Odborn vod do problematiky odbr transportu a uchovn

Odborný úvod do problematiky odběrů, transportu a uchování biologického matriálu Mgr. Alena Novotná, Di. S

Biologický materiál • Odběr na základě ordinaci lékaře • Základní intervence nelékařských pracovníků • Biologický materiál = vše pochází z organismu člověka ( tekutiny, sekrety, exkrety, tkáně) • Vždy brát jako infekční !!! • Zkratky pro označení bio materiálu: ü F – stolice ( feces) ü Mk ( nebo Sp) – mozkomíšní mok ( spinal fluid) ü K ( nebo B) – krev ( blood) ü P – plasma ü S – sérum ü U – moč ( urine)

Druhy vyšetření • Biochemické: určuje organické a anorganické látky ( bílkoviny, tuky, cukr, minerály, hormony, léky…) • Mikrobiologické: přítomnost patogenního původce ( bakterie, viry, houby) • Parazitologické: přítomnost parazitů • Sérologické: přítomnost konkrétních protilátek • Morfologické: provádí patologie, povrch vnější části vzorku ( histologie – patologické buňky v tkáni x cytologie – volné buňky)

Druhy vyšetření • Hematologické: vlastnosti krve a její složení ( hematologie, hemokoagulace, imunohematologie)

Fáze odběru bio materiálu 1. Preanalytická fáze – doba před samotným vyšetřením vzorku (ordinace, vyplnění průvodky lékařem, převzetí sestrou, příprava pacienta, pomůcky, uchování vzorku, transport) 2. Analytická fáze – vyšetření vzorku laboratoří, požadavek na rychlost provedení analýzy ( CITIO – rychle, STATIM – ihned, PERICULUM MORTIS – v ohrožení života, STANDARD – do 2 h) 3. Postanalytická fáze – doba interpretace výsledků ( předání patologických, kritických hodnot lékaři, vložení tištěných výsledků do dokumentace pacienta)

Faktory ovlivňující vyšetření • Biologické vlivy: neovlivnitelné – rasa, věk, pohlaví + ovlivnitelné – nalačno, léky, alkohol, fyzická zátěž. . • Odběr materiálu: způsob a kvalita odběru, doba odběru, poloha, infuzní terapie, plasma versus sérum, systém zkumavek, nedodržení předepsaného množství • Transport a skladování: časová prodleva, teplota, mechanické vlivy a skladování vzorků v laboratoři ( krvinky od séra do 2 h, glukóza klesá o 0, 3 -0, 5 mmol/l, bili klesá na světle)

Zásady správného odběru • Zkumavku označit identifikačním štítkem • Vyplnění žádanky : jméno, rodné číslo, pojišťovna, bydliště , diagnóza, druh materiálu, požadované vyšetření, datum a čas odběru, razítko a podpis lékaře, razítko odesílatele, terapie • Bezpečnostní aspekty odběru: ü Před odběrem provést MMR a HDR ü Odběr vždy provádět v RUKAVICÍCH, po sejmutí HDR ü Výměna rukavic mezi jednotlivými pacienty ü Další ochranné pomůcky dle charakteru odběru ( ústenka, štít, plášť)

Odběry moč, stolice • viz. předchozí kapitoly • Zopakovat: ü Zásady odběru moče ( střední proud, odběr z PMK, jednorázové cévkování, suprapubická punkce) ü Druhy vyšetření ( fyzikální, biochemické, mikrobiologické) ü Druhy zkumavek ( sterilní x nesterilní) ü Zásady odběru stolice ( plastový kontejner, Amiesova půda s aktivním uhlím, 3 vzorky u OK)

Odběry a vyšetření krve Venózní ( žilní) krev: nejčastěji, není spojeno s velkými riziky Kapilární: z prstů, z ušních lalůčků ( glykémie, astrup) Arteriální ( tepenná): odebírá lékař, či sestra specialistka Pupečníková Krev srážlivá: vysrážení v odběrové zkumavce s krastenem ( zrníčka zabraňující hemolýze), aktivátor srážení. V laboratoři oddělí krev od plazmy) • Krev nesrážlivá: krev se po odběru smíchá s protisrážlivým činidlem, které zachová krev nesraženou ( tzv. plná krev) K 2 EDTA, K 3 EDTA – tenký film na stěnách zkumavky, nebo etylen diamin, tetracelová sůl, citrát sodný, heparin litný, citrát sodný 3, 8% ! Dodržujeme přesné množství odebrané krve do zkumavky • • •

Odběry venózní krve • Otevřený systém: klasická jehla x luer stříkačka, venopunkce, volně stéká krev přímo do zkumavky, či jemný tah pístu a přímo do stříkačky. Není pro odběr hematologie a koagulace = poškození krevních buněk, zkreslení výsledků vyšetření. • Uzavřený systém: výhodnější, sterilní, pod tlakem, barevné odlišení, odběr přesně stanoveného množství ( SARSTEDT, VACUTAINER MONOVETTA, VACUETTE) • Nádoby na odběr: skleněné, umělohmotné, skleněné kapiláry, kepy, Vacuette - Vacutainer

Zásady pro odběr krve • Načasování odběru: ranní hodina, monitorace farmak ( Anti Xa 3 hod po aplikaci clexanu) • Příprava pacienta: dietní omezení, fyzická aktivita, informovanost • Kontrola vyšetření: bez ordinace sestra nesmí odebrat • Příprava pomůcek na tác: jehla, zkumavky, turniket, antiseptikum na kůži, sterilní čtverečky, rukavice, náplast, 2 emitní misky, podložka k ochraně oděvu pacienta • Ověření dodržených zásad pacientem • Poloha při odběru , nejlépe v sedě ( koncentrace látek v plazmě pak o 20% vyšší)

Zásady pro odběr krve • Výběr místa vpichu: nejčastěji povrchové žíly HK, bez hematomů, jizev, zavedených kanyl, strana po mastektomii, parézy či plegie. ( viz. cvičení) • Řádná identifikace pacienta i zkumavek • Zatažení paže: již po 1 min zvýšení koncentrace látek o 10% ( bílkovina) a o 20% dochází ke kumulaci laktátu a kália. Vhodné hned po napíchnutí uvolnit, zatahovat max. na 2 min. Nevhodné je dlouhé pumpování, či , , plácání, , končetiny. • Dezinfekce kůže: nutné, pozor na alergie, nanést nebo nastříkat, nechat zaschnout ( cca 15 s), již nepalpovat žílu!!! Při odběru na alkohol použít dezinfekci bezalkoholovou. • Venopunkce: zavedení jehly do žíly, dostatečný průsvit jehly, jehlu vedeme pod úhlem 30◦ , po té snižujeme a zasuneme cca 1 -2 cm, při odběru Vacutainerem se na držák nasune zkumavka, krev se sama nasává.

Zásady pro odběr krve • Pořadí odběrových zkumavek: 1. Odběr hemokultury ( probereme samostatně) 2. Zkumavky bez protisrážlivých prostředků – biochemie ( žlutá) 3. Zkumavky s protisrážlivým prostředkem – koagulace ( modrá), krevní obraz ( fialová), sedimentace ( úzká černá) • Ukončení odběru, ošetření pacienta: poslední zkumavka, vyjmutí jehly ze žíly, přiložení sterilního tamponu na místo vpichu, bez vytvoření tlaku, pacient drží cca 60 sek, ruku neohýbat, zalepit na 15 min. Kontrolujte celkový stav – kolaps z pohledu na krev.

Hematologické vyšetření krve • Krevní obraz, promíchat, netřepat • Referenční meze se mohou lišit dle laboratoří

Hematologické vyšetření krve • APTT : aktivovaný parciální tromboplastinový čas, odběr 4, 5 ml krve + 0, 5 ml citrátu, promíchat, monitorace léčby heparinem, fyzio 35 – 45 sek. • Quickův čas : monitorace léčby Walfarinem. Fyzio 13 – 15 sek • INR : international normalized ratio, 0, 8 – 1, 2

Hematologické vyšetření krve • sedimentace erytrocytů: zkratka FW, nalačno, bez fyzické námahy, při zánětlivých infekčních chorobách, při léčbě ATB. Odběr 1, 6 ml krve, sedimentační stojan ve svislé poloze, odečítání za 1 a 2 hodiny, ženy 8/12 – muži 5/8. • Fbg : Fibrinogen, koagulační faktor I, koncentrace ↑ při zánětu a poškození tkání, 2 – 4 g/l • Krevní skupina + Rh faktor: určení skupiny, otcovství, odběr se posílá na transfuzní oddělení

Biochemické vyšetření krve • Ionty: stanovení koncentrace elektrolytů v krvi ü Na – sodík, rovnováhu zajišťují ledviny a nadledvinky, ukazatel vnitřního prostředí ü K – draslík, vliv na nervosvalovou dráždivost, ukazatel vnitřního prostředí a vliv na srdeční činnost ü Cl – chlor, vnitřní prostředí ü Ca – vápník, důležitý pro tvorbu kostí, mateřského mléka a hemokoagulační pochody, spolu s fosforem ovlivňuje svalovou dráždivost, ve všech buňkách – nejvíc v játrech, resorbce v tenkém střevě ü Fe – železo, důležité pro krvetvorbu, nedostatek je u chronického onemocnění jater, nedostatek v potravě a špatná resorpce

Biochemické vyšetření krve ü Resorpční křivka Fe – vyšetření hladiny plazmatického Fe po zátěži, nalačno po použití tablety Feronatu Fyziologické hodnoty: Natrium 130 – 150 mmol/l Kalium 3, 5 – 5, 1 mol/l Calcium 2, 00 – 2, 75 mmol/l Fosfor 0, 7 – 1, 5 mmol/l železo Žena 10 – 24 umol/l Muž 12 – 27 umol/l

Biochemické vyšetření krve • Metabolity ü Urea – močovina, konečný produkt metabolizmu bílkovin, vylučuje se ledvinami, zvýšení u postižení ledvin, katabolismu. Snížení u poklesu resorpce střev, těžkých jaterních oneocnění ü Kreatinin – konečný metabolit svalového kreatinu, zásobárna energie a nebílkovinného dusíku, odráží funkci ledvin, zvýšeno u postižení svalstva ü Kyselina močová – zvýšeno při poklesu renálních funkcí a dně ü Bilirubin – žlučové barvivo

Biochemické vyšetření krve urea 2, 5 – 7, 5 mol/l krea Žena 70 – 110 umol/l Muž 60 – 100 umol/l Kys. močová 160 - 380 umol/l bilirubin 3, 4 – 17, 1 umol/l

Biochemické vyšetření krve • Bílkoviny - Při odběru nezatahujeme končetinu ani nepumpujeme, 5 – 7 ml srážlivé krve ü Celková bílkovina – informuje o hydrataci, výživy, onemocnění jater, ledvin či imunity. ü Albumin – udržuje onkotický tlak, syntéza v játreh ü CRP – c reaktivní protein, zvýšené u IM, zánětlivých, revmatických a nádorových onemocnění. ü Imunoglobuliny – k posouzení stavu imunity ( Ig G A M E) ü ELFO – elektroforéza bílkovin, kvantitativní posouzení bílkovinného spektra. Zvýšeno při zánětech, onemocnění jater a alergických stavů. ü Myoglobin – zvýšení u IM, poranění stavů ü Troponin – Zvýšení u IM, vzestup je 2 h po myokardiální lézy

Biochemické vyšetření krve Celková bílkovina Ženy do 4 mg/l Muži do 5, 8 mg/l CRP ↓ 6 g/l albumin 35 – 53 mg/l

Biochemické vyšetření krve • Enzymy, JT – vázány na jaterní nebo srdeční buňku, 5 – 7 ml srážlivé krve, ukazatelé jaterního poškození ü ALT – alaninaminotransferáza, obsažené v jaterní tkáni, ↑ při jaterních onemocnění ü AST – aspartátaminotransferáza, ↑onemocnění jater, 6 -12 h po IM ü GGT – gamaglutamiltransferáza, ↑chronické užívání alkoholu, nádory jater a pankreatu ü ALP – alkalická fosfatáza, přijímáno jaterním parenchymem, vylučován žlučí do střeva, ↑ v případě obstrukce žlučových cest

Biochemické vyšetření krve ü LD – laktátdehydrogenáza, přítomna v tkáních jater, srdce, svalů, stanovení se užívá jako nespecifický ukazatel rozpadu buněk např. u nádorových onemocnění ü AMS – pankreatická amyláza, produkuje slinivka, štěpí škroby na jednoduché cukry, vyskytuje se i v moči, ↑při zánětech pankreatu ALT Ženy do 0, 60 ukat/l Muži do 0, 80 ukat/l AST Ženy do 0, 60 ukat/l Muži do 0, 85 ukat/l GGT Ženy 0, 14 – 0, 68 ukat/l Muži 0, 14 – 0, 84 ukat/l ALP 0, 66 – 2, 2 ukat/l LD 2, 25 – 3, 75 ukat/l AMS 0, 22 – 0, 88 ukat/l

Biochemické vyšetření krve • Lipidy – hladina mastných kyselin, 12 h nejíst ü Cholesterol – celkový, tvorba hormonů a vit. D, pomáhá vstřebávat tuky, ↑ aterosklerosa ü HDL – high density lipoproteins, hodný, rostlinné tuky ü LDL – low , usazuje se v cévách, nasycené tuky Celkový chol 3, 1 – 5, 2 mmol/l HDL Ženy 1, 3 – 2, 3 mmol/l Muži 1, 1 – 2, 1 mmol/l LDL Ženy 2, 2 - 4, 5 mmol/l Muži 2, 2 – 4, 3 mmol/l

Biochemické vyšetření krve • Glukóza – ukazatelé funkce pankreatu, dg. DM ü Glykémie – koncentrace glykémie v krvi, závislé na potravě 3, 6 – 6, 0 mol/l ü OGTT – orální glukózo toleranční test, hladina gly po zátěži glukózou, vyšetření k rozlišení poruchy tolerance a již vzniklého DM II. Odběr krve nalačno, vypít 75 g glukózy a odběr za 1 h, za 2 h ( 3 zkumavky)6, 9 / 8 -11 mmol/l / nad DM ll ü Glykovaný hemoglobin – navázání glukózy na Hb, průkaz 4 – 6 týdnů, 2, 8 – 4, 0%

Biochemické vyšetření krve • Hormony a tumorové markery ü T 3 – trijodtyronin, produkovaný štítnicí, vyskytuje se vázaný na bílkoviny plazmy a volně (f. T 3), ↓hyper ↑hypo, celkový 0, 9 – 3, 0 mmol/l, vázaný 3, 4 – 6, 4 pmol/l ü T 4 – tyroxin, poruchy sekrece štítné žlázy, 60 – 150 mmol/l, vázaný 9, 8 – 23, 1 pmol/l ü TSH – tyreostimulační hormon, produkován adenohypofýzou, ovlivňuje činnost št. žlázy, 0, 37 – 5, 0 U/l ü Kortisol – ke stanovení hladiny glukokortikoidů, hladina se mění během dne, zvyšuje pohotovost organismu, změny při nádorech nadledvin, Cushingova sy, ráno 118 – 618 mmol/l, odpoledne 85 – 460 mmol/l

Biochemické vyšetření krve ü FSH – pro vývoj folikulu a spermií, ↑při selhání pohlavních žláz, zohlednit věk pacienta, ve stáří je vyšší, ženy 1, 5 – 33, 4 U/l, muži 1, 4 – 18, 1 U/l ü HCG – choriongonadotropin, vytvářen embryem, těhotenský hormon 7 -9 den, nebo při rakovině pohl. orgánů. Marker 0 – 10 U/l, těhotenství 10 – 60 tis a více U/l

Biochemické vyšetření krve • Léky – monitorace léčby • Alkohol – stanovení etanolu v krvi, nepoužívat alkoholovou dezinfekci

Mikrobiologická vyšetření krve odběr 5 – 10 ml srážlivé krve • Hemokultivace – vypěstování mikrobů z krve na živné půdě, odběr do speciálních hemokultivačních lahviček, odebírá se u pacientů s TT nad 38 st. C, dodržení zásad asepse ( konkrétně při cvičeních) video: http: //www. lf 3. cuni. cz/mikrobiologie/film/hemokultura. wmv • BWR – sérologická zkouška na přítomnost sifilisu • WR – přítomnost břišního tyfu • ASLO- diagnostika streptokokových infekcí • Anti HIV – průkaz protilátek, pacient musí souhlasit • HBs. Ag – v séru nakažených osob nebo po prodělání hepatitidy B se prokazuje antigen, nebo protilátku

Odběr kapilární krve • Glykémie: u pacientů s DM, monitorace glukózy v krvi, nezbytné před každým jídlem, provádí biochemická laboratoř, nebo přímo do glukometru na oddělení ( POCT – point of care testing přístrojem ACUCHECK) + diagnostické proužky, pacient 10 min v klidu, při pohybu spotřeba glukózy jako zdroje energie, odběr v závislosti na jídle, identifikace pacienta, výběr místa odběru ( prsteníček, prostředníček, ukazováček), dezinfekce místa vpichu, jehly pro vpich ( subkutánní jehly, lancety, pera), otření první kapky, vymačkání kapky z prstu působením komprese celé dlaně, přiložení přístroje. • 3, 6 – 6, 6 mmol/l

Pomůcky k odběru glykémie

Odběr kapilární krve • Astrup: krevní plyny, (vyšetření acidobazické rovnováhy krve a tekutin, kyselost a zásaditost tekutin a krve vyjadřuje p. H ( koncentrace vodíkových iontů), kyseliny uvolňují vodíkové ionty = ↓p. H, zásady přijímají vodíkové ionty = ↑p. H, odchylky vyrovnávají nárazníkové systémy: bikarbonátový: kyselina uhličitá, kysličník uhličitý, standardní bikarbonáty v parciálním tlaku CO 2)- správně funguje při normálním dýchání a normální funkci ledvin. Nebikarbonátový: hemoglobin a oxyhemoglobin, organické a neorganické fosfáty, krevní bílkoviny. • Saturace O 2 95 – 99% nasycení hemoglobinu kyslíkem

Fyziologické hodnoty ABR veličina Fyziol. hodnoty poznámky p. H 7, 4 + - 0, 04 Koncentrace vodíkových iontů p. CO 2 5, 3 + - 0, 8 k. Pa Parciální tlak v alveolárním vzduchu p. O 2 12, 0 + - 1, 3 k. Pa - II- Standardní HCO 3 aktuální 24 +- 2 mmol/l Standardní hydrogenkarbonáty v 1 l krve O 2 při 37 st a fyz. p. CO 2 NBB 48 + - 2 mol/l Normal buffer base – součet všech nárazníkových zásad v 1 l krve při 37 st a při fyzio p. CO 2

Odběr kapilární krve • Odběr krve na krvácivost: Dukeova metoda, doba potřebná k zastavení krvácení, kožní vpich do ušního lalůčku, 30 vteřin se odsaje do filtračního papírku ( 2 -5 min u zdravého zástava)7 • Odběr na fenylketonurii (PKU): všichni novorozenci mezi 72 – 96 hodinami po narození, mimo standardní vyplnění žádanky se doplňuje porodní hmotnost dítěte. • Odběr krve na hypothyreózu: dtto

Odběr arteriální krve • Provádí lékař, sestra – záchranář asistuje, speciální odběrové soupravy, nejčastěji a. femoralis, a. radialis, místo vpichu sterilně krýt, komprese, časný transport do laboratoře. Odběr pupečníkové krve • Po narození dítěte, přes pupečník před porodem placenty, průměrně 90 ml.

Zásady odběru bio materiálu na bakteriologii • Str. 119 – pročíst tabulku • Horní a dolní cesty dýchací, výtěry ucho – oko – pohlavní ústrojí – ureter – chorobné ložiska a rány • Vatové tampony, tampony na drátku s živnou půdou, dotyk jen daného cíle • Sputum – sekret průdušek, vykašlání do malého kontejneru, na lačno, před hygienou DÚ, nebo 2 -3 h po jídle • Mozkomíšní mok – aseptická lumbální punkce, min. 1 ml do sterilní zkumavky volně odkapává, tmavé místo, pokojová teplota • Helicobakter pylori – bioptický materiál, do sterilní zkumavky s médiem, do 2 h ke zpracování

Přeprava materiálu • • • Dle zdrav. zařízení Potrubní pošta Termo boxy Kdy, kdo…. Diskuze – zeptejte se…. .