PRAKTIKUM MEKANISME DASAR PENYAKIT Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran

PRAKTIKUM MEKANISME DASAR PENYAKIT Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin 2014

Tata tertib 1. Pada saat praktikum, Mahasiswa mempersiapkan : - Jas praktikum - Pensil warna - Penuntun praktikum 2. Selama berada didalam laboratorium, tidak diperbolehkan untuk makan, minum, merokok dan menggunakan alat kosmetik. 3. Tidak melepas dan memakai kembali kontak lensa. 4. Bekerja dengan hati-hati.

MIKROSKOP

Lensa okuler

Lensa Objektif

Kondenser

Mechanical stage

Focus

PEWARNAAN BAKTERI

Pewarnaan Sederhana Dikatakan sederhana karena hanya menggunakan 1 zat pewarna. . Zat warna basic yang paling sering digunakan untuk pewarnaan sederhana adalah methylen blue, crystal violet, dan carbol fuchsin. Tujuan: • Morfologi • Koloni Prinsip: Bakteri=latar=warna sama --warna bakteri lebih gelap Fuchsin/Safranin Methylen Blue

PEWARNAAN NEGATIF �Praktis, tidak perlu fiksasi dengan panas dan tidak ada pengaruh bahan kimia �Zat warna acidic dgn chromogen bermuatan negatif, tidak bisa penetrasi ke dalam sel �Latar belakang berwarna �Tujuan : morfologi dan koloni �Zat warna : �Tinta India (negrosin)

Pewarnaan Negatif Kenapa bisa latar hitam? ? ? Karena yang digunakan adalah tinta cina/india ink yang tdk mampu berdifusi ke dalam bakteri streptobasil coccus

Pewarnaan Differensial �Pewarnaan Gram �Pewarnaan Tahan Asam �Pewarnaan Kapsul �Pewarnaan Spora

PEWARNAAN GRAM �Merupakan pewarnaan diferensiasi �Tujuan : Morfologi, koloni, dan sifat gram � 4 reagensia �Zat warna primer : Crystal Violet �Mordant : Lugol atau Gram’s Iodin �Peluntur : Ethyl Alkohol 96% �Zat warna kontras : safranin atau larutan Fuchin

PEWARNAAN GRAM �Gram Positif Dinding peptidoglikannya tebal Mengikat zat Warna Pimer (diperkuat oleh mordant) tidak luntur oleh peluntur tidak terpengaruh zat warna kontras �Gram Negatif Tidak bisa mengikat kuat zat warna primer luntur dengan alkohol Zat warna kontras mendominasi

Contoh bakteri : Gram+ Gram- Streptococcus Pyogenes E. Coli Staphylococcus Aureus Salmonella spp. Bacillus Cereus Shigella spp

Gram Positif

Gram Negatif

PEWARNAAN KAPSUL - Untuk melihat kapsul dari bakteri - Ada 2 metode : Burry-Gins dan Tyler

Burry-Gins Tujuan: • Morfologi • Koloni • Sifat=untuk melihat kapsul Bakteri berkapsul bakteri patogen 2 reagensia: Zat warna primer : Tinta India / Negrosin Zat warna kontras : Safranin / air fuchin

PEWARNAAN TAHAN ASAM (ZIEHL – NEELSEN) �Tujuan : morfolgi, koloni, sifat tahan asam �Bakteri tahan asam: �Mycobacterium tuberculosis �Mycobacterium leprae �Pewarna: �Primer : Carbol Fuchin (dipanaskan) �Peluntur : Alkohol asam ( Ethanol 95% + HCl 3%) �Kontras : Methylen Blue

PEWARNAAN SPORA �Untuk melihat spora bakteri �Pewarna: �Primer : Carbolfuchsin Ziehl Neelsen, pemanasan �Zat peluntur : Asam sulfat 1% �Kontras : Methylen blue 1% �Contoh basil berspora: �Bacillus cereus �Bacillus anthracis

TERIMA KASIH