Mningites bactriennes aigus communautaires Examens microbiologiques Prlvements LCR

Méningites bactériennes aiguës communautaires Examens microbiologiques Prélèvements LCR, hémoculture, serum, urine, biopsie cutanée LCR Ponction lombaire aseptique : 3 tubes (0. 5 -1 ml/tube) Renseignements cliniques, transport sans délai au labo à l’abri du froid Aspect : purulent, trouble : méningite bactérienne clair : méningite au début, virus, Listeria, BK, abcès cérébral Chimie : protéines (< 0. 4 g/l), glucose (LCR/sang > 60%) Examen direct : Numération leucocytes, May-Grunwald-Giemsa (MGG), Gram

Examen direct Numération des leucocytes (< 5/mm 3, méningite 500 - >1000/mm 3) Cytospin centrifugation : colorations MGG et Gram MGG : Formule leucocytaire >50% neutrophiles : méningite bactérienne (entérovirus) >50% lymphocytes : virus, Listeria, BK 50% neutro/50% lympho : début, traitement, Listeria, abcès Gram : Spécificité ~ 100% Sensibilité 54 -78% (sans traitement). Seuil : 105 UFC/ml cocci Gram+ : pneumocoque (strepto B, strepto A) cocci Gram– : méningocoque bacille Gram– : Haemophilus (E. coli) bacille Gram+ : Listeria 2

LCR, Aspect trouble clair Eléments nucléés/mm 3 > 10 500 - >1000 > 10 Type d’éléments > 50% poly. neutro. > 0. 4 g/l > 50% lymphocytes > 0. 4 g/l 50% polyneutro. 50% lympho. < 0. 4 g/l Protéines Glucose LCR/sang Orientation < 40% Méningite bactérienne (entérovirus) REMIC < 40% > 60% (sauf virus) Virus (gluc~) Début méningite Listeria (gluc↓) Listeria BK (chlor↓) Abcès cérébral 3

Antigènes solubles Examen direct positif (MGG ± Gram) Antibiothérapie (et PL de contrôle) LCR, urine, serum Pneumocoque : test immunochromatographique Binax Now® (polysaccharide C) Spécificité et Sensibilité ~ 100% Méningocoque : polyosides capsulaires → sérogroupes Latex agglutinants (Test immunochromatographique) sensibilité : 37% → 74% (ultrasons) spécificité : réactions croisées +++ (groupe B / E. coli K 1) Latex : Haemophilus influenzae : rare (sérotype b : 15%) Streptocoque groupe B et E. coli K 1 (enfant < 12 mois) 4

Cultures - PCR Cultures Géloses au sang, chocolat, 37°C, 5 -10% CO 2 Observation quotidienne pendant 5 jours Antibiogramme si Direct (Gram) + / CMI (cocci Gram+ et Binax®+) (conserver 0. 5 ml de LCR → PCR si culture négative en 24 h) Hémoculture (40 - >70%) PCR - PCR enterovirus - PCR spécifiques: méningocoque, pneumocoque Haemophilus, Listeria PCR Méningocoque (espèce et groupes, LCR et serum) (gène crg. A : sensibilité 90%, spécificité 93%) - PCR en temps réel (quantification) - PCR universelle (gène ARNr 16 S) sensibilité 59%, spécificité 97% 5

Positivité Méningocoque Pneumocoque Gram+ LCR 68% 93% Culture+ LCR 73% 95% Hémoculture+ 41% 77% 1170 312 (27%) 130 (41%) 69 (22%) 65 (21%) 22 (7%) 709 46 (6. 5%) 11 (24%) 24 (52%) 8 (17%) 3 (6. 5%) 1879 méningites Culture LCR négative PCR+ Ag+ Hémo+/LCR>10 élts Gram+ ACTIV 6

Positivité Strepto B E. coli H. influenzae Gram+LCR 88% 85% 73% Culture+LCR 93% 92% 100% Hémoculture+ 81% 77% 73% Méningites LCR culture nég PCR+ Ag+ 347 30 3 17 7 2 147 15 / 2 9 1 70 0 / / Hém+/LCR>10él. Gram+ ACTIV 7

1 er jour : LCR (3 tubes) Dosages chimiques et Culture Ex direct (Gram) négatif Ag - PCR (méningo)/clinique Ex direct (Gram) positif Cocci Gram+, Ag + → Pneumocoque probable Test oxacilline, CMI Antibiogramme Cocci Gram-, Ag ± → Méningocoque probable LCR et sang → CNR : PCR Antibiogramme 8

2ème jour : Cultures Culture négative LCR conservé → PCR (PCR ciblées / universelle) Culture positive Pneumocoque CMI pénicilline, amoxicilline, céfotaxime/ceftriaxone Antibiogramme isolat → CNR : sérotypie Méningocoque Sérogroupage, CMI pénicilline Antibiogramme (rifampicine, ciprofloxacine, ceftriaxone) isolat → CNR : séro-génotypie 9

Conclusion Méningites à culture négative ( 30%) fragilité bactérienne (méningocoque) délai de transport traitement antibiotique précoce PCR (spécificité et sensibilité +++) 2008 Nombreux moyens à combiner pour le diagnostic La culture reste la référence 10