonzekerheid Juistheid Resultaten besproken en aanvaard door kwaliteitsverantwoordelijke Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

RESULTATEN EN DISCUSSIE Correlatie Within-run variatie Between-run variatie Juistheid Verwerkingssnelheid Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

CORRELATIE Correlatie: 0, 996 Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

WITHIN-RUN VARIATIE Telkens < 2% Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

BETWEEN-RUN VARIATIE Telkens < 2% Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

JUISTHEID Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

VERWERKINGSSNELHEID Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

CONCLUSIE Goed correlatie Lage within-run en between-run variatie Juistheid bij beide weinig afwijking Menarini HA 8180 V sneller dan Tosoh G 8, maar weinig Hemoglobine Diabetes Werkingsprincipe Validatie / Verificatie Resultaten en Discussie Conclusie

BEDANKT VOOR JULLIE AANDACHT