UJI SEROLOGI DIAGNOSIS INFEKSI ENTERIK Departemen Mikrobiologi FKUKRIDA

UJI SEROLOGI DIAGNOSIS INFEKSI ENTERIK Departemen Mikrobiologi FK-UKRIDA

Pemeriksaan serologi untuk diagnosis penyakit infeksi dapat dilakukan dengan: Reaksi Antigen- Antibodi invitro

Uji serologi dapat digunakan untuk: 1. Deteksi Antigen menggunakan antibodi yang sudah diketahui. 2. Deteksi Antibodi menggunakan antigen yang sudah diketahui.

Deteksi Antigen: dapat dilakukan untuk spesimen klinik langsung atau untuk identifikasi mikroba. Deteksi Antibodi: Untuk mendeteksi respon antibodi tertentu (Ig. M/Ig. G). Ig. M muncul lebih dini pada suatu infeksi daripada Ig. G.

Diagnosis dapat ditegakkan dengan: Adanya antibodi Ig. M terhadap suatu mikroorganisme patogen tertentu menandakan infeksi yang baru atau sedang berlangsung. Adanya kenaikan titer antibodi sebesar 4 kali atau lebih antara serum masa akut dan serum masa konvalesen menunjukkan adanya infeksi.

RESPON ANTIBODI

DIAGNOSIS DEMAM TIFOID (Deteksi Antibodi) 1. Uji WIDAL mendeteksi antibodi O dan H Salmonella Typhi dan S. paratyphi. 2. Uji TUBEX mendeteksi antibodi Ig. M Lipopolisakharida O 9 Salmonella Typhi. 3. Uji TYPHIDOT mendeteksi antibodi Ig. M dan Ig. G terhadap OMP (Outer Membrane Protein) Salmonella Typhi

UJI WIDAL Untuk mendeteksi: Antibodi O dan antibodi H Salmonella Antigen O = somatic (badan kuman) Antigen H = flagel Prinsip : Reaksi Aglutinasi

DASAR REAKSI Penipisan serum : 0, 5 ml 0, 5 ml Serum (1/5) 0, 5 ml Na. Cl 0, 5 ml 1 Pengenceran serum 1/10 2 3 4 1/20 1/40 1/80 5 1/160 6 1/320 + Antigen a’ 0, 5 ml Pengenceran akhir 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 7/K Buang

Aglutinasi 1/20 1/40 1/80 + + + 1/160 + 1/320 - Titer antibodi = ………………. . Untuk mengetahui adanya infeksi: Kenaikan titer antibodi 4 kali 1/640 - K

UJI WIDAL (Slide Agglutination) Warna biru Warna merah Kit terdiri dari: Antigen O Salmonella paratyphi A (Grup A) Antigen O Salmonella paratyphi B (Grup B) Antigen O Salmonella paratyphi C (Grup C) Antigen O Salmonella typhi (Grup D) Antigen H Salmonella paratyphi A (Grup A) Antigen H Salmonella paratyphi B (Grup B) Antigen H Salmonella paratyphi C (Grup C) Antigen H Salmonella typhi (Grup D) Kontrol serum negatif Kontrol serum positif

Antigen O dan H Salmonella grup A, B, C, D

O H Antigen Grup A Antigen Grup B Antigen Grup C Antigen Grup D Kontrol serum +/- Cara kerja: 1. Sediakan plat Widal dengan lingkaran-lingkaran. 2. Teteskan serum mulai dari 40 ul, 20 ul, 10 ul dan 5 ul 3. Tambahkan ke masing-masing serum 1 tetes antigen Widal. 4. Lakukan terhadap masing-masing antigen Widal (O dan H) 5. Goyang-goyang plat selama 1 menit. 6. Periksa adanya aglutinasi 7. Bandingkan dengan kontrol serum + dan serum 8. Titer antibodi adalah: 40 ul 20 ul 10 ul 5 ul 1: 40 1: 80 1: 160 1: 320

Titer 1: 40 1: 80 1: 160 1: 320 S. paratyphi A (Grup A) S. paratyphi B (Grup B) S. paratyphi C (Grup C) S. typhi (Grup D) Kontrol Serum +/(-) (+)

O S. typhi antigen Titer 1: 40 1: 80 WIDAL TEST H 1: 160 1: 320 1: 40 1: 80 1: 160 1: 320 Acute serum Convalescent serum Kontrol Serum - Kontrol Serum +

* *OMP = Outer Membrane Protein

Rapid Test Ig. G/Ig. M (Typhidot) T 1 Ig. M T 2 Ig. G

Dasar reaksi: Rapid Test Ig. G/Ig. M gold Antigen OMPSalmonella typhi + rabbit Ig. G –gold conjugate Serum pasien Ig. M T 2 anti-human Ig. M + Membran nitroselulosa Ig. G T 1 C anti-human Ig. G Goat anti-rabbit Ig. G +

gold

Rapid Test Ig. G/Ig. M

TUBEX TF Immunoassay Magnetic Binding Inhibition (IMBI) Deteksi antibodi Ig. M terhadap LPS O 9 Salmonella typhi. Deteksi infeksi akut lebih dini 3 -4 hari demam.

Mekanisme reaksi: Apabila dalam serum terdapat antibodi Ig. M, maka antibodi ini akan menghambat ikatan antara monoklonal antibodi LPS-O 9 (partikel biru) dengan partikel magnetik berlabel Ag LPS-O 9 (warna coklat). Antibodi Ig. M LPS-O 9 yang berikatan dengan Ag LPS-O 9 (coklat) mengalami ko-sedimentasi akibat tertarik magnit pada boks skala. Banyaknya antibodi Ig. M S. typhi setara dengan kepekatan warna biru yang terbentuk.