plasmid DNA Extra chromosomal DNA Double strand DNAds
plasmid DNA 란? Extra chromosomal DNA. Double strand DNA(ds DNA). Covalently Close Circle form(CCC-form). Replicon(ori). Gene marker, Selectable maker. F, R, Col, Ti, 2 ㎛ 등.
세균 내의 plasmid DNA
p. UC-8 Vector DNA.
plasmid DNA의 다양한 크기
plasmid의 복사체 수(Copy Number) Cloning에서 vector의 크기와 복사체 수는 형질전환 율과 유전자산물의 생산량에 영향을 미친다. 복사 체 수(Copy Number). Stringent form plasmid : Low copy number / cell(1~2개). Relaxed form plasmid : High copy number / cell(10개 이상).
plasmid의 복사체 수(Copy Number) 접합성과 양립성 n Conjugative plasmid DNA : tra gene 보유. n Non - conjugative plasmid DNA. tra gene 없음(비 접합 성). n Compatible plasmid DNA : 서로 다른 종류의 plasmid가 공존함(7 종류의 plasmid 공존). n Incompatible plasmid DNA(비 양립성). 서로 다른 종류의 plasmid가 공존하지 못함. 한 쪽의 plasmid curing 됨.
접합(Conjugation)
plasmid DNA의 종류 F(Fertility) plasmid DNA. n tra gene 보유 : 접합 성 plasmid. R(Resistant) plasmid DNA. n 항생제 분해 효소 생산 유전자를 갖고 있어, 항생제에 저항성을 나타내는 plasmid. 다른 세균에 전이될 경우 치료가 쉽지 않음. Chlorampenicol, Ampicilline. Col plasmid DNA. n E. coli(대장균)가 보유하고 있는 plasmid로 colicin을 생산하여 다른 종의 세균을 죽임. Virulence plasmid DNA(독성). n 숙주세포에 질병을 야기하는 plasmid. n Agarobacterium tumefaciens(Ti plasmid). n 쌍 자엽 식물에 crown gall disease 야기함.
plasmid DNA의 종류 Degradative plasmid DNA(분해). n Toluene, Salicylic acid를 분해시키는 물질을 성할 수 있는 유전자를 갖는 plasmid. n Pseudomomas putida: Tol plasmid(p. WWO). ※ 2 ㎛ plasmid DNA: 진 핵 생물의 plasmid. Saccharomyces cerevisiae (효모)에서 발견됨. 합
Bacteriophage(Viral vector) 세균성 virus : Simple structure. Polyhedral(다면체) 구조. 구성성분 : 단백질 과 핵산으로 구성됨. n Protein : Head, Tail fiber의 구성 성분. Capsid(coat) protein : Capsomere 단위로 구성됨. n Nucleic Acid : DNA, RNA. Life cycle : Lytic, Lysogenic life cycle. n n Lytic life cycle(용균 성 생활) : 숙주세포 파괴. Lysogenic life cycle(용원 성 생활). 숙주세포 생존(Prophage, Temperative phage).
용균 성 생활(Lytic life cycle)
용균 성 생활(Lytic life cycle)
DNA injection 방법
M 13 phage의 생활환
λ phage의 유전자 구조 49 kb의 크기. 유전자 왼쪽의 1/3 : Coat protein gene. A ~ J gene : Capsid protein gene. cos site(양 말단) : 점착성 말단. Cohesive end, Sticky end.
λ phage DNA의 복제
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