Respuesta Inmune mediada por Linfocitos B Dr Marcelo

Respuesta Inmune mediada por Linfocitos B Dr. Marcelo R. Regueiro 2019

Los linfocitos B reconocen al antígeno a través de BCR Una porción de la inmunoglobulina del BCR (PARATOPE) interacciona con una porción del antígeno (EPITOPE)

Definición de Antígeno � Molécula capaz de ser reconocida por el receptor B o T Solubles: toxinas bacterianas, proteínas solubles, ácidos nucleicos, etc. Particulados: moléculas que forman parte de una superficie celular de cáspide de virus, etc. Moléculas adheridas artificialmente a una partícula, por ej. : partículas de látex.

Definición de EPITOPE Porción del antígeno reconocida por el BCR o por el TCR 1 - Epitope conformacional: presente en la proteína nativa. Sólo reconocido por el BCR S-S epitope lineal oculto: puede ser reconocido por el 2 - Epitope lineal: BCR (si la molécula se denaturalizó) y por el TCR. epitope lineal no oculto: puede ser reconocido por el BCR y el TCR.

Antigenicidad e Inmunogenicidad HAPTENO INMUNIZACION CON HAPTENO-CARRIER Molécula pequeña que posee un determinante antigénico y a pesar de ser reconocida por el BCR no puede inducir una respuesta inmunológica por si misma, a menos que se encuentre conjugada a una molécula de mayor tamaño, generalmente a una proteína transportadora o carrier. ANTISUERO Acs anti. HAPTENO Acs anti. CARRIER Ejemplo: En algunos individuos la penicilina actúa como hapteno PENICILINA Proteina propia Anti-penicilina Anti-proteína propia modificada

Estructura de las inmunoglobulinas Las porciones hipervariables CDR 1, CDR 2 y CDR 3 de la región variable de las cadenas livianas y pesadas constituyen el PARATOPE de la inmunoglobulina.

Dominio de las inmunobilinas

Dominio de las Inmunobulinas

Ciclo de vida de los Linfocitos T Linfocito B precursor Linfocito B inmaduro que reconoce a Ag propio Linfocito B maduro reconoce a Ag extraño Plasmocito Célula estromal de médula ósea Generación de linfocitos B en médula ósea Inducción de tolerancia hacia Ags propios Activación de linfocitos B en tejidos linfáticos y secundarios Secreción de Acs en bazo, ganglios, MALT médula ósea

Ig. M En el estadio B inmaduro, los linfocitos B expresan Ig. M como parte del BCR. Ig. M Ig. D Posteriormente, comienzan a coexpresar Ig. M e Ig. D como parte del BCR.

Ciclo de vida del linfocito B (LB) El LB que encuentra el Ag forma el foco primario de proliferación. Algunas células proliferantes migran al folículo primario formando un folículo secundario con centro germinal. Ontogenia B en MO HEV stem cell pro-B pre-B Folículo secundario Foco primario de proliferación célula estromal El plasmoblasto migra a los cordones medulares y se diferencia a plasmocito o deja el ganglio linfático. BAZO LB transicionales Maduración completa El LB maduro ingresa al ganglio por sangre y egresa por el linfático eferente folículo primario cordones medulares LB folículo secundario centro germinal área de células T vaso sanguíneo vaso linfático eferente El plasmoblasto migrante se diferencia a plasmocito, principalmente en la médula ósea, pero también en otros tejidos.

Los linfocitos T específicos se activan en la zona paracortical LINFÁTICO AFERENTE Antígeno HEV T Célula dendrítica TCR T MHC II-péptido T ZONA PARACORTICAL DEL GANGLIO

Colaboración T-B Colaboración T - B

Reacción del centro germinal

Centro germinal CFD= célula folicular dendrítica T CFD T ZONA CLARA CENTROCITOS T CENTROBLASTOS ZONA OSCURA

En el centro germinal, los centrocitos cambian el isotipo de la Ig que sintetizarán, como consecuencia de un proceso de recombinación de su ADN

Diferenciación del centrocito en células B de memoria y plasmoblastos/plasmocitos

Diferenciación de plasmoblastos a plasmocitos de vida media larga en la médula ósea

Etapas enenlala inducción la Etapas inducción de lade respuesta B Colaboración del linfocito TFH en la activación del linfocito B TFH Proliferación de células B Secreción de Acs por parte de los plasmocitos

Regulación de la respuesta B por componentes de la inmunidad innata 1) Papel del complemento y sus receptores: C 3 d/g Ag Ag CD 21 CR 2 (CD 21) CD 19 CD 81 Iga Co-receptor B Ig Ag Igb La unión de los componentes C 3 d/g y C 3 d al antígeno (Ag) disminuye de 100 a 1000 veces la cantidad de Ag necesario para inducir una respuesta de anticuerpos. C 3 d/g Ag CD 21 Célula Folicular Dendrítica La retención de complejos inmunes en la membrana de las CFD favorece el desarrollo de una respuesta humoral rica en anticuerpos de alta afinidad hacia el antígeno y persistente en el tiempo.

2) Papel de los receptores tipo Toll (TLR) BTLR 9 B TLR 2 Linfocito B virgen no expresa TLRs TLR 2 TLR 6 TLR 7 TLR 9 TLR 10 Linfocito B activado o de memoria TLR 2 BTLR 9 Agonista de TLR Proliferación y diferenciación a plasmocitos.

Linfocitos B capaces de activarse sin colaboración de células T CD 4+ Linfocitos B 1 Linfocitos B de la zona marginal del bazo Producen rápidamente Acs (3 -4 días de ingresado el antígeno/microorganismo) Producción de Acs polirreactivos de baja afinidad Acs de isotipo Ig. M, Ig. A e Ig. G 2 Acs de isotipo Ig. M Se localizan en cavidad peritoneal y pleural Se localizan en el Bazo Sin aparente exposición a Ags, pueden producir también Acs naturales Relevantes en la protección contra bacterias encapsuladas: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitides

Los linfocitos B 1 y BZM son capaces de activarse sin colaboración de células T CD 4+ reconociendo antígenos T independientes de tipo II Polisacárido B ANTIGENOS T-independientes de tipo II: Es un nombre genérico que se le da a aquellas moléculas con epitopes repetitivos, capaces de inducir el entrecruzamiento extensivo del BCR y permitir la proliferación y diferenciación celular a plasmocitos, en ausencia de la típica colaboración T-B. Si bien los linfocitos B 2 pueden reconocer antígenos de estilo, sólo lograrán proliferar y diferenciarse si éstos se encuentran asociados a proteínas.

Anticuerpos Naturales Anticuerpos naturales • Se secretan sin exposición previa al microorganismo. • Isotipo Ig. M más frecuente. • Anticuerpos de baja afinidad y polirreactivos. • Anticuerpos repetitivos. dirigidos contra epitopes antigénicos Ej: polisacáridos comunes a muchos patógenos, fosfatidil colina, fosforilcolina, LPS Proteínas virales: hemaglutinina del virus Influenza

Isotipos o clases de inmunoglobulinas Ig. D Ig. G Ig. E cadena J Ig. M Ig. A

Funciones de los anticuerpos

Formación de CI solubles pequeños en circulación y activación del complemento Unión covalente de C 3 b al CI Formación de complejos inmunes durante la respuesta humoral y su depuración a través del sistema mononuclear fagocítico. Unión del CI al CR 1 del eritrocito por reconocimiento de C 3 b Los complejos inmunes (CI) de mayor tamaño pueden ser depurados por los macrófagos esplénicos y Remoción de los CI por los macrófagos esplénicos y hepáticos a través de los RFc� y receptores CR 1, CR 3 y CR 4, sin la mediación de los eritrocitos

Respuesta primaria y secundaria de anticuerpos Antígeno Título de anticuerpos Antígeno Ig. G Ig. M Tiempo (semanas o meses) Respuesta primaria Respuesta secundaria fase de latencia más corta baja cantidad de Acs mayor cantidad isotipo prevalente: Ig. M Predominantemente Ig. G (también Ig. A, Ig. E y en menor medida Ig. M) �desarrollo de memoria inmunológica �maduración de la afinidad de anticuerpos

Principales características de los isotipos de Igs Neutraliza antígenos Activa vía clásica del C´ Activa vía alterna del C´ Sensibiliza mastocitos Atraviesa placenta Difusión extravascular Nivel sérico (mg/ml) Vida media (días) Ig. M + +++ +/1, 5 10 Ig. D 0, 04 3 Ig. G 1 ++ ++ 9 21 Ig. G 2 ++ ++ 3 20 Ig. G 3 ++ ++ 1 7 Ig. G 4 ++ ++ ++ 0, 5 21 Ig. A ++ ++ 2 6 Ig. E +++ + 3 x 10 -5 2

Ig. M y activación del complemento Antígenos Ig. M sérica específica bacteria C 1 q se une a la Ig. M activándose la cascada del complemento Opsonización y fagocitosis Lisis bacteriana

Ig. E y degranulación del masctocito Anticuerpos Ig. E Los FcɛR de los mastocitos de individuos sanos (no atópicos) se encuentran asociados a anticuerpos Ig. E de diversas especificidades. Antígeno específico El entrecruzamiento de los FcɛR a consecuencia del reconocimiento del antígeno permite la activación del mastocito y su degranulación

Ig. E y citotoxicidad celular dependiente de Acs (CCDA) mediada por eosinófilos (también por monocitos y plaquetas) RFc� PARASITO Ig. E

Ig. G y citotoxicidad celular dependiente de Acs (CCDA) mediada por células NK RFc� NK Ig. G Células blanco de la CCDA recubiertas de anticuerpos Ig. G específicos NK Mecanismo citotóxico: granzimas y perforinas

Ig. G y citotoxicidad celular dependiente de Acs (CCDA) mediada por células de estirpe mieloide (granulocitos, monocitos, macrófagos) RFc� macrófago Ig. G Células blanco de la CCDA recubiertas de anticuerpos Ig. G específicos macrófago Mecanismo citotóxico: * Intermediarios reactivos del oxígeno * Mecanismos independientes del oxígeno

Receptor neonatal para Ig. G (Fc. Rn) VIDA NEONATAL: captación de Ig. G del lumen intestinal VIDA FETAL: Captación de Ig. G de sangre materna Lumen intestinal del neonato (p. H ácido) Sangre materna (p. H fisiológico) Internalización enterocito endosoma Endosoma temprano Endosoma ácido Fc. Rn libera Ig. G Sangre neonatal (p. H fisiológico) Sangre fetal (p. H fisiológico)

Vida adulta. Regulación de la vida media de la Ig. G Sangre (p. H fisiológico) Proteínas séricas Vesícula endocítica Fc. Rn une Ig. G a p. H ácido del endosoma Célula endotelial Endosoma Que recicla Fc. Rn libera Ig. G a p. H fisiológico Endosoma Selección ácido de complejos Fc. Rn-Ig. G Proteínas no unidas a receptores se degradan Lisosoma

Transporte de Ig. A a través del epitelio Unión de la Ig. A al receptor poli-Ig Endocitosis Transporte a través del epitelio Liberación de la Ig. As en la luz intestinal

Funciones efectoras de la Ig. A Lámina propia epitelio secretor lumen Neutralización en el lumen Neutralización intracelular de virus Neutralización de Ag en la lámina propia