Sender cell produce AHL Receiver cell AHL gfp

クオラムセンシング Sender cell produce AHL Receiver cell AHL gfp expression pc lux. R Lux. I pc lux. I Lux. R AHL 蓄積 plux gfp

求められること AHLs 感度の異なるAHL受信装置の作成 クロストークの利用 Part: BBa_F 2620: Specificity http: //partsregistry. org/Part: BBa_F 2620: Specificity

Quorum sensing 由来生物 Autoinducer R: Group　 V. Fisheri AHL 基本構造 Autoinducer Recepter Protein synthase Lux. I Lux. R (3 OC 12) las. I las. R ＋ Rhl. I Rhl. R cin. I cin. R (3 OC 6) P. aeruginosa (C 3) (C 6) R. leguminosarum (3 OH 14 C)

求められること Rhl. I Lux. I Las. I? Cin. I? Part: BBa_F 2620: Specificity http: //partsregistry. org/Part: BBa_F 2620: Specificity

シグナル分子(=AHL)の変更 《クロストーク》 Autoinducer synthase Lux. I las. I cin. I Rhl. I Lux. R plux gfp

タイムディレイテスト(クロストーク) Lux. R plux gfp Receiver 5× 1 Ce 0 8 lls Senders 10 × 5 lls Ce 8 Lux. I las. I Rhl. I Mix(t=0) 蛍光強度測定 37℃ or 30℃ ?

タイムディレイテスト(Cross-talk) Receiver-JW 1908 Senders-XL 10 Gold plac Lux. I plac las. I plac Rhl. I ptet Lux. R plux gfp

cross-talkの効果は？ XL 10 GOLD , Receiver ：　Sender = １　：　１ 37℃ 30℃ Lux. I Rhl. I Las. Iのみ、delay発生＋低い Las. I

タイムディレイテスト(TAG効果) Senders-XL 10 Gold Receiver-JW 1908 plac Lux. I ptet plac Lux. I LVA plac Rhl. I LVA Lux. R plux gfp

LVA-Tagの効果は？ XL 10 GOLD , Receiver : Sender =1　：　1 (30℃) Lux. I Rhl. I Tagなし Tagつき Tagの効果：最大値の低下 Tagなし Tagつき

タイムディレイテスト(温度依存性) Lux. R plux gfp Receiver Mix(t=0) 37℃ or 30℃ Senders Lux. I 蛍光強度測定 las. I Rhl. I ?

温度の影響は？ XL 10 GOLD , Receiver ：　Sender = 1　: 　1 37℃ 30℃ Lux. I Rhl. I Las. I： 30℃の方が強い Las. I

タイムディレイテスト(株依存性) Senders-JW 1908 Senders-XL 10 Gold plac Lux. I plac las. I plac Rhl. I Receiver-JW 1908 ptet Lux. R plux gfp

株の影響は？ Receiver ：　Sender = 1　：　1 （37℃） JW 1908 XL 10 GOLD Rhl. I Lux. I Las. I

タイムディレイテスト(菌数比の影響) Lux. R plux gfp Receiver Mix(t=0) 蛍光強度測定 30℃ Senders Receiver / Sender (R/S) = 1 Lux. I las. I Rhl. I =100 ?

菌数比の影響は？ 30℃、JW 1908 Rhl. I Las. I S/R=100 S/R=100

タイムディレイテスト（固体培地spot） XL 10 GOLD , Receiver / Sender = 1, 37℃ Lux. I Las. I Rhl. I 2 h後 8 h後 5 h後 ptet Lux. R plux 結果予想図 →輪の広がる速度に差が出る Receiver-JW 1908 gfp

New Parts BBa_K 084008 plac Rhl. I BBa_K 0840012 plac lux. I BBa_K 084009 plac Rhl. I BBa_K 084014 plac lux. I LVA BBa_K 084007 plac las. I LVA BBa_K 084010 plac cin. I LVA