Peroxidase Stain Alkaline phosphate Stain Sudan Black B

Peroxidase Stain Alkaline phosphate Stain Sudan Black B Stain 2 -B반 6조 김선영 이규호 황정인

Peroxidase stain

Peroxidase stain § 검체의 종류 혈액 도말 slide § 시약 및 기구 1. 고정액: 10%formalin-ethanol Formalin 1 part 95%ethanol 9 part 2. 염색시약 O-toluidine Absolute ethanol D. W 250 mg 6 ml 4 ml → 혼합한 후, 3% H 2 O₂20㎕ 를 넣어 세게 혼합하고 filter함

Peroxidase stain 3. Hematoxylin stain sol. 4. Chemical balance 5. Beaker 6. Pipette 7. Automatic pipette & tip 8. Filter paper 9. Forceps 10. Cover slip 11. Slide 걸이 12. 유리용 다이아몬드 연필 13. 스톱워치

Peroxidase stain §결과 *양성: Yellow에서 Brown까지의 색깔을 띈 과립 - 양성 과립구(neutrophil, eosiniphil, basophil) : strong (+) monocyte : neutrophil보다 약한 (+) Auer body Myelocyte - 음성 림프계 적아구계 Myeloblast : 골수아구와 단아구와 같이 아주 미숙한 세포

Peroxidase stain <FDA를 쓰는 peroxidase염색 개량법> §원리 2, 7 -fluorenediamine(FDA)을 반응기질로 하고 H 2 O 2를 가하여 peroxidase를 반응시키면, fluorene blue로 됨 (이 fluorene blue는 다시 중합되어 fluorene brown이 되기도 함)

Peroxidase stain <FDA를 쓰는 peroxidase염색 개량법> 3. 1% safranine O 수용액: 후 염색 4. 3% H 2 O 2 5. 20% aluminum sulfate 수용액

Peroxidase stain Bone marrow smear, Peroxidase stain, x 1000

Peroxidase stain Myeloperoxidase stain

Peroxidase stain Megakaryocyte, blasts, peroxidase stain, M-7 leukemia

Peroxidase stain, acute megakaryocytic leukemia

Peroxidase stain, promyelocytic leukemia

Peroxidase stain, Auer Rod+

Alkaline phosphate stain

Alkaline phosphate stain

Alkaline phosphate stain Neutrophilic alkaline Phosphatase Stain - 4+

Alkaline phosphate stain Neutrophilic alkaline Phosphatase Stain - 2+

Sudan Black B stain

Sudan Black B stain § 시약 및 기구 ① ② ③ ④ ⑤ <시약> working solution sudan black B stock solution ----- 60㎖ buffer solution ----------- 40㎖ wright's stain formal alcohol 70% ethanol D. W <기구> ① 현미경 ② stain jar ③ 스포이드

Sudan Black B stain §과정 ① 공기 건조시킨 혈액도말 표본 또는 골수표본을 formal alcohol로 5분간 고정한다. ② 흐르는 수돗물로 10분간 수세한다. ③ working solution에 표본을 담궈 30분간 염색한다. ④ 70% ethanol로 2～ 3분간 씻는다. ⑤ 2분 동안 수돗물로 수세한다. ⑥ wright stain으로 counter stain한다. ⑦ 검경한다. §결과 - Positive : Auer body, granulocyte - Partical positive : Monocyte - Negative : Lymphocyte, Megakaryocyte, Platelets

Sudan Black B stain

Sudan Black B stain 과립구계 또는 monocyte의 염색 모습

Sudan Black B stain Blasts 안의 Auer rods와 강한 양성 반응을 보이 는 metamyelocytes, 과립구계의 염색 양상

Sudan Black B stain Cytoplasm의 강한 양성 반응의 염색 모습