Ovaryan hiperstimlasyon sendromunda profilaktik D vitamini suplementasyonu Hayvan

Ovaryan hiperstimülasyon sendromunda profilaktik D vitamini suplementasyonu: Hayvan çalışması Guluzar Arzu Turan¹, Fatma Eskicioglu², Oya Nermin Sivrikoz³, Hakan Cengiz⁴ ⁵, Esra Bahar Gur¹, Sumeyra Tatar¹, Nur Sahin¹, Osman Yilmaz⁶ ¹ Department of Obstetrics and Gynecology, Medical School, Sifa University, Izmir, Turkey ² Department of Obstetrics and Gynecology, Medical School , Celal Bayar University, Manisa, Turkey ³ Department of Pathology, Medical School , Sifa University, Izmir, Turkey ⁴ Biostatistics and Medical Informatics, Medical School, Sifa University, Izmir, Turkey ⁵ Molecular Medicine, Institute of Health Science, Dokuz Eylül University, Inciralti, Izmir, Turkey ⁶ Department of Laboratory Animal Science, Medical School, Dokuz Eylul University, Inciralti, Izmir, Turkey

OHSS Vitamin D

Ovaryan hiperstimülasyon sendromu (OHSS) • OHSS ovülasyon indüksiyon tedavisinde kullanılan fertilite ilaçlarına bağlı gelişen iyatrojenik bir hastalıktır. • Overlerin büyümesi ve multiple kistler (foliküler, luteal veya hemorajik) ve stromal ödem • 3. boşluğa (peritoneal, plevral ve nadiren perikardial) akut sıvı geçişi

• < 35 yaş • PCOS • Astenik vücut yapısı Farklılık ?

OHSS fizyopatolojisi • Vasküler endothelial growth factor (VEGF) • Anjiogenezis artışı • Vasküler permeabilite artışı ¹ʼ² 1. Kumar P, Sait SF, Sharma A, Kumar M (2011) Ovarian hyperstimulation syndrome. J Hum Reprod Sci 4: 70– 75 2. Soares SR, Go´mez R, Simo´n C, Garcı´a-Velasco JA, Pellicer A (2008) Targeting the vascular endothelial growth factor system to prevent ovarian hyperstimulation syndrome. Hum Reprod Update 14: 321– 333

• İmmün sistem ¹ʼ²ʼ³ʼ⁴ • İmmunsupressif cytokine IL-10 kanda düşük seviyelerde bulunması, OHSS için yüksek riske işaret eder ⁵. 1. Mathur RS, Jenkins JM, Bansal AS (1997) The possible role of the immune system in the aetiopathogenesis of ovarian hyperstimulation syndrome. Hum Reprod 12: 2629– 2634 2. Orvieto R, Achiron A, Margalit R, Ben-Rafael Z (1998) The role of intravenous immunoglobulin in the prevention of severe ovarian hyperstimulation syndrome. J Assist Reprod Genet 15: 46– 49 3. Fa´bregues F, Balasch J, Manau D, Jime´nez W, Arroyo V, Creus M, Rivera F, Vanrell JA (1998) Haematocrit, leukocyte and platelet counts and the severity of the ovarian hyperstimulation syndrome. Hum Reprod 13: 2406– 2410 4. Kosaka K, Fujiwara H, Yoshioka S, Fujii S (2007) Vascular endothelial growth factor production by circulating immune cells is elevated in ovarian hyperstimulation syndrome. Hum Reprod 22: 1647– 1651 5. Enskog A, Nilsson L, Bra¨nnstro¨m M (2001) Low peripheral blood levels of the immunosuppressive cytokine interleukin 10 (IL-10) at the start of gonadotrophin stimulation indicates increased risk for development of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS). J Reprod Immunol 49: 71– 85

Vitamin D • İn vitro VEGF üretimini azaltır ¹. • Anjiogenezisi VEGF üzerinden azaltır (in vivo ve in vitro) ². • Vasküler permeabilite ve ödemi azaltır ³. • İmmün sistem üzerinde önemli etkilere sahip ve normal fonksiyon için gerekli ⁴. 1. 2. 3. 4. Gruber HE, Hoelscher G, Ingram JA, Chow Y, Loeffler B, Hanley EN Jr (2008) 1, 25(OH)2 -vitamin D 3 inhibits proliferation and decreases production of monocyte chemoattractant protein-1, thrombopoietin, VEGF, and angiogenin by human annulus cells in vitro. Spine (Phila Pa 1976) 33: 755– 765 Mantell DJ, Owens PE, Bundred NJ, Mawer EB, Canfield AE (2000) 1 alpha, 25 -dihydroxyvitamin D(3) inhibits angiogenesis in vitro and in vivo. Circ Res 87: 214– 220 Chen SF, Ruan YJ (1995) 1 alpha, 25 -dihydroxyvitamin D 3 decreases scalding- and platelet-activating factor-induced high vascular permeability and tissue oedema. Pharmacol Toxicol 76: 365– 367 Prietl B, Treiber G, Pieber TR, Amrein K (2013) Vitamin D and immune function. Nutrients 5: 2502– 2521

• anti-Mullerian hormone (AMH) yüksekliği OHSS riski ile ilişkili ¹. • Vitamin D granuloza hücrelerinde AMH m. RNA ekspresyonunu baskılar ². • Vitamin D eksikliği PKOS hastalarında sık rastlanır ³. • PKOS hastalarında Vitamin D seviyesi ile insülin direnci koreledir ⁴ʼ⁵. 1. 2. 3. 4. 5. Ocal P, Sahmay S, Cetin M, Irez T, Guralp O, Cepni I (2011) Serum anti-Mu¨llerian hormone and antral follicle count as predictive markers of OHSS in ART cycles. J Assist Reprod Genet 28: 1197– 1203 Wojtusik J, Johnson PA (2012) Vitamin D regulates anti-Mullerian hormone expression in granulosa cells of the hen. Biol Reprod 86: 91 Rondanelli M 1, Perna S, Faliva M, Monteferrario F, Repaci E, Allieri F (2014) Focus on metabolic and nutritional correlates of polycystic ovary syndrome and update on nutritional management of these critical phenomena. Arch Gynecol Obstet 290(6): 1079– 1092 Li HW, Brereton RE, Anderson RA, Wallace AM, Ho CK (2011) Vitamin D deficiency is common and associated with metabolic risk factors in patients with polycystic ovary syndrome. Metabolism 60: 1475– 1481 Patra SK, Nasrat H, Goswami B, Jain A (2012) Vitamin D as a predictor of insulin resistance in polycystic ovarian syndrome. Diabetes Metab Syndr 6: 146– 14

Vitamin D VEGF Anjiogenezis Vasküler permeabilite İmmün sistem PKOS AMH İnsülin direnci OHSS

Vitamin D takviyesi OHSS şiddetini azaltır mı?

Amaç • Ovaryan hiperstimülasyon sendromu (OHSS) modeli oluşturulan ratlarda D vitamini takviyesinin etkilerini araştırmak.

Yöntem • 28 immatür dişi Wistar rat dört gruba ayrıldı. Grup 1 (kontrol) Grup 2 (over stimülasyonu ) Grup 3 (OHSS grubu) Grup 4 (OHSS + D vitamini grubu)

Tedavi Şeması 1. gün 2. gün Grup 1 3. gün 4. gün 5. gün 6. gün 7. gün Tedavi yok Grup 2 PMSG 10 IU h. CG 10 IU Grup 3 PMSG 10 IU h. CG 30 IU Grup 4 PMSG 10 IU h. CG 30 IU Vitamin D Vitamin D 0. 25 µg/kg SACRIFICE

h. CG uygulamasından 48 saat sonra sakrifikasyon • vasküler geçirgenlik • over ağırlığı • over çapı • vasküler endotelyal growth faktör (VEGF) ekspresyonu (immünohistokimyasal) • serumdaki pigment epitelyal derived faktör (PEDF) düzeyleri (ELISA) • Kruskal-Wallis ve Mann-Whitney U testleri

Pigment epithelium-derived factor (PEDF) • 1989 – human fetal retinal pigment epithelial cell culture. • Neurotropic, neuroprotective, anti-oxidative, anti-thrombogenic and antiangiogenic factor ¹. • VEGF nin aksine antivazopermabilite etki (in vitro, in-vivo) ²ʼ³ʼ⁴. 1. 2. 3. 4. Liu X, Chen HH, Zhang LW (2013) Potential therapeutic effects of pigment epithelium-derived factor for treatment of diabetic retinopathy. Int J Ophthalmol 6: 221– 227 Yamagishi S, Abe R, Jinnouchi Y, Matsui T, Imaizumi T, Inoue H (2007) Pigment epithelium-derived factor inhibits vascular endothelial growth factor-induced vascular hyperpermeability both in vitro and in vivo. J Int Med Res 35: 896– 899 Yamagishi S, Nakamura K, Matsui T, Inagaki Y, Takenaka K, Jinnouchi Y, Yoshida Y, Matsuura T, Narama I, Motomiya Y et al (2006) Pigment epithelium-derived factor inhibits advanced glycation end product-induced retinal vascular hyperpermeability by blocking reactive oxygen species-mediated vascular endothelial growth factor expression. J Biol Chem 281: 20213– 20220 Liu H, Ren JG, Cooper WL, Hawkins CE, Cowan MR, Tong PY (2004) Identification of the antivasopermeability effect of pigment epithelium-derived factor and its active site. Proc Natl Acad Sci USA 101: 6605– 6610

Bulgular Çalşma gruplarının karakteristikleri Group 1, Kontrol; Group 2, Ovaryan Stimülasyon; Group 3, OHSS; Group 4, OHSS+Vit D 3 Grup 1 Grup 2 Grup 3 Grup 4 ilk vücut ağırlığı 30. 8 ± 3. 2 (g) 28. 9 ± 2. 7 31. 4 ± 3. 1 29. 3 ± 2. 7 son vücut ağırlığı (g) 42. 2 ± 4. 8 44. 3 ± 5. 4 46. 5 ± 5. 4 39. 6 ± 5. 8 Delta vücut ağırlığı 11. 4 ± 1. 9 13. 7 ± 2. 5 14. 8 ± 2. 3 10. 8 ± 3. 2 Vascular Permeability (Evans Blue m. M/100 g) 0. 9 ± 0. 3 1. 2 ± 0. 3 1. 8 ± 0. 3 1. 5 ± 0. 5 Over ağırlığı (mg) 19. 6 ± 6. 0 127. 4 ± 17. 3 144. 2 ± 29. 8 125. 2 ± 22. 6 Over çapı (mm) 1. 8 ± 0. 3 6. 6 ± 2. 3 6. 9 ± 1. 4 5. 3 ± 1. 1 VEGF boyanma yüzdesi (%) 6. 0 ± 8. 2 10. 7 ± 0. 4 87. 1 ± 18. 9 85. 0 ± 11. 5 VEGF boyanma şiddeti (0 -3) 0. 6 ± 0. 5 1. 1 ± 0. 4 2. 8 ± 0. 8 2. 9 ± 0. 4 PEDF (pg/ml) 118. 4 ± 60. 6 85. 7 ± 43. 1 40. 6 ± 15. 6 70. 9 ± 20. 0

Immunohistochemical detection of VEGF in rat ovaries, A. group 1 (control); B. group 2 (mild stimulation); C. group 3 (OHSS); D. group 4 (vitamin D)

• VEGF ekspresyonu vitamin D grubunda OHSS grubu ile benzer bulunmuştur. • PEDF düzeyi vitamin D grubunda OHSS grubuna göre anlamlı artmıştır (p = 0. 013).

Sonuç • Profilaktik D vitamini takviyesi OHSS’ yi önlemede yeterince etkili değildir. • OHSS de önemli rolü olan VEGF nin karşıtı etki gösteren PEDF nin artışına neden olmuştur. • Bu çalışmada vitamin D eksikliği modeli oluşturulmadığından; vitamin D nin OHSS üzerindeki etkileri tam aydınlatılamamıştır.

Teşekkürler…