Prioni in prionske bolezni mara popovicmf unilj si
Prioni in prionske bolezni mara. popovic@mf. uni-lj. si http: //www. dsms. net/hista/pata. html 3/11/2021
Vsebina Prionske bolezni n Povzročitelj prionskih bolezni n Zgodovina prionologije n Creutzfeldt-Jakobova bolezen n Stanje v Sloveniji n Novosti v prionologiji n Ali prione lahko uničimo? n 3/11/2021
Prionske bolezni Sodijo v skupino nevrodegenerativnih bolezni vendar so prenosne Sinonimi: Transmisivne spongiformne encefalopatije (TSE) ali Bolezni prionskega proteina 3/11/2021
Katere prionske bolezni poznamo pri človeku? n Creutzfeldt-Jakob-ova bolezen (CJB) – – n n sporadična (s. CJB) dedna/genetska iatrogena (i. CJB) nova različica (v. CJB) Kuru GSS FFI FSI 3/11/2021
Katere prionske bolezni poznamo pri živalih? Scrapie (praskavec) n TSE gojenih kanadskih kun n TSE gojenih jelenov in losov n BSE (bolezen norih krav) n Antilope v živalskih vrtovih n FSE (felina spongiformna encefalopatija - mačke v živalskih vrtovih in domače mačke) n 3/11/2021
Hronologija pojavljanja PB 3/11/2021
Povzročitelj prionskih bolezni prion “beljakovinski kužni delec brez nukleinske kisline” Stanly B. Prusiner, roj. 1942 Prusiner, S. B. Science 1982; 216: 136 -144. Nobelova nagrada za medicino 1997 l. Prusiner, S. B. PNAS 1998; 95: 13363 -13383. 3/11/2021
Celični prionski protein (Pr. PC) 3/11/2021
Pr. P in PRNP na kratkom kraku kromosoma 20 3/11/2021
Polimorfni kodon 129 na PRNP evropska populacija MM MV VV 39% 49, 8% 11, 1% slovenska populacija 46, 8% 41, 1% 12, 1% Homozigoti so bolj dovzetni za CJB 3/11/2021 slovenski s. CJD v. CJD 80% 12% 8% 100% (99, 9%) (0, 1%) -
Izomeri Pr. P a - Pr. PC b – Pr. PSc = prion 3/11/2021
Okužba 3/11/2021
C Pr. P 3/11/2021 Sc Pr. P
Kako nastajajo prioni in kje jih lahko najdemo? Nastajajo v možganih? !: n n n Spontana somatska mutacija PRNP? Spontana post-translacijska sprememba konformacijske oblike Pr. PC v Pr. PSc? Mutacija PRNP na nivoju zarodnih celic – dedne oblike! Vnos v organizem iatrogeno, s hrano in s transfuzijo krvi Lahko jih najdemo tudi v RES (enteralni vnos) 3/11/2021
Kako in zakaj se Pr. PC spremeni v Pr. PSc ? 3/11/2021
Kaj podpira domnevo, da je prion oz. Pr. PSc le konformacijsko spremenjen Pr. PC? n n n n Pr. P 00 transgenske miši – ne zbolijo Pr. PHH transgenske miši spontano razvijejo bolezen Pojav CJB v treh pojavnih oblikah: sporadični, kužni in dedni Prenos dednih prionskih bolezni na poskusne živali Vpliv polimorfizma na kodonu 129 PRNP na pojav različnih sevov Amiloidne lastnosti agregatov Pr. PSc Neobčutljivost kužnosti priona na metode, ki uničijo konvencionalne mikroorganizme: UV in X žarki, nukleaze, formalin, standardno avtoklaviranje Postopki, ki spreminjajo ali hidrolizirajo beljakovine uničijo kužnost priona oz. Pr. PSc 3/11/2021
Sc Pr. P n n n Ni še popolnoma pojasnjeno Purificiran Pr. PSc in generiran in vitro je kužen v posebnih pogojih Občasno Pr. PSc ni dokazljiv v obolelih možganih, čeprav je bolezen prenosna, z več pasažami se Pr. PSc pojavi FFI in GSS A 117 V so občasno brez dokazljivega Pr. PSc in jih ni mogoče prenesti na poskusne živali Slabo občutljive metode detekcije? Protein X? 3/11/2021 n = prion?
Zgodovina prionologije 3/11/2021
Scrapie ali praskavec n 1759 – Traberkrankheit (trotting disease) n 1853 – Scrapie (praskanje) – Trembler 3/11/2021
Praskavec (ovce, koze) 3/11/2021
CJB n n n Hans Gerhard Creutzfeldt 1920 in Alfons Jakob 1921 Genetska/Dedna (g/d. CJB) 1921 Iatrogena CJB (i. CJB) 1974 – – n Kornea (4) Dura (169) HGH (191) FSH (4) Nova različica (v. CJB) VB 1996 3/11/2021
Kuru - tresenje 1957 V. Zigas n D. C. Gajdusek n 3/11/2021
Kuru n n n Pleme Fore na PNG Ritualni endokanibalizem Obolevale so predvsem žene in otroci Peroralni in parenteralni vnos Nesigurna hoja, tresenje, nekontroliran smeh, pozno demenca 3/11/2021
Inkubacija? n 3/11/2021 Inkubacija 14 let (40 let)
Kuru, scrapie, CJB – podobne bolezni? 1959 veterinar William J Hadlow n 1966 prenos kuru na opice n 1976 Nobelova nagrada za medicino DC Gajduseku n Počasni virus!? n 3/11/2021
Prenos drugih humanih PB na poskusne živali 1968 CJB n 1981 GSS n 1995 FFI n 3/11/2021
Povzročitelj praskavca? n n n Alper T, Haig DA, Clarke MC. Bichem Biophys Res Commun 1966; 22(3): 278 Pattson IH, Jones KM. Vet Rec 1967; 80: 2 Griffith JS. Self-replication and scrapie. Nature 1967; 215: 104344 “Konvencionalne metode, ki uničijo viruse in druge mikroorganizme, ne uničijo kužnosti prionov!” Beljakovina brez nukleinske kisline! Brez reakcije v znanstvenih krogih? ! 3/11/2021
BSE v VB 3/11/2021
Zakaj se je BSE pjavila? 3/11/2021
Posledice BSE 3/11/2021
BSE 3/11/2021 v. CJB
BSE Sev priona je enak! 3/11/2021 v. CJB
v. CJB 1994 prvi bolnik z neobičajno sliko hitro napredujoče demence n 1996 Lancet – 10 opisanih primerov v. CJB n Pojav posameznih primerov v. CJB v drugih državah n 3/11/2021
v. CJB n n vs Oboleli 28 let Umrli 29 let Trajanje bolezni 14 mesecev mes Vodilni znaki: psihiatrični, motnje senzorija, cerebelarni znaki 3/11/2021 s. CJB n n Oboleli 64 Umrli 65 Trajanje bolezni 6 mesecev Vodilni znak demenca
v. CJB vs s. CJB 3/11/2021
Trenutno stanje v. CJB v svetu December 2008: n n 167 v VB (3 še živi) (www. cjd. ed. ac. uk) 23 primerov v. CJB v Franciji 4 primera v. CJB na Irskem, po 2 primera v ZDA in v Kanadi, ki so živeli en čas v Angliji 4 primeri v Španiji, 2 primera na Nizozemskem, 2 primera na Portugalskem in po 1 primer v: Italiji, na Japonskem, na Portugalskem in v Saudovi Arabiji 3/11/2021
v. CJD v VB in Franciji 3/11/2021
Creutzfeldt-Jakobova bolezen CJB n Creutzfeldt-Jakob-ova bolezen (CJB) – sporadična (s. CJB) – dedna/genetska – iatrogena (i. CJB) – nova različica (v. CJB) 3/11/2021
sporadična CJB s. CJB Incidenca 1 -2/mil/leto n Enakomerno razširjena po svetu n Etiopatogeneza nepojasnjena n Od leta 1993 pojačan nadzor nad pojavljanjem CJB v Evropi (in svetu) n Od leta 1994 je Slovenija vključena v nadzor n 3/11/2021
Klinična slika s. CJB n n n Hitro napredujoča demenca, ki traja največ 2 leti Znaki okvare malih možganov, piramidne proge, ekstrapiramidnega sistema, motnje vida Mioklonizmi Značilen EEG (66% obč. , 74% spec. ) Značilna MR glave (63% obč. , 92% spec. ) Beljakovina 14 -3 -3 v likvorju (95% obč. , 93% spec. ) 3/11/2021
MR glave Hiperintenziven signal v kaudatusu in putamnu n n Občutljivost 63% Specifičnost 92% 3/11/2021
EEG pri s. CJB 3/11/2021
Makroskopska slika CJB Teža možganov: 920 - 1470 gr (1210 gr) 3/11/2021
Histopatološke spremebe pri CJB n n n Spongiformna degenracija nevropila Propad nevronov Reaktivna astroglioza 3/11/2021
Spongiformna degeneracija, propad nevronov, glioza s. CJB - skorja velikih možganov TV s. CJB - skorja malih možganov 3/11/2021 s. CJB - glioza (GFAP) Normalni mali možgani
s. CJB - IH tipi odlaganja a) sinaptični b) perivakuolarni c) primitivni plaki + sinaptična +aksonska d) perinevronalen Sc Pr. P a b c d Te odlage Pr. PSc niso vidne v HE preparatu in nimajo barvnih lastnosti amiloida 3/11/2021
Amiloidne odlage Pr. PSc kuru lehe v 10% s. CJB 3/11/2021 lehe kuru
Odlage Pr. PSc v obliki leh imajo lastnosti amiloida HE CR TT FDDNP 3/11/2021
Lehe kuru so setavljene iz Pr. PSc 3/11/2021 3 F 4
Iatrogena CJB (i. CJD) n Iatrogena CJB (i. CJB) 1974 – – – 3/11/2021 Roženica (4) Dura (169) HGH (191) FSH (4) Kirurški instrumenti? Stereotaktičke elektrode?
Dedna/genetska CJB (f/g. CJD) n n n Le 10% CJB Točkovne mutacije Oktapeptidne insercije Dominantno dedovanje z nepopolno penetranco 40% brez družinske anamneze 3/11/2021
Zakaj spremljamo PB pri človeku, kravah in ovcah v EU ? n n n n Leta 1985 epidemija BSE v VB – skrb za zdravje ljudi 1993 projekti EU - spremljanje CJB 1994 Slovenija vključena v projekt EU s štirimi primeri CJB v arhivu IP od leta 1985 1994 prvi primeri v. CJB pri mladih v VB 1996 objava 10 primerov v. CJB v Lancetu EU projekti nadzora nad pojavljanjem PB potekajo še danes Namen projektov - iskanje novih primerov v. CJB izven VB, ugotoviti incidenco s. CJB, preprečiti prenos v. CJB s človeka na človeka s krvjo in organi 3/11/2021
Zakaj vstrajamo pri pojačanem nadzoru nad pojavljanjem PB človeka v Evropi in svetu? BSE n v. CJB n BASE! n Transfuzija krvi n Presajevanje organov n 3/11/2021
Rezultati pojačanega nadzora nad pojavljanjem PB Odkrivanje primerov v. CJB izven VB n Odkrivanje BSE izven VB n Porast incidence s. CJB n Pojav BASE n Prenos v. CJB s krvjo n 3/11/2021
Kako razlagamo porast incidence s. CJB v EU in Sloveniji? n n n EU - Smernice za diagnostiko prionskih bolezni Večja pozornost klinikov ULRS 12. 1. 2001 - zakonska odredba o preventivnih ukrepih v zvezi s TSE, ki vključuje v 4. členu obvezno obdukcijo pri utemeljenem sumu na katerokoli obliko CJB 3/11/2021
s. CJD -po primerih med 1987 in Est. end 2008 3/11/2021
CJB v Sloveniji glede na spol Ž: M=2: 1 3/11/2021
CJB v Sloveniji glede na starost: od 51 do 82 l. srednja 64, 8 l. 3/11/2021
Ovrženi klinični sumi na CJB 3/11/2021
Novosti v prionologiji n n n prione so našli v vranici in skeletni mišici umrlih zaradi s. CJB (torej niso omejeni le na OŽ) Trije verjetni primeri prenosa v. CJB s krvjo v VB! BASE – bovina amiloidogena spongiformna encefalopatija – dve kravi v Italiji s spremembami v možganih, ki so podobne spremembam pri bolnikih s s. CJB 3/11/2021
Peden AH et al. Preclinical v. CJD after blood transfusion in a PRNP codon 129 heterozygous patient. Lancet 2004; 264: 527 -529. kodon 129 MV vranica, ne možgani 3/11/2021
BASE bovina amiloidogena spongiformna encefalopatija n 2 primera v Italiji n malo sprememb v obeksu, pretežno v skorji n WB! n BASE s. CJB? n 3/11/2021
BASE s. CJD? BASE s. CJB 3/11/2021
Ali prione lahko uničimo? Lahko! n Avtoklaviranje v pari na 134 o C eno uro (steklovina, inštrumenti, zaščitne rokavice) n 96% mravljična kislina eno uro (tkiva) n 2 N Na. OH (80 gr/l) eno uro ali n 5% Na. OCl dve uri (delovne površine) 3/11/2021
- Slides: 64