Selivanov und GOD Nachweise von Ketohexosen bzw Glucose

Selivanov und GOD Nachweise von Ketohexosen bzw. Glucose

Der Glucoseoxidase-Test (GOD-Test) Nachweis von Glucose

GOD Der Glucoseoxidase-Test ist ein spezifischer Nachweis für Glucose. Er dient zum Beispiel zur leichten Unterscheidung von Glucose und Fructose.

GOD Der Test erfolgt mit Hilfe des Enzym Glucoseoxidase, das aus Schimmelpilzen der Gattungen Aspergillus und Penicillium gewonnen wird.

GOD Die Glucoseoxidase, eine Dehydrogenase, ist ein Protein mit Flavin-adenin-dinucleotid (FAD) als prosthetischer Gruppe. Glucoseoxidase katalysiert die Oxidation von -D-Glucose zur Gluconsäure.

GOD -D-Glucose wird zur Gluconsäure katalytisch oxidiert und Wasser zu Wasserstoffperoxid reduziert.

GOD Da H 2 O 2 farblos ist, befindet sich auf dem gelb grundierten Teststäbchen der Indikator o. Toluidin(2 -Aminotoluol 2 -Methylanilin), der zu einem blauen Farbstoff oxidiert wird. Zusammen mit dem gelben Grund ergibt das eine grüne Färbung, anhand derer Schattierung die Menge der anfänglichen Gesamtglucose abgelesen werden kann.

GOD Wie bereits besprochen besteht zwischen der -D-Glucose, der offenen D-Glucose und der -D-Glucose ein Gleichgewicht. (37: 0, 3: 63)

GOD Da dieses Gleichgewicht besteht, wird bei Umsetzung der -D-Glucose zur Gluconsäure das Verhältnis zu Gunsten der -D-Glucose verschoben und die Glucose kann auch quantitativ bestimmt werden.

GOD Störende Faktoren: - Anwesenheit von Oxidationsmittel - Tatsache, das Glucose mit Fructose in einem Gleichgewicht steht

GOD Zusammenfassung

Selivanov Nachweis für Ketosen

Alexej Myschjak Selivanov‘s Reagenz Die Selivanov- Reagenz dient zum Nachweis von Ketohexosen

Selivanov Versuch

Selivanov • 2 ml Probelösung werden mit 2 ml Selivanov Reagenz vermischt. Der Ansatz wird langsam und gleichmäßig erhitzt (Schutzbrille !). Falls die Lösung siedet und noch keine Farbänderung auftritt, ist das Testergebnis negativ, und der Versuch kann beendet werden. • Optimal ist eine Temp. Von ca. 70°

Selivanov Die Selivanov Reagenz besteht aus folgenden Substanzen: - Resorcin in 5%Ethanol (Et. OH) - HCl als H 3 O+- Lieferant

Selivanov Erwartung

Selivanov • Fructose: tiefrot • Saccharose: rot • Glucose: hellrot

Selivanov Erklärung

Selivanov Auch bei der Fructose besteht ein Gleichgewicht

Selivanov Bei der Fructose aber reagiert die offene Form. Unter dem katalytischen Einfluss von H 3 O+ wird Wasser abgespalten und es entsteht -Hydroxymethylfurfural. 5

Selivanov Das gebildete 5 -Hydroxymethylfurfural reagiert nun mit der Diketoform von Resorcin unter Wasserabspaltung weiter zu einem roten Farbstoff

Selivanov Die Selivanov-Reagenz ist leider kein spezifischer Nachweis für Fructose, da: -Saccharose neben dem Monomer Glucose auch aus Fructose aufgebaut ist. Eine saure Hydrolyse der Saccharose, die bei diesem Versuch stattfindet, führt zu beiden Monosacchariden.