Peptid hatanyagok Aminosavak alaptulajdonsgok Glicin Cisztein space filling

  • Slides: 24
Download presentation
Peptid hatóanyagok

Peptid hatóanyagok

Aminosavak: alaptulajdonságok Glicin Cisztein (space filling model) Lizin (Fischer projekció)

Aminosavak: alaptulajdonságok Glicin Cisztein (space filling model) Lizin (Fischer projekció)

Proteinalkotó aminosavak: osztályozás

Proteinalkotó aminosavak: osztályozás

Aminosavak: a-zwitter ion és w oldallánc

Aminosavak: a-zwitter ion és w oldallánc

Aminosavak: kiralitás * *

Aminosavak: kiralitás * *

D/L nomenklatura D(+) Glicerinaldehid L(-) Glicerinaldehid Nincs királis centrum Glicin

D/L nomenklatura D(+) Glicerinaldehid L(-) Glicerinaldehid Nincs királis centrum Glicin

Aminosavak: kiralitás Egy királis centrum L-Cisztein Két királis centrum

Aminosavak: kiralitás Egy királis centrum L-Cisztein Két királis centrum

Aminosavak előállítása 1. Fehérjék hidrolízise 2. Kémiai szintézis 3. 3. Rezolválás Kémiai szintézis 1.

Aminosavak előállítása 1. Fehérjék hidrolízise 2. Kémiai szintézis 3. 3. Rezolválás Kémiai szintézis 1. Miller-kisérlet H 2, H 2 O, NH 3, CH 4 elektromos kisülés aminosavak 2. Reduktív aminálás felesleg NH 3 - H 2 O a-ketosav H 2/Pd a-iminosav a-aminosav Példa: 3 -fenil-2 -oxopropánsav (D, L)-Phe NH 4 + (30 %)

3. Aminálás (SN) (1) PBr 3 (2) H 2 O a-bróm-karbonsav . . NH

3. Aminálás (SN) (1) PBr 3 (2) H 2 O a-bróm-karbonsav . . NH 3 (felesleg) a-bróm-karbonsav a-aminosav Példa: 3 -fenilpropánsav (D, L)-Phe NH 4 (30 - 50 %) +

4. Gabriel-féle malonészter szintézis (Met, Asp) * 1) bázis 2) R-X N-ftálimido maleinsav dietilészter

4. Gabriel-féle malonészter szintézis (Met, Asp) * 1) bázis 2) R-X N-ftálimido maleinsav dietilészter H 3 O + D (hidrolízis) D + CO 2 a-aminosav Példa: 1) Na. OEt 2) Cl-CH 2 SCH 3 H 3 O + D (D, L)-metionin * Reagens előállítása a Br 2 a + ftálimid kálium

5. Strecker-szintézis (Ala, Phe) + + H 2 O H 3 O + aldehid

5. Strecker-szintézis (Ala, Phe) + + H 2 O H 3 O + aldehid a-aminonitril 1. lépés: addició a-aminosav . . H+ + 2. lépés: elimináció. . : . . H 2 O + + a-aminonitril 3. lépés: hidrolízis + Példa: NH 4+-OH KCN fenilacetaldehid + a-aminonitril (D, L)-Phe (70%)

Bioszintézis 1. Reduktív aminálás + a-ketoglutársav + H+ + NADH szénhidrát Szénhidrát metabolizmus Enzim

Bioszintézis 1. Reduktív aminálás + a-ketoglutársav + H+ + NADH szénhidrát Szénhidrát metabolizmus Enzim + + L-glutaminsav NAD+

2. Transzaminálás L-Glu + oxálecetsav E* a-ketoglutársav + L-Asp E* = Transzamináz, koenzim =

2. Transzaminálás L-Glu + oxálecetsav E* a-ketoglutársav + L-Asp E* = Transzamináz, koenzim = piridoxál-5 -foszfát

Rezolválás 1. Diasztereomer vegyületpár képzés OHH 2 O + D, L-Ala benzoil-klorid N-benzoilalanin D,

Rezolválás 1. Diasztereomer vegyületpár képzés OHH 2 O + D, L-Ala benzoil-klorid N-benzoilalanin D, L-Ala + HCl N-benzilalanin Brucin/stcrichnin N-benzoil-D-Ala brucin sója „oldhatatlan” H+/H 2 O N-benzoil-D-Ala 1. ) OH-/H 2 O, D 2. ) H+/H 2 O D-Ala N-benzoil-L-Ala brucin sója „oldható” H+/H 2 O N-benzoil-L-Ala 1. ) OH-/H 2 O, D 2. ) H+/H 2 O L-Ala

2. Enzimatikus módszer + (CH 3 CO)2 O D, L-Ala Dezacetiláz enzim N-acetil-D-Ala hidrolizis

2. Enzimatikus módszer + (CH 3 CO)2 O D, L-Ala Dezacetiláz enzim N-acetil-D-Ala hidrolizis D-Ala L-Ala

Aminosavak kimutatása 1. Reakció salétromos savval + + Na. NO 2 salétromossav + +

Aminosavak kimutatása 1. Reakció salétromos savval + + Na. NO 2 salétromossav + + nitrózium ion Primer amin : + + . . : . . . + N-nitrozo amin. . + : . . R+ + N 2 diazónium kation R-NH 2 + Na. NO 2 + HCl : Cl- + 2 H 2 O + Na. Cl

Szekunder amin . . + : N-nitrozo amin Tercier amin . . + N-nitrozo

Szekunder amin . . + : N-nitrozo amin Tercier amin . . + N-nitrozo ammónium ion 2. Sanger reakció 2 4 + 1 -fluor-2, 4 -dinitro benzol (Sanger, F. 1954) Na. HCO 3 + HF 2, 4 -dinitrofenil aminosav (Dnp-aminosav) l=254 nm

3. Ninhidrin reakció ninhidrin aldimin ninhidrin ketimin Ruheman, 1909

3. Ninhidrin reakció ninhidrin aldimin ninhidrin ketimin Ruheman, 1909

4. Reakció 1 -dimetilamino-naftalin-5 -szulfonil kloriddal (Dansyl-klorid, Hartley, 1963) bázis p. H 7, 5

4. Reakció 1 -dimetilamino-naftalin-5 -szulfonil kloriddal (Dansyl-klorid, Hartley, 1963) bázis p. H 7, 5 -8, 0 + H 2 O +HCl (Dansyl-aminosav) l g=360 nm l e=480 nm 5. Reakció fluoreszkaminnal p. H 7 -9 +R-NH 2 fluoreszkamin (nem fluoreszkál) l g=390 nm l e=475 -490 nm fluoreszkamin-addukt H 2 O nem fluoreszkál

5. Spektroszkópia lmax (nm) e (M-1 cm-1 lmax (nm) kvantum hatásfok Phe 257. 4

5. Spektroszkópia lmax (nm) e (M-1 cm-1 lmax (nm) kvantum hatásfok Phe 257. 4 197 282 0. 04 Tyr 274. 6 1420 303 0. 21 Trp 279. 8 5600 348 0. 20 Módszer kromofór Érzékenység (mg/ml szerkezeti hatás A 280 Trp/Tyr 200 -3000 erős A 220 peptid kötés 1 -100 nincs fluoreszcencia Trp 5 -50 erős vizes oldat (p. H 5 -6, ill. p. H 3 (Cys)) Hullámhossz (nm)

Az aminosavak „sorsa”

Az aminosavak „sorsa”