Utjecaj limunovog soka na sadraj polifenola i antioksidacijsku

Utjecaj limunovog soka na sadržaj polifenola i antioksidacijsku aktivnost špinata (Spinacia oleracea L. ) u in vitro modelu ljudske probave Josipa Mateševac i Nika Foglar Diplomski studij molekularne biologije Kolegij: Računarski praktikum

Uvod antioksidanti – tvari koje štite stanice od štete koju nanose nestabilne molekule (slobodni radikali) vitamini A, C i E flavonoidi i ostali fenolni spojevi polifenoli – široko rasprostranjene molekule u hrani biljnog porijekla antioksidacijski učinak, sposobnost inhibicije oksidacije LDL-a i agregacije trombocita, vazodilatirajuće djelovanje štite organizam čovjeka od različitih bolesti – dijabetes tipa II, kardiovaskularne bolesti, neurodegenerativne bolesti i različite vrste raka

Uvod špinat (Spinacia oleracea L. ) je bogat esencijalnim nutrijentima kao što su: karoten (prekursor vitamina A) askorbinska kiselina i mineralne tvari flavonoidi (fenolni spojevi) – antialergijsko, antivirusno i protuupalno djelovanje ferulična kiselina sinapinska kiselina kvercetin

Materijali i metode – probava in vitro korišten je komercijalno dostupan prah špinata i svježe iscijeđen limunov sok model probave in vitro temelji se na promjeni p. H otopine i dodatku enzima karakterističnih za određenu fazu probave

Materijali i metode - RP-HPLC analiza fenolnih spojeva RP-HPLC (engl. reverse phase high performance liquid chromatography) omogućava odvajanje sastojaka smjese na temelju polarnosti i njihovu kvantifikaciju analizirani spojevi – ferulična kiselina, sinapinska kiselina (310 nm) i kvercetin (360 nm) identificirani uspoređujući njihova retencijska vremena i apsorpciju UV svjetla s odgovarajućim standardima

Materijali i metode – ispitivanje antioksidacijske aktivnosti metoda DPPH – određivanje sposobnosti hvatanja relativno stabilnih slobodnih -difenil-pikrilhidrazil (DPPH·) radikala radikal apsorbira svjetlost (517 nm) pretvorba u neradikalni oblik 2, 2 reakcija s antioksidantom smanjenje apsorbancije proporcionalno je antioksidacijskoj aktivnosti istraživanog spoja

Statistička obrada podataka RP-HPLC – mg spoja/kg suhe tvari DPPH - dobiveni rezultati prikazani su kao srednja vrijednost triplikata ± standardna devijacija statistička analiza provedena je u programu Statistica jednosmjerna (one-way) ANOVA analiza i Duncanov test (Duncan's Multiple Range Test) na razini značajnosti od 5 %

Rezultati - metoda RP-HPLC 450 400 350 mg/kg 300 250 200 Kvercetin Sinapinska Ferulična kiselina 140 300 120 250 100 200 80 150 60 150 100 40 50 20 50 00 ŠŠ 0 Š Š +Š L+ L Š+L ŠI ŠI ŠI + L+ L ŠI + L ŠUŠU ŠU ŠUŠU + L+ L ŠU + L Tretman ŠUŽ ŠUŽ + L+ L ŠUŽI ŠUŽI ŠUŽ + L ŠUŽI + L

Rezultati - metoda DPPH Tretman

Rasprava povećanje sadržaja spojeva u ekstraktu s limunom – zbog spojeva u limunu? dodatna kontrola mali porast tijekom probave – statistički značajno? razgradnja sinapinske kiseline kod inicijalne probave porast antioksidacijskog kapaciteta dodatkom limunovog soka utjecaj probavnih enzima i p. H antioksidacijska aktivnost u tankom crijevu?

Zaključak Dodatak limunovog soka dovodi do povećanja sadržaja ispitivanih fenolnih spojeva u ekstraktima, ali nema većeg utjecaja u samom toku probave. Povećanje antioksidacijske aktivnosti uzoraka dodatkom limunovog soka može se pripisati spojevima već prisutnim u limunovom soku.

Hvala na pažnji!