OPERON LAC https youtu beo Bwtxd I 1

OPERON LAC https: //youtu. be/o. Bwtxd. I 1 zvk

OPERON LAC “Operón”: Es una unidad de transcripción: genes estructurales regulados por un promotor y un operador. Ejemplo: Los genes involucrados en el uso de la Lactosa como fuente de carbono, se encuentran agrupados y codifican para enzimas que participan en la misma vía metabólica. (También los genes involucrados en síntesis o degradación de amino ácidos)

OPERON LAC

COMPOSICIÓN. a) Genes estructurales (en tándem). • gen lac Z : β-galactosidasa • el gen lac Y : permeasa del galactósido. • el gen lac A : acetiltransferasa de tiogalactósido. Se transcriben desde un promotor común en un m. RNA policistrónico, al traducirse da lugar a las tres enzimas.

COMPOSICIÓN b) Promotor Sitio donde la RNA polimerasa se une al DNA antes del inicio de la transcripción.

COMPOSICIÓN. c) Operador • Adyacente o traslapado con el promotor, sitio de unión de la proteína conocida como REPRESOR d) Gen Regulador • La expresión de los genes estructurales es controlada por un gen regulador específico (Lac. I), que puede estar cerca o lejos de los genes bajo regulación. El gen regulador codifica para una proteína, el REPRESOR

El REPRESOR Homo tetramero (154 k. Da M, 520 k. Da T) http: //mol-biol 4 masters. grkraj. org/html/Gene_Expression_I 5 A-Lactose_Operon. htm

v En este tipo de operador inducible, el REPRESOR sólo puede unirse al DNA en ausencia de lactosa, la que funciona como un INDUCTOR

CONTROL POSITIVO POR c. AMP. v. La presencia del complejo c. AMP-CAP es necesaria para la transcripción del Operón, aun cuando la lactosa esta presente y el represor esté inactivo.

E. coli en medio mínimo Medio mínimo A 15 min Glu 2% B Lac 2 % C Glu + Lac 2% 7. 5 min D Glu 2 % ½ tiempo + Lac 2 % E Glu + Lac 2%

Procedimiento 1. - Centrifugar a 10, 000 rpm, decantar sobrenadante 2. - Re suspender bacterias en 250 µL de amortiguador Z 3. - Añadir 25 µL de CHCl 3 + 12. 5 µL SDS 0. 1 % 4. - Añadir 50 µL de ONPG, Incubar 2 min. TA 5. - Añadir 125 µL Na 2 CO 3 1 M 6. - Observar color