Raction du systme immunitaire face une infection bactrienne

Réaction du système immunitaire face à une infection bactérienne CHOLLEY Matthias RICHEZ Mathias POUJOL Mathis SANTIAGO Sébastien JULLIEN Valentine LAZZARINI Eva GROUPE 3

Problématique Est-ce que le Lipopolysaccharide (LPS) des bactéries à un effet sur les macrophages ?

Sommaire I) Introduction II) Matériels et méthodes III) Nos résultats IV) Conclusion V) Définitions

Introduction Nous savons que certains motifs à la surface des micro-organismes sont reconnus par les récepteurs cellules du système immunitaire. Les bactéries gram- ont à leur surface des motifs moléculaires appelés LPS. On cherche à savoir à l’aide de plusieurs méthodes si ces motifs ont un effet sur les macrophages.

Matériels et méthodes 1 Observation au microscope : 3 Décrochage au râteau : 2 Lavage avec PBS : 4 Centrifugeuse:

5 Culture : Remplissage des puits avec les cellules

Nos résultats : 1) Observation Cellules témoins Macrophages

3) Après le décrochage Cellules témoins Macrophages

2) Calculs de la quantité des cellules témoins et des macrophages cellules total de cellules vivantes cellules mortes viabilité Macrophages 7, 10 E+05 5, 50 E+05 1, 50 E+05 79, 00% témoins 1, 40 E+06 1, 30 E+06 1, 10 E+06 92, 00%

Test de toxicité du LPS sur les cellules Mesure colorimétrique de la survie cellulaire après stimulation avec le LPS 100% 90% Absorbance relative 80% 70% 60% 50% Macrophages 40% Témoins 30% 20% 10% 0% 0 1 [LPS] (ng/m. L) 1000

Observation de la morphologie des macrophages. [LPS] 0 ng/m. L [LPS] 1000 ng/m. L

Observation de la morphologie des cellules témoins. [LPS] 0 ng/m. L [LPS] 1000 ng/m. L

Conclusion La 1ère observation des cellules témoins et des macrophages montre une différence dans la morphologie cellulaire. Les macrophages montre une extension de la membrane cellulaire. Après incubation sur la nuit des cellules avec différentes concentration de LPS, nous observons que la morphologie des cellules témoins ne change pas. Cependant on observe que la morphologie des macrophages change, il y a apparition de multiples vésicules dans les cellules ainsi qu’un nombre » croissant d’extension extracellulaire. La mesure colorimétrique montre qu’il n’y a pas d’effet toxique du LPS sur les cellules témoins, alors qu’on observe une diminution du nombre de macrophages signifiant que le LPS a un effet toxique.

Définitions : PBS : C’est une solution tampon ( PBS = phosphate buffered salin ) LPS : Lipopolysaccharide Macrophage : Variété de globules blancs, de grande taille, ayant la propriété d’absorber et de détruire de grosses particules. Trypsine : La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour rôle de digérer les protéines.