RED DE LABORATORIOS EN DIAGNOSTICO DE LA TUBERCULOSIS

RED DE LABORATORIOS EN DIAGNOSTICO DE LA TUBERCULOSIS Mgt NILDA CONDE CJUIRO ESNPCT

CONTROL DE CALIDAD

Exámenes de Diagnóstico de la Tuberculosis 1. - Exámenes Bacteriológicos (baciloscopía, Cultivo y Prueba de Sensibilidad, y Tipificación de Cepas. ) 2. - Examen Radiológico (radiografía de tórax) 3. - Examen Inmunológico (PPD o Quanti. FERON) ESNPCT

Bacteriologia de la TUBERCULOSIS • Baciloscopía: Es fundamental para el diagnóstico de TB y seguimiento del tratamiento de los pacientes con TBP Tiene mayor confiabilidad diagnóstica (especificidad=98%) y capacidad de detección (sensibilidad=60 -80%) que el criterio clínico y radiológico).

LABORATORIOS LOCALES en el CONTROL DE LA TBC • Recibir las muestras para baciloscopias durante todo el horario de trabajo.

Comprobar que los envases de la muestra estén claramente identificados en la pared y no en la tapa. Verificar que estén acompañados por la solicitud de Investigación bacteriológica. Observar la calidad de la muestra. Ubicar los envases dentro de la cubetas . ESNPCT

• Efectuar las baciloscopias solicitadas en el ámbito de su jurisdicción. . • Tamaño 2 x 3 cm

• Enviar muestras para cultivo según las indicaciones implícitas de cultivo. • Integrar los resultados de baciloscopias en tiempo optimo. la • Ser referencia para las Unidades Recolectoras de Muestras (URM)

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Exámenes Bacteriológicos • • • En la mayoría de pacientes, se realizará una baciloscopía para detectar la TB. En unos casos se usa el cultivo. Para definir TB MDR es necesario realizar el cultivo y después la prueba de sensibilidad. ESNPCT

Baciloscopía Deriva CULTIVO • Las muestras de esputo para cultivo y prueba de sensibilidad de acuerdo a los criterios establecidos. ESNPCT

El cultivo • • Identificar que el BAAR es M. tuberculosis. Detectar TB de muestras paucibacilares (un resultado de BK de 1 a 9 BAAR). Confirmar TB en muestras extrapulmonares. Poder realizar la prueba de sensibilidad (en personas con factor de riesgo de tener TB MDR). ESNPCT

El cultivo (2) • • Un cultivo significa hacer crecer la micobacteria en sustancias que contienen nutrientes. Cuando el mycobacterium ha formado colonias (grupos), éstos pueden ser identificados para saber si es M. tuberculosis u otro tipo de micobacteria. ESNPCT

El cultivo (3) • Consiste en dos partes: 1. Detectar el crecimiento del mycobacterium. – Crece lentamente. – Puede demorar hasta 8 semanas para detectar. 2. Identificar el organismo que ha crecido. – Determinar si el organismo es M. tuberculosis u otro tipo de mycobacterium. – Demora de unas 3 a 6 semanas después de haber detectado el crecimiento. ESNPCT

ENVIO DE MUESTRA PARA CULTIVO • Rotulado de envase con nombres y apellidos. • Transporte en cadena de frio(2°-8°C)

La lectura se realiza a los 7, 15, 30 y 60 días para dar el resultado negativo

LECTURA DE RESULTADOS (-) Nº. . . No se observan colonias Número total de colonias, si hay menos de 10. (+) De 20 a 100 colonias. (++) Colonias separadas más de 100. (+++) Colonias confluentes (desarrollo en toda la superficie del medio). (c) Cultivo contaminado

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD-ESNPCT Implementación de la NTS Nº 104 MINSA/DGSP v. 01 -ESNPCT CUSCO Octubre de 2014 ESNPCT

Procedimiento para la detección de TB resistente por pruebas rápidas Toda persona con TB pulmonar debe ser evaluado por PS rápida para detectar resistencia a H y R ANTES de INICIAR TRATAMIENTO 1. TBp FP debe hacerse prueba radida : MODS o Gries 2. TBp FN debe hacerse MODS 3. De no acceder a MODS debe hacerse cultivo y PS convencional 4. Toda persona con PS rápida resistente a H o R debe tener un resultado de PS convencional 1 y 2 línea ESNPCT

Diagnóstico por cultivo • Métodos aceptados: Löwenstein – Jensen, Ogawa, agar 7 H 10, MGIT, MODS • Indicaciones de cultivo: • Diagnóstico SR en seguimiento diagnóstico, paucibacilares, muestras valiosas: biopsias, aspirados, líquidos biológicos, etc. • Control de tratamiento: a) A todo BAAR(+) a partir del segundo mes de tratamiento, b) A todo TB sensible al terminar el tratamiento, c) mensualmente a todo paciente en esquema TB resistente • Para realizar PS indirecta: se hace cultivo a partir de muestras pulmonares o extra-pulmonares ESNPCT

Pruebas de sensibilidad • PS Directas: cuando se realizan a partir de las muestras clínicas (por ejemplo esputo). Entre estas tenemos : 1. -Prueba de sensibilidad a medicamentos mediante observación microscpica, MODS (Microscopic Observation Drug susceptibility) 2. - Prueba de la nitrato reductasa o prueba de Griess. • PS indirectas: cuando requieren cultivo para aislar la Micobacteria. Tenemos : 1. - PS convencionales indirectas en medio sólido: Método de proporciones en medio Löwenstein. Jensen ( 1 ra Linea)o en agar en placa ( 2 da linea ) ESNPCT

Pruebas rápidas fenotípicas para detectar TB-MDR (tamizaje) • MODS: • Prueba directa (a partir de muestras de esputo), simultáneamente TB y TB-MDR • Indicada para resistencia a H y R • Resultados en promedio 7 a 14 días • En TB pulmonar con baciloscopía (+), (-) o paucibacilar • Indicada antes o durante el tratamiento • Nitrato reductasa (Griess): • Prueba directa, a partir de muestras de esputo baciloscopía positiva (una cruz o más) • Detecta resistencia a H y R • Resultados entre 14 a 28 días • Se debe migrar a prueba molecular Genotype® • MGIT (BACTEC): • Diagnóstico de TB y de sensibilidad a medicamentos de 1 línea: HRES + Z • Resultado entre 4 a 12 día desde el cultivo positivo • Indicada: detección de TB pulmonar y extra-pulmonar a partir de muestras pulmonares y extra-pulmonares: TB infantil, trabajadores de salud, VIH+, comorbilidades (diabetes, cáncer, IRC), TB SNC y otras extra-pulmonares. ESNPCT

Prueba rápida molecular de sondas de ADN (Genotype) • Directa en muestras de esputo e indirecta en cultivos positivos • Identifica complejo MTB y detecta mutaciones para rifampicina e isoniacida • Resultados en 72 horas • Se realiza en el INS y LRR e intermedios • Indicaciones: Detección directa o indirecta de resistencia a H y R e identificación del complejo MTB en: • Pacientes con TBP FP • Pacientes con TB FN o extra-pulmonar con cultivo positivo • Antes o durante el tratamiento • No se debe usar para monitorear respuesta al tratamiento ESNPCT

Identificación y Tipificación de micobacterias • Identificación del complejo M. tuberculosis: • Por inmunocromatografía (Capilia) y prueba molecular • Indicaciones: • i) Resultado de una PS rápida resistente a INH y RIF • ii) Cultivo de persona con VIH. • El laboratorio donde se identifiquen cepas que NO pertenecen al complejo MTB debe remitir la cepa al INS para tipificación ESNPCT

Algoritmo de Diagnóstico y Tratamiento de la TB, Perú- CULTIVO CONVENCIONAL TBP FN TBP FP TB EP MODS CULTIVO (+) Resistente a R Sensible H y R Resistente a H 2 HRZE/4 H 3 R 3 2 RLfx. ZE/7 RLfx. E TB-MDR ESQUEMA MODIFICADO O AMPLIADO PAN SENSIBLE PS D 1 y 2 L (Proporciones) TB DR no MDR TBP: Tuberculosis pulmonar H: isoniacida TBEP : Tuberculosis extra-pulmonar. R: rifampicina FP/FN: Frotis positivo/negativo DR: drogorresistente BAAR: Bacilo alcohol resistente MDR/XDR: multi y extensamente resistente TB XDR Esquemas individualizados

Muchas gracias Presentación disponible en: www. tuberculosis. minsa. gob. pe ESNPCT