Posttranslan modifikace blkovin Vytek 2009 Vybran posttranslan modifikace

Posttranslační modifikace bílkovin Vytášek 2009

Vybrané posttranslační modifikace • modifikace reaktivními sloučeninami dusíku (RNS) • racemizace • neradikálové modifikace bočních řetězců aminokyselin (Asn, Gln, Arg, Glu) • neenzymatické glykace

Kyselina peroxydusitá a 3 -nitrotyrosin k = 109 M-1 s-1 3 -nitrotyrosin

Koncentrace 3 -nitrotyrosinu v séru nedonošených novorozenců před infekcí a v průběhu infekce

Koncentrace vázaného 3 -nitrotyrosinu v séru potkana během hypoxie

Racemizace kyseliny L-asparágové v proteinech

Vybrané neradikálové modifikace bočních řetězců aminokyselin • deamidace • tvorba citrulinu • tvorba pyroglutamátu

Deamidace • Mění/poškozuje boční řetězce asparaginu a glutaminu, protože je konvertuje na asparágovou resp. glutamovou kyselinu • Probíhá rychleji, je-li následná aminokyselina malá jako je glycin • In vitro probíhá rychleji , je-li zvýšena teplota či p. H

Tvorba citrulinu

Tvorba N-koncového pyroglutamátu • Derivát glutamové kyseliny s volnou aminoslupinou, která reaguje s volnou karboxylovou skupinou za vzniku laktamu (vnitřní amid) • je problemem v Edmanově sekvenování

Neenzymatická glykace • Neenzymatická glykace je posttranslační modifikace bílkovin in vivo, která začíná spontánní reakcí cukru s volnou aminoskupinou proteinu • Reakci popsal Maillard pro podmínky in vitro jako „neenzymatické hnědnutí“. • První krok neenzymatické glykace je reakci mezi redukujícím cukrem a volnou aminoskupinou bílkoviny(obvykle -amino skupina lysinu)

D-glucose Schiff´s base D-glukosa Schiffova base Amadori product Amadoriho produkt

Rané produkty (Schiffovy base a Amadoriho produkty) jsou dále modifikovány řadou reakcí a výsledkem je celá řada zatím neúplně identifikovaných sloučenin , které se označují jako koncové produkty pokročilé glykace (advanced glycation end products (AGE products). Pokud se v syntéze pokročilých produktů uplatňuje oxidace, tento typ koncových produktů se nazývá koncový produkt pokročilé glykooxidace (advanced glycooxidation end products AGOE products).

1 -karboxyalkyllysin R=H karboxymethylysin R = CH 3 karboxyethyllysin

Dopady neenzymatické glykace • • Krev Dlouhožijící proteiny - kolageny, krystaliny Diabetes Stárnutí