NORTHERN BLOT 201421012 201421013 201421014 1 agarose gel

NORTHERN BLOT 201421012 이소의 201421013 이상은 201421014 이한솔

1. agarose gel의 제작(1% agarose, 1 x MOPS, 2. 2 mol/l formaldehyde) 2. RNA sample의 조제(RT-PCR RNA 준비과정과 동일 ) 3. 전기영동(UV 조사) - 100 - 120 V, 2 - 3시간(2 - 3분간) 4. gel을 꺼내고 10 x SSC에 담근다 - 20분 - 1시간 (Na. Cl, sodium citrate) 5. transfer - 하룻밤 overnight 6. 건열 처리 - 80℃, 30분 - 2시간 7. prehybridization - 42℃, 2 - 3시 간 8. hybridization - 42℃, 하룻밤 overnight 9. 세 정 - 1 x SSC, 0. 1% SDS, 실 온, 20분간 1회 0. 2 x SSC, 0. 1% SDS, 68℃, 20분간 3회 10. autoradiography