RICONOSCIMENTO DEL DOLORE Reazioni riconducibili ad un dolore

RICONOSCIMENTO DEL DOLORE èReazioni riconducibili ad un dolore primario érisposte protettive; fuga évocalizzazione èReazioni ad un danno duraturo éalterazioni dell’attività e/o della coordinazione motoria émodifiche motivazionali

INDICATORI DI STATI DI SOFFERENZA è changes in body weight (and related changes in food and water intake); è external physical appearance; è measurable clinical signs (e. g. , changes in heart rate, in respiratory rate, and in their nature); è changes in unprovoked behavior; è behavioral responses to external stimuli.

ANESTESIA Lo scopo dell’anestesia consiste nel prevenire la percezione degli stimoli dolorosi senza indurre una indebita depressione delle funzioni fisiologiche

FASI E PIANI DELL’ANESTESIA GENERALE I. INDUZIONE II. ECCITAZIONE III. ANESTESIA CHIRURGICA a) b) c) Piano 1: perdita del riflesso palpebrale Piano 2: assenza di movimenti oculari; respirazione regolare e profonda Piano 3: paralisi dei muscoli intercostali IV. FASE IPOSSICO-TOSSICA

CRITERI PER IL MONITORAGGIO DELLA PROFONDITÀ DELL’ANESTESIA RIFLESSI 1. Riflesso di raddrizzamento 2. Riflesso di deglutizione (riflesso laringeo) 3. Riflesso palpebrale 4. Riflesso podale 5. Riflesso pupillare 6. Riflesso corneale

CONTROLLO DELLE FUNZIONI VITALI Ô ECG e ritmo cardiaco Ô gittata cardiaca Ô pressione arteriosa e venosa e pressione nell’arteria polmonare Ô capnogramma Ô stato dei gas disciolti nel sangue e stato acido-base Ô saturazione arteriosa di ossigeno Ô volume respiratorio e frequenza Ô pressione nelle vie respiratorie Ô temperatura corporea Ô EEG

ANESTESIA Depressione dei centri respiratori Ipotermia Ventilazione forzata Mantenimento della temperatura corporea Cautela nella manipolazione dell’animale Digiuno Anticolinergici (atropina; glicopirrolato)

ANESTESIA Tranquillanti e sedativi ü ü Fenotiazine (promazina; acepromazina) Benzodiazepine (diazepam; midazolam) Butirrofenoni (azaperone; droperidolo) Agonisti 2 -adrenergici (xilazina; detomidina; medetomidina

ANESTESIA Anestetici inalatori 1. 2. 3. a base di etere (etere dietilico; metossiflurano; enflurano; isoflurano) idrocarburi alogenati (alotano) altri (protossido di azoto)

Camera per anestesia

ANESTESIA Miorilascianti: gliceril guiacolato Bloccanti neuromuscolari: Depolarizzanti (succinilcolina Non depolarizzanti (curaro, pancuronio, gallamina, atacurio e vecuronio Anestetici locali e regionali: (lidocaina, procaina, bupivacaina e tetracaina)

PARENTERAL ANESTHESIA OF MICE Agent Dose Duration of surgical anesthesia Pentobarbital 50 mg/kg IP 20 -40 minutes Tribromoethanol (avertin) 240 mg/kg IP 30 15 -45 minutes Metomidate/fentanyl 60 mg/kg + 0. 06 mg/kg SQ 29 20 -30 minutes Ketamine/xylazine 80 -100 mg/kg + 10 mg/kg IP 29 20 -30 minutes

PARENTERAL ANESTHESIA OF RATS Agent Dose Onset Duration Pentobarbital 30 mg/kg IP 19 5 90 minutes Pentobarbital 40 mg/kg IP 19 5 120 minutes Ketamine-xylazine 40 mg/kg; 5 mg/kg IP 19 5 80 minutes Ketamine-xylazine 60 mg/kg; 7. 5 mg/kg 19 2 115 minutes Ketamine-medetomidine 75 mg/kg; 0. 5 mg/kg 29 20 -30 minutes

EUTANASIA Criteri per una morte “umana” ü La morte deve sopraggiungere senza segni di panico, dolore o stress ü minimo intervallo di tempo di coscienza ü affidabilità e riproducibilità ü sicurezza per il personale implicato nella procedura ü minimi effetti fisici e/o psicologici indesiderati sull’animale ü compatibilità con i requisiti e gli scopi dello studio scientifico ü scarsi o nulli effetti emotivi sull’osservatore e sull’operatore ü minimo impatto ambientale ed ecologico ü strumentazione meccanica semplice e di facile manutenzione ü locale adibito alla procedura separato dai locali in cui soggiornano gli animali

EUTANASIA Meccanismi con cui viene indotta la morte ü IPOSSIA ü DEPRESSIONE DIRETTA DELL’ATTIVITÀ NEURONALE ü COMPROMISSIONE DELL’ATTIVITÀ NEURONALE MEDIANTE METODI FISICI

EUTANASIA Metodi fisici ü ü ü concussione dislocazione cervicale decapitazione shock elettrico microonde dissanguamento

EUTANASIA Agenti farmacologici non inalatori ü ü ü barbiturici T-61 (TANAX) cloralio idrato chetamina cloridrato magnesio solfato

EUTANASIA Anestetici inalatori ü ü ü etere alotano metossiflurano isoflurano enflurano protossido di azoto

EUTANASIA Gas non anestetici ü ü ü monossido di carbonio azoto argon anidride carbonica cianuro di potassio

EUTANASIA Method of euthanasia Rabbits/Rodents <125 gm Rabbits/Rodents >125 gm and < 1 kg Carbon dioxide Method of choice Barbiturate overdose (iv) Method of choice Barbiturate overdose (ip) Method of choice Anesthetic overdose Method of choice Exsanguination in anesthetized animal Other acceptable method KCL (iv) in anesthetized animal Not recommended due to technical difficulty Decapitation in sedated or anesthetized animal Other acceptable method Cervical dislocation in anesthetized or sedated animal Other acceptable method Decapitation in awake animal Acceptable only with scientific justification Cervical dislocation in awake animal Acceptable only with scientific justification Stunning in an awake animal Unacceptable method of euthanasia

EUTANASIA Method of euthanasia Rabbits/Rodents > 1 kg but < 5 kg Dogs and Cats Carbon dioxide Other acceptable method Unacceptable method of euthanasia Barbiturate overdose (iv) Method of choice Barbiturate overdose (ip) Other acceptable method Unacceptable method of euthanasia Anesthetic overdose Method of choice Exsanguination in anesthetized animal Other acceptable method KCL (iv) in anesthetized animal Other acceptable method Decapitation in sedated or anesthetized animal Acceptable only with scientific justification Unacceptable method of euthanasia Cervical dislocation in anesthetized or sedated animal Unacceptable method of euthanasia Decapitation in awake animal Acceptable only with scientific justification Unacceptable method of euthanasia Cervical dislocation in awake animal Unacceptable method of euthanasia Stunning in an awake animal Unacceptable method of euthanasia

EUTANASIA Method of euthanasia Non-Human Primates Carbon dioxide Unacceptable method of euthanasia Barbiturate overdose (iv) Method of choice Barbiturate overdose (ip) Unacceptable method of euthanasia Anesthetic overdose Method of choice Exsanguination in anesthetized animal Other acceptable method KCL (iv) in anesthetized animal Other acceptable method Decapitation in sedated or anesthetized animal Unacceptable method of euthanasia Cervical dislocation in anesthetized or sedated animal Unacceptable method of euthanasia Decapitation in awake animal Unacceptable method of euthanasia Cervical dislocation in awake animal Unacceptable method of euthanasia Stunning in an awake animal Unacceptable method of euthanasia

EUTANASIA Barbiturate euthanizing doses (mg/kg): Species IV route (mg/kg) IP route (mg/kg) Mouse 150 Rat 150 Rabbit 100 150 Guinea Pig 120 150 Hamster 150 Sheep 90 Goat 90 Chicken 150 Cat 80 80 Dog 80 80 Swine 90 Ferret Primate 120 80 12035