Physiologie de la reproduction DCEV 1 La barrire
Physiologie de la reproduction – DCEV 1 La barrière d’espèce à la fécondation Approche moléculaire BOURCET Maryline LANDRY Margotte POIROT Julie
Plan Introduction I. Un premier modèle expérimental : l’oursin II. Un modèle expérimental chez les mammifères : la souris Rappel sur la membrane pellucide III. Des résultats controversés par des expériences récentes Conclusion
I. Un premier modèle expérimental : l’oursin 1. La barrière active une molécule chémotactique : le resact 2. La barrière par contact importance de la gangue pour certaines espèces importance de la membrane vitelline pour d’autres
Ø Une grande variabilité de la bindine assure la barrière d’espèce
II. Un modèle expérimental chez les mammifèresü: Souris la souris = modèle expérimental. Rappel : Ovocyte et zone pellucide Zone pellucide = 7µm 3 glycoprotéines ZP 1 (200 000 Da) x 1 ZP 2 (120 000 Da) x 4 ZP 3 (83 000 Da) x 4 Autres espèces : qqes glycoprotéines ZPB : homologue humain de ZP 1 ü structure filamenteuse : alternance ZP 2 et ZP 3 reliées par ZP 1 ü ZP 3 : dizaines de millions interaction avec le spermatozoïde chaîne polypeptidique ± 400 a. a. + courtes chaînes d’oligosaccharides
1. Expérience d’inhibition - incubation de spermatozoïdes de souris avec des glycoprotéines de la zone pellucide d’ovocytes de souris ZP 1 ZP 2 ZP 3 - on observe la fixation de ces spermatozoïdes sur les œufs de souris ZP 1 et ZP 2, fixation normale ZP 3, pas de fixation Þ ZP 3 est responsable de la fixation du spermatozoïde
2. Rôle de ZP 3 Récepteurs de ZP 3 : au moins 3 protéines de la membrane plasmique des spermatozoïdes reconnaissent différents sites de ZP 3 => réaction acrosomiale 3. Rôle de ZP 2 Fixation du spermatozoïde à l’ovocyte après la réaction acrosomiale => accrochage secondaire Récepteurs sur la membrane interne de l’acrosome
III. Des résultats controversés par des expériences récentes Expérience avec des zones pellucides de souris «humanisées» Spermatozoïde de souris continuent de se lier à la zone pellucide de souris « humanisée » Þ Spermatozoïde humain ne se lie toujours pas à la zone pellucide des souris « humanisée » Þ
Hypothèses ? ? ? : - Nouvelle protéine ZP 1 identifiée chez l’Homme qui serait nécessaire en plus de ZPB, ZP 2 et ZP 3 bien conservées d’espèce à espèce. => 4 protéines, 2 fixes et 2 spécifiques nécessaires ? ? ? - Structure tridimensionnelle de la zone pellucide ? ? ? - Forme et longueur du spermatozoïde ? ? ?
Conclusion La base moléculaire de la barrière d’espèce est loin d’être bien maîtrisée. De plus, on connaît des exemples d’échappement à cette barrière interspécifique, les hybrides… Des expériences plus poussées doivent être menées pour déterminer les protéines ou domaines protéiques nécessaires à la reconnaissance spermatozoïde-ovocyte.
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