Primer caso de Tizn de rosa Rosa sp

Primer caso de Tizón de rosa (Rosa sp) causado por Alternaria alternata en la provincia de Cotopaxi, Ecuador. FERNANDA SÁNCHEZ 1 , FERNANDO HERRERA-LEON 1, ALEXANDRA BERMUDEZ 1, NOELIA BARRIGA-MEDINA 1, 2, DARIO RAMÍREZ 1, 2, KAREN HERRERA 1, ANTONIO LEON-REYES 1, 2, 3. 1 Laboratorio de Biotecnología Agrícola y de Alimentos-Ingeniería en Agronomía, Colegio de Ciencias e Ingenierías el Politécnico, Universidad San Francisco de Quito USFQ, Campus Cumbayá, Quito, Ecuador. 2 Instituto de Microbiología, Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales COCIBA, Universidad San Francisco de Quito USFQ, Campus Cumbayá, Quito, Ecuador. 3 Instituto de Investigaciones Biológicas y Ambientales BIÓSFERA, Colegio de Ciencias Biológicas y Ambientales COCIBA, Universidad San Francisco de Quito USFQ, Campus Cumbayá, Quito, Ecuador. INTRODUCCIÓN RESULTADOS Ecuador tiene 5. 486 ha de área cultivada de rosas, y es el tercer país del mundo en el ranking de los principales exportadores de flores cortadas ($ 852 M) después de Holanda ($ 4. 17 B) y Colombia ($ 1. 46 B) (Gordon Hanks 2018). El cultivo de rosas enfrenta varios patógenos, los más comunes mildiú polvoso (Sphaerotheca pannosa, Oidium sp. ), Mildiú velloso (Peronospora sparsa) y el tizón de Botrytis que inicia con manchas blancas restringidas que luego se vuelven marrones en la superficie de los pétalos, las lesiones se extienden y conducen a la muerte total del pétalo (Pie & De Leeuw 1991; Carisse 2016; Cao et al. 2017; Muñoz et al. 2019; Knox et al. 2018), B. cinerea puede penetrar los tejidos del tallo y las hojas. Figura 1. Lesiones marrón en botones de rosa y características morfológicas de Botrytis sp. y Alternaria sp. aislados de botones de rosa con tizón de Botrytis. a, Lesiones características del tizón de Botrytis en botones de rosa. b, colonia fúngica después de ocho días de crecimiento en PDA reverso y vista frontal de la placa Petri correspondiente al aislado tipo I. c, colonia después de ocho días de crecimiento en PDA reverso y vista frontal de la placa Petri correspondiente al aislado tipo II. d, examen microscópico del micelio y conidios a 400 X correspondientes a aislamientos de tipo I. e, examen microscópico de micelios y conidios a 400 X correspondientes a aislamiento de tipo II. MATERIALES Y MÉTODOS Muestreo y aislamiento de patógenos . Botones con lesiones típicas de Tizón de Botrytis recolectados de la provincia andina ecuatoriana de Cotopaxi en la finca Quitoinor flowers. PDA (Papa Dextrosa) + gentamicina. Incubación en ausencia de luz, por ocho días a 28°C. Extracción de ADN con CTAB Incubación del patógeno en Caldo Papa Dextrosa a 27°C por ocho días. Amplificación de la región ITS (primers ITS 1 e ITS 4) y gen RPB 2 (RPB 2 5 F y RPB 2 7 R) Macrogen Laboratories en Seul-Korea. Se sabe que Alternaria causa la mancha negra de Alternaria en el tejido foliar de rosas (Rao 1964; Abbas et al. 2014; Ghosh & Shamsi 2014), sin embargo hasta la fecha, este es el primer informe de A. alternata que causa síntomas de enfermedad en botones / pétalos de rosa en Ecuador. Las rosas son un producto económicamente importante para las exportaciones ecuatorianas y patógenos emergentes como Alternaria alternata, podrían afectar su producción. AGRADECIMIENTOS REFERENCIAS -Gordon Hanks. 2018. A review of production statistics for the cut flower and foliage sector Updated 2018 (part of AHDB Horticulture project PO BOF 002 a ) Gordon Hanks. Agric Hortic Dev Board. -Pie K, De Leeuw GT. 1991. Histopathology of the initial stages of the interaction between rose flowers and Botrytis cinerea. Netherlands J Plant Pathol Vol. 97: 89– 95. -Carisse O. 2016. Epidemiology and Aerobiology of Botrytis spp. In: Fillinger S, Yigal Elad, editors. Botrytis - Fungus, Pathog its Manag Agric Syst. Quebec: Springer; p. 127 – 148. -Cao X, Du Y, Xiusheng Z, Li H, Guo S, Hou D, Zhou Y, Song X, Zhang Y. 2017. First Report of Leaf Blight Disease on Lanzhou Lily ( Lilium davidii var. unicolor ) Caused by Botrytis cinerea in China. Plant Dis. 1– 2. -Muñoz M, Faust JE, Schnabel G. 2019. Characterization of Botrytis cinerea From Commercial Cut Flower Roses. Plant Dis. (July): 1577– 1583. -Knox GW, Paret M, Mizell RF. 2018. Rose Pests and Diseases in Florida 1. IFAS Ext. 1– 9. -Rao V. 1964. Alternaria leaf spot of rose from India. Mycopathol. 1– 2. -Abbas M. , Aziz-ud-Din, Rafique K, Qadir A, Rashid A, Qamar M, Rafique M, Gleason M. 2014. First report of Alternaria black spot of rose caused by Alternaria alternata in Pakistan. Plant Dis. 98(5): 1– 2. -Ghosh A, Shamsi S. 2014. Fungal diseases of rose plant in Bangladesh. J Bangladesh Acad Sci. 38(2): 225– 233. Identificación microscópica Caracterización molecular y análisis filogenético CONCLUSIONES Figura 2. Relación filogenética de las secuencias consenso de los aislados de Alternaria alternata de rosa agrupados con otros 12 aislados de A. alternata de otros huéspedes y ubicaciones. Las secuencias de ADN de A. alternata de otros huéspedes y patógenos relacionados se recuperaron de la base de datos NCBI Gen. Bank. El aislado del presente estudio se muestra en negrita. Stemphylium globuliferum se utilizó como un grupo externo. Caracterización molecular y análisis filogenético Caldo Papa Dextrosa Concentración final : 1 x 105 conidios/ml. Caja de PDA con crecimiento de A. alternata/ B. cinerea/ s. cerevisae/ F. oxysporum. Gota de 5 µl de solución de conidios en el centro del pétalo (n = 10) Cámara húmeda con 99% de humedad relativa a 27 ° C. Mediciones diarias del tamaño de la lesión. Se utilizaron 10 rosas para cada tratamiento (A. alternata, B. cinerea, S. cerevisae, F. oxysporum y medio PDB) y se realizaron 10 réplicas biológicas. El análisis de datos se llevó a cabo mediante el análisis de varianza (ANOVA). CONTACTO Figura 3. Bioensayo en botones de rosa (Rosa sp. var. Vendela). a, diámetro de las lesiones producidas por A. alternata, controles positivos y negativos. Las barras superiores muestran una desviación estándar, las letras minúsculas indican medias iguales usando ANOVA con la prueba de Tukey al 5%. b, ejemplo de las lesiones obtenidas por cada uno de los aislados utilizados. Antonio Leon Reyes - Laboratorio de Biotecnología Agrícola y de Alimentos Ingenieria en Agronomía, Colegio de Ciencias e Ingenierías el Politécnico, Universidad San Francisco de Quito USFQ, Campus Cumbayá, Quito, Ecuador. aleon@usfq. edu. ec orcid. org/0000 -0001 -9142 -9694 SESIÓN: BIOTECNOLOGÍA Y BIODIVERSIDAD