SPETTROFOTOMETRIA n n n Propriet fisiche della radiazione
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SPETTROFOTOMETRIA n n n Proprietà fisiche della radiazione e. m Interazioni radiazione-materia Legge di Lambert-Beer Strumentazione Analisi quantitative
RADIAZIONE ELETTROMAGNETICA Fenomeno particellare o ondulatorio? E = mc 2 E = h frequenza (Hz o s-1) lunghezza d’onda 1/ numero d’onda (cm-1) I intensità (Joule)
Onda elettromagnetica la radiazione e. m. è una forma di energia radiante che si propaga come un’onda trasversale
Spettro rad. elettromagnetica
Radiazione visibile n Un corpo ci appare colorato perché trasmette o riflette la radiazione “complementare”
IL COLORE La modalita' con cui le onde di luce viaggiano dipende dagli oggetti con cui vengono in contatto. Le “onde di Luce” possono essere riflesse, assorbite, oppure possono essere trasmesse attraverso l'oggetto. Riflessione Assorbimento Transmissione
CARATTERISTICHE del COLORE Un oggetto ci appare del colore che non viene da esso assorbito. ØUn oggetto che rimandi verso di noi tutte le componenti dello spettro ci appare bianco. ØUn oggetto che le assorba tutte ci appare nero.
Energia interna delle molecole Emolecola = Enucleo + Eelettr + Etrasl + Erotaz + Evibr
Interazione radiazione-materia
Emissione e assorbimento n n Emissione: le molecole vengono eccitate mediante calore o scarica elettrica e l’energia assorbita viene restituita sotto forma di radiazione e. m. Assorbimento: le molecole vengono eccitate mediante radiazione e. m e ritornano allo stato fondamentale riemettendo tutta o in parte l’energia assorbita sotto forma di en. termica
Che cos’è uno spettro? §SSPETTRO: insieme di radiazioni, emesse o assorbite da atomi o molecole espresse per mezzo di lunghezze d’onda o di frequenze. n max : lunghezza d’onda di massimo assorbimento e relativo (corrisponde alla transizione più probabile)
Transizioni elettroniche * * Nell’UV-visibile le principali transizioni energetiche sono: n * (C-C; C-H nell’UV lont) n * (C=C; 160 -255 nm) n n * (C=O; C-OH; C=N; n >285 nm
Esempi * n *
Fattori che influenzano la posizione di max CROMOFORO : gruppo funz. che assorbe in UV-vis. EFFETTO BATOCROMO: spostamento a maggiori EFFETTO IPSOCROMO : spostamento a minori EFFETTO AUXOCROMO: favorisce ass. cromoforo
Esempi
Legge di Lambert-Beer Trasmittanza T = P/P° = 10 - bc n Assorbanza A = log 1/T La legge sperimentale A = bc = assorbività molare b = cammino ottico c = concentrazione molare n
Analizziamo i fattori : , b, c n n n : DIPENDE dalla combinazione solutosolvente, dalla max NON DIPENDE dalla temperatura e dalla concentrazione b : negli strumenti UV-visibile di solito è 1 cm c : si esprime in mol/L
Relazione lineare fra due variabili Tra due variabili vi è un legame quando: y = f (x) Quindi studio : CORRELAZIONE: grado di associazione fra due variabili REGRESSIONE : quale relazione esiste tra le due variabili
CORRELAZIONE Quando due variabili riportate su un grafico mostrano un certo legame si può quantificarne l’intensità : Coefficiente di correlazione r = s 2 xy/ √ s 2 x s 2 y -1 <r < +1
Esempio di correlazione
REGRESSIONE IL METODO DEI MINIMI QUADRATI y = mx +b Con questo metodo si vogliono minimizzare i quadrati delle deviazioni delle y cioè: di 2=(y-yi)2=(y-mxi-b)2 Attraverso questi calcoli si determinano i valori di m e di b della retta che meglio si avvicina ai punti sperimentali
Grafico dei minimi quadrati
Esempio di curva di calibrazione
Coefficiente di determinazione Come faccio a verificare se il modello è valido? Si calcola il coefficiente di determinazione R 2 0 < R 2< 1 Corrisponde al quadrato di r
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