Tcnicas de anlisis instrumental Cromatografa Cromatografia Grupo de

Técnicas de análisis instrumental "Cromatografía"

Cromatografia Grupo de técnicas utilizadas para la identificación y separación de sustancias. • La cromatografía es esencialmente un método de separación en el que los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una inmóvil (fase estacionaria), y otra móvil (fase móvil) la cual percola a través de la primera. • El proceso cromatográfico se da como resultado de repetidos procesos de adsorción-desorción durante el movimiento de los componentes de la mezcla

tipos de cromatografia: CROMATOGRAFIA LIQUIDA : La fase móvil es un solvente o una mezcla de solventes. • Papel o capa final • HPLC • columna

tipos de cromatografia: Cromatografia de gases: Fase Movil un gas inerte (He o N 2) Se realizan en columnas camilares (D=0, 25 mm y L =100 m)

tipos de cromatografia: Se pueden clasificar según su mecanismo de separación: • C. Adsorción: Separa según polaridad • C. Reparto: Separación según solubilidsad (Coeficiciente de reparto Kd) • C. Tamaño de Molecular: También llamada permeación de gel, consiste en la separación de las moléculas basándose en su tamaño. (Estas fases estacionarias poseen cavidades en las cuales las moléculas de los compuestos a separar pueden penetrar y ser retenidas, siendo las moléculas mayores las eluidas de la columna en primer lugar) • C. Intercambio ionico: substancias iónicas (inorgánicas como orgánicas)

HPLC

Usos HPLC Conservantes antioxidantes Carbohidratos simples Flavonoides y fenoles Lípidos: Catequinas del té: Las catequinas son flavonoles del té, posiblemente anticancerígenos. Se usa HPLC con hidrólisis enzimática para detectar estas sustancias tan beneficiosas • Triglicéridos: HPLC con ELSD permite la separación y caracterización de todos los tipos de triglicéridos. • Contaminantes: pesticidas (insecticidas, larvicidas, herbicidas, etc. ). , hidrocarburos aromáticos polinucleares que son contaminantes atmosféricos muy importantes. • • •

cromatograma

cromatograma • tr (tiempo de retención) : indica el tiempo que tarda en abandonar del sistema una sustancias. • tm (tiempo muerto): el tiempo en que tarda en salir del sistema la fase móvil o eluyente. • ts´(Tiempo efectivo): tiempo en que es retenido cada componente. ts´= tr-tm • Área bajo la curva: cantidad de analito presente en la muestra: A=b*h/2

Ejemplo:

cromatografia en papel: Rf: Es el factor de retardo o retraso, que mide la movilidad relativa de cada componente con respecto al máximo posible, la distancia recorrida por el frente de fase móvil (D). Ejemplo: Componente a: Rf = a / D Componente b: Rf = b / D Componente c: Rf = c / D

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