Mtodos Imunolgicos que utilizam reagentes no marcados Precipitao

Métodos Imunológicos que utilizam reagentes não marcados

Precipitação 1897 Rudolf Kraus 1868 -1932

Precipitação Quantitativa 1935 Michael Heidelberger 1888 -1991

Curva de Heidelberger Precipitado Formado Anticorpo livre Antígeno livre - + Zona de excesso Ac equivalência Ag Quantidade de antígeno adicionado

Imunodifusão Pode ser utilizada para a detecção e quantificação de antígenos ou anticorpos. É baseada na difusão de uma molécula de Ac ou Ag em uma base de ágar, com formação de um precipitado.

Imunodifusão dupla

Resposta: amostra contém anti 1 Ag 1 + Ag 3 Ag 1 amostra

Resposta: Anticorpos anti-1, anti -2 e anti-4 Ag 2 + Ag 4 Ag 1 amostra

Imunodifusão radial

Imunodifusão radial O tamanho do halo formado é diretamente proporcional à quantidade de Ag ou Ac na amostra.

Aglutinação Agrupamento de partículas 1897 Max Von Gruber Georges Fernand Isidore Widal 1853 -1927 1862 -1929

Aglutinação – classificação • Aglutinação Direta Ø Observa-se a aglutinação das hemácias Exemplo: tipagem sanguínea ABO e Rh • Aglutinação Indireta Ø Observa-se a aglutinação de partículas tratadas com antígenos ou anticorpos Exemplo: partículas de látex revestidas de anticorpos anti-rotavírus

negativo positivo

Teste para sífilis - RPR negativo positivo

Rapid Test Reagin - RPR

Hemaglutinação

Como Ocorre?

Hemaglutinação Direta Negativo Positivo

Teste de inibição da Hemaglutinação Direta Negativo Positivo

Teste de inibição da Hemaglutinação Direta

Hemaglutinação Indireta Negativo Positivo

Teste de Hemaglutinação Indireta • Trypanosoma cruzi • Treponema pallidum • Toxoplasma gondii

Qualitativo

Quantitativo 1: 8 Título = 32 UI/m. L 1: 2 Vírus 1: 2 Diluição Seriada 8 Mistura com hemácias Visão Lateral Visão de cima 16 32 64 128 256

1 2 3 4 5 6 7 8 Neg. Pos. 1/1024 1/512 1/256 1/128 1/64 1/32 1/16 1/8 1/4 Paciente 1/2 Hemaglutinação Passiva ou indireta “Quantitativo” Título UI/m. L 64 8 512 <02 32 > 1024 32 04

Hemaglutinação Passiva ou Indireta