Validatie van Pefakit APCresistentie op STAR Evolution Student

Validatie van Pefakit® APC-resistentie op STA-R Evolution Student: Ilse Brouckaert Stagementor: Dr. Inge Van haute & Apr. Stefanie Desmet Promotor: Anneleen Cottyn Stageplaats: AZ Delta

Overzicht Ø Inleiding o APC-resistentie o Pefakit APC-R Factor V testprincipe Ø Resultaten o Within-run reproduceerbaarheid o Between-run reproduceerbaarheid o Juistheid o Methodevergelijking Pefakit en Coatest o Referentiewaarden Ø Besluit

Stollingscascade APC

Inleiding: APC-resistentie Normale werking APC Werking APC bij APC-resistentie

APC-resistentie Erfelijke trombofilie aandoening Mutatie in het factor V-gen, Factor V Leiden Prevalentie: 5 -10 % Autosomaal dominant Heterozygoot: 1 chromosoom gemuteerd (5 x trombose) Homozygoot: beide chromosomen gemuteerd (80 x trombose)

Pefakit APC-R Factor V

Pefakit APC-R Factor V Firmagrenzen Pefakit (AZ Delta) Negatief ≥ 2, 9 APC ratio Heterozygoot 1, 3 -1, 8 APC ratio Homozygoot 0, 9 -1, 1 APC ratio

Within-run reproduceerbaarheid Criterium: negatieve controle % CV ≤ 5% heterozygote controle % CV < 3% Analyse: 2 verschillende controlelevels 9 metingen in eenzelfde run Resultaat: Negatieve controle Heterozygote controle Gemiddelde APC ratio 4, 5 1, 4 Standaarddeviatie 0, 2 0, 0 (0, 03) CV (%) 5, 5 1, 4 Criterium ≤ 5, 0 < 3, 0 Besluit Voldoet niet aan criterium Voldoet aan criterium Besluit: Schöni, R, et al. , 2006: %CV 4, 3%-9, 5% De resultaten worden beschouwd als aanvaardbaar

Between-run reproduceerbaarheid toestel 1 Criterium: negatieve stalen % CV ≤ 5% heterozygote stalen % CV < 3% Analyse: 10 metingen van controlemateriaal in verschillende runs Resultaat: Negatieve controle Heterozygote controle Gemiddelde APC ratio 5, 4 1, 5 Standaarddeviatie 0, 2 0, 0 (0, 03) CV (%) 3, 8 1, 7 Criterium ≤ 5, 0 < 3, 0 Besluit Voldoet aan criterium Besluit: controles voldoen aan criterium

Between-run reproduceerbaarheid toestel 2 Criterium: negatieve stalen % CV ≤ 5% heterozygote stalen % CV < 3% Analyse: 10 metingen van controlemateriaal in verschillende runs Resultaat: Negatieve controle Heterozygote controle Gemiddelde 4, 6 1, 5 Standaarddeviatie 0, 2 0, 0 (0, 04) CV (%) 4, 9 2, 2 Criterium ≤ 5, 0 < 3, 0 Besluit Voldoet aan criterium Besluit: controles voldoen aan criterium

Juistheid Criterium: op basis van Z-scores Resultaten: Staal 1 (168 deelnemers) 2 (158 deelnemers) Test ECAT Ons resultaat PEFAKIT APC-R FVL groep APC Ratio 3, 6 Classificatie Normaal APC Ratio > 5, 5 ECAT Total group 3. 71 (1. 05 -5. 26) 2. 63 (1. 05 -5. 26) %CV 15. 9 %CV 22. 4 88. 3% Normaal 7. 4% Borderline 3. 2% Abnormaal 1. 1% Geen classificatie Geen info 4. 84 (3. 89 -300. 00) 4. 34 (0. 90 -300. 00) %CV 20. 3 %CV 546. 3 61. 8% Normaal Classificatie Normaal Geen info 15. 7% Borderline 15. 2% Abnormaal 7. 3% Geen classificatie ECAT geen informatie over correctheid van de classificatie en geen Z-score Besluit: APC ratio beschouwd als betrouwbaar

Methodevergelijking Pefakit & Coatest Criterium: Pefakit Coatest Negatief ≥ 2, 9 APC ratio Negatief > 2 Heterozygoot 1, 3 -1, 8 APC ratio Positief ≤ 2 Homozygoot 0, 9 -1, 1 APC ratio Analyse: 16 stalen met Pefakit ACP-R Factor V Leiden en Coatest APC Resistance V

Methodevergelijking Pefakit & Coatest Resultaat:

Referentiewaarden controleren Criterium: Minimum 90 % moeten binnen de opgegeven referentiewaarden liggen van de firma Analyse: 21 gezonde vrijwilligers: 10 mannen en 11 vrouwen

Referentiewaarden controleren Resultaat: Besluit: Enkel firmagrens met APC ratio ≥ 2, 9 wordt overgenomen

Besluit Pefakit voldoet aan de eisen van AZ Delta ◦ Within-run, between-run reproduceerbaarheid en de juistheid vooropgestelde criteria behaald ◦ Duidelijk onderscheid tussen homozygoten en heterozygoten Pefakit is een betrouwbare test om APC-resistentie op te sporen

Validatie van Pefakit APCresistentie op STA-R Evolution Student: Ilse Brouckaert Stagementor: Dr. Inge Van haute & Apr. Stefanie Desmet Promotor: Anneleen Cottyn Stageplaats: AZ Delta