Recuento de coliformes totales y pseudonomas A travs

Recuento de coliformes totales y pseudonomas (A través de filtración de membrana )

COLIFORMES TOTALES Los coliformes totales son las enterobacteriaceae lactosa- positivas y constituyen un grupo de bacterias que se definen más por las pruebas usadas para su aislamiento que por criterio taxonómico. se caracterizan por su capacidad para fermentar la lactosa con producción de ácido y gas en un periodo de 48 horas incubación comprendida entre 30 - 37°C. son bacilos gram negativos aerobios y anaerobios facultativos, del grupo coliforme, forman parte de varios géneros escherichia, enterobacter. se encuentran en el intestino del hombre y de los animales pero también en otros ambientes, agua, suelo, plantas, cáscara de huevo, etc su origen es principalmente fecal y por eso se consideran índice de contaminación fecal, pero el verdadero índice de contaminación fecal es la escherichia coli tipo I ya que su origen fecal es seguro desde el punto de vista metodológico.

pseudomonas su morfología colonial es característica de identificación en algunos medios de cultivo, por ejemplo en medio agar cetrimida, es un bacilo curvo o recto, aislado o en pareja o cadenas cortas, gram negativa(-) esta bacteria tiene motilidad positiva gracias a su flagelo. tiene la capacidad de formar biofilm, es una de las principales bacterias oportunistas, causantes de infecciones nosocomiales, especialmente en heridas, quemaduras y cuando se presentan cepas mucoides hay una alta mortalidad en casos de fibrosis quística. el género de pseudomonas prácticamente se encuentra distribuido en todas partes, por ejemplo, agua, suelos, vegetación, gasolina, objetos inanimados, en humanos animales etc. el periodo de incubación oscila entre las 24 horas y 72 horas crecen en medios convencionales, con una temperatura óptima de crecimiento entre 30 y 37°C se transmite por aire, agua contaminada, saliva, y en hospitales.

Aparatos de filtración

VOLUMEN DE AGUA ANALIZADA : El volumen mínimo para análisis de agua son 100 ml. Algunos resultados de análisis de esta muestra pueden ser : a) b) c) d) e) Ausencia de UFC de coliformes totales en 100 ml de agua problema 2 UFC de coliformes totales por 100 ml de agua problema 200 UFC de coliformes totales por 100 ml de agua problema Más de 100 colonias. Repetir la filtración con menor volumen de agua.

Medio de Cultivo para Coliformes AGAR CHROMOCULT: El agar para coliformes Chromocult® es un medio de cultivo cromógeno diferencial para el análisis microbiológico de muestras de agua. En un plazo de 24 horas este medio permite la detección, la diferenciación y la enumeración simultáneas de E. coli y bacterias coliformes del agua potable

El recuento de coliformes se basa en la capacidad de a ß-D-galactosidasa, una enzima que es característica de las bacterias coliformes, para escindir el sustrato Salmon-GAL. La reacción produce colonias de coliformes de color rojo asalmonado. Las bacterias no coliformes aparecen como colonias incoloras o, con baja frecuencia, de color turquesa.

Ventajas ➢ Ahorro de tiempo: hasta 24 horas más rápido que el antiguo método de agar Lactosado TTC. ➢ Resultados claros: recuento fácil de E. coli y las bacterias coliformes cuando se utiliza el CCA. ➢ Ahorro de dinero: no es necesario ningún otro medio de cultivo para confirmación. En cambio, en un minuto se puede confirmar la presencia de coliformes con una económica tira reactiva para determinar la actividad oxidasa. ➢ Más fácil: el método del CCA es más fácil de realizar que el método del agar Lactosado TTC.

Técnica de filtración sobre membrana

Expresión de resultados ● Cuando se obtienen recuentos de más de 200 colonias sobre una misma membrana pueden dar resultados erróneos debido a la superpoblación. ● Solo se hace recuentos a colonias que posean un número inferior da 10 o 20 por membrana ● Cuando el recuento de colonias está entre 20 -200, los resultados se expresan: Si hemos analizado una muestra sin diluir: Recuento de colonias = UFC / volumen de muestra filtrada. Si hemos analizado una muestra diluida: Recuento de colonias x Factor de dilución = UFC/ volumen de muestra filtrada.

Entrenamiento en la interpretación Agua de una fuente 100 m. L filtrados a) ausencia de UFC de coliformes totales en 100 m. L de agua problema b) 2 UFC de coliformes totales por 100 m. L de agua problema c) 20 UFC de coliformes totaless por 100 m. L de agua problema d) 200 UFC de coliformes totales por 100 m. L de agua problema e) más de 100 colonias. Repetir la filtración con menor volumen de agua

Agua embotellada 250 m. L filtrados a) ausencia de UFC de coliformes totales en 100 m. L de agua problema b) ausencia de UFC de coliformes totales en 250 m. L de agua problema c) 4 UFC de coliformes totales por 100 m. L de agua problema, para cuantificar, repetir el análisis filtrando un volumen mayor d) 4 UFC de coliformes totales por 250 m. L de agua problema, para cuantificar, repetir el análisis filtrando un volumen mayor e) más de 100 colonias. Repetir la filtración con menor volumen de agua

Agua embotellada 250 m. L filtrados a) ausencia de UFC de coliformes totales en 1. 000 m. L de agua problema b) ausencia de UFC de coliformes totales en 250 m. L de agua problema c) 2 UFC de coliformes totales por 100 m. L de agua problema d) 2 UFC de coliformes totales por 250 m. L de agua problema e) más de 100 colonias. Repetir la filtración con menor volumen de agua

Agua de piscina 100 m. L filtrados a) ausencia de UFC de coliformes totales en 100 m. L de agua problema b) ausencia de UFC de coliformes totales en 250 m. L de agua problema c) 15 UFC de coliformes totales por 100 m. L de agua problema d) 15 UFC de coliformes totales por 250 m. L de agua problema e) más de 100 colonias. Repetir la filtración con menor volumen de agua

Definiciones E. coli: Escherichia coli: Bacilo gram negativo, capaz de desarrollarse en presencia de sales biliares u otros agentes (tensoactivos) que tengan propiedades similares e inhibitorias del crecimiento y que son capaces de fermentar la lactosa a temperaturas de 35°C +/- 2°C, con producción de ácido, gas y aldehído en un lapso de 18 a 48 horas. Medio de Cultivo Selectivo: Medio que promueve el crecimiento de microorganismos específicos.