Patoloogialaboris kasutatavad immuunmeetodid anna Beilinson STOM II rhm

Patoloogialaboris kasutatavad immuunmeetodid Žanna Beilinson STOM II rühm I

Immuunohistokeemia § Koe komponentide identifitseerimine antigeen-antikeha reaktsiooni abil § Märklaud-antigeenide ja spetsiifiliste antikehade ühindumine § Nähtavaks muutmine värvaine (kromogeeni/flurofoori) abil

Direktne IHC § Ühesammuline värvimismeetod, mis kasutab ühe märgistatud antikeha, mis reageerib otseselt antigeeniga § Lühike ja kiire, aga ei ole piisavalt tundlik (väike signaali amplifitseerimine) => harva kasutatav

Indirektne IHC § Kaks antikehade kihti § Primaarne antikeha reageerib koe antigeenidega § Sekundaarne antikeha reageerib primaarse antikehaga (märgistatud) § Tundlikum tänu signaali amplifitseerimisele § Indirektne immunofluorestsentsmeetod: märgiseks fluorestsentsvärv § Indirektne immuunoensüümmeetod: märgiseks ensüüm

PAP meetod § Peroksüdaas Anti-Peroksüdaas meetod § Kolmas antikehade kiht § Antikeha peroksüdaasile + peroksüdaas => stabiilne kompleks § Ühindub teise kihiga § 100 -1000 korda tundlikum

ABC meetod § Avidiin-Biotiin Kompleks meetod § Avidiin (glükoproteiin) – suur afiinsus biotiinile § märgistatud nt peroksüdaasiga/fluorestentsvärviga § Biotiin (vitamiin) – saab ühineda antikehadega § Kolm kihti 1. Primaarne antikeha 2. Biotiiniga märgistatud sekundaarne antikeha 3. Avidiin-biotiin peroksüdaas kompleks

LSAB meetod § Märgistatud Strept. Avidiin Biotiin meetod § Streptavidiin asendab avidiini § Sarnaneb ABC meetodile § Avidiin-biotiin peroksüdaas kompleks asendatud ensüüm-streptavidin konjugaatidega § 5 -10 korda tundlikum kui ABC meetod

ABC/LSAB meetod

Kasutatud allikad § https: //www. thermofisher. com/ee/en/home/life-science/proteinbiology/protein-biology-learning-center/protein-biology-resourcelibrary/pierce-protein-methods/overviewimmunohistochemistry. html § Aine „Patoloogiline anatoomia“ materjalid § http: //www. immunohistochemistry. us/what-isimmunohistochemistry/immunohistochemical-methods. html