Mikrobioloka laboratorijska dijagnostika Campylobacter spp MARIJAN MATEJI UVOD
Mikrobiološka laboratorijska dijagnostika Campylobacter spp. MARIJAN MATEJČIĆ
UVOD U rodu Campylobacter najčešće vrste koje stvaraju probleme kod čovjeka su C. jejuni, C. coli, C. upsaliensis, C. lari i C. fetus koji uzrokuju probavne i sustavne infekcije u čovjeka. Riječ je o sitnim, zavinutim, gram negativnim štapićima, sa termofilnim i mikroaerofilnim zahtjevima za rast i razmnožavanje. Čimbenici virulencije crijevnih Kampilobaktera jesu flagele i PEB 1 – antigen koji ostvaruje adherenciju Kampilobaktera na stanice mukoze tankog crijeva. Uzrokuje akutni enteritis, diareu, vrućicu s izraženom abdominalnom boli, liječenje je simtomatsko do oporavka pacijenata što zna trajati i do 4 tjedna a u slučaju težih slučajeva daje se antibiotska potporna terapija. Do zaraze dolazi uglavnom konzumacijom termički nedovoljno obrađenog mesa i mliječnih proizvoda.
Campylobacter spp. MARIJAN MATEJČIĆ
LABORATORIJSKA DIJAGNOSTIKA Najčešći uzorak za laboratorijsku analizu je feces (primarno nesterilan uzorak) ako je zahvaćen probavni sustav, a ukoliko je zahvaćen neki drugi sustav uzorak ovisi o sustavu koji je zaražen. Kultivacija iz stolice za koju pretpostavljamo da sadrži Kampilobakter provodi se na selektivnim hranjivim podlogama (po Skirrowu, Boltonu i sl. ) u mikroaerofilnim uvjetima pri temperaturi od 42 ⁰C tijekom 48 sati. Nakon inkubacije, razlivene, izgledom staklaste kolonije, pikiramo ezom i napravimo obojeni mikroskopski preparat po Gram-u. Kod roda Kampilobakter test oksidaze je pozitivan te se testom razlaganja hipurne kiseline razliku vrste C. jejuni (koji posjeduje enzim hipurazu) i C. coli koja ju ne razgrađuje. Primarno sterilni uzorci (krv, likvor, punktati) nasađuju se na standardne obogaćene hranjive podloge poput krvnog agra. Pri sumnji na infekciju sa C. Campylobacter spp. fetus uzorak inkubiramo na 37 ⁰C. Serološka se dijagnostika u rutini ne primjenjuje. U nekim laboratorijima (u MARIJAN razvijenijim zemljama) se. MATEJČIĆ primjenjuje Molekularna dijagnostika m. DNA postupkom.
Razlivene, staklaste kolonije nakon 48 satnog uzgoja na 42 ⁰C Campylobacter spp. MARIJAN MATEJČIĆ
Campylobacter spp. MARIJAN MATEJČIĆ
Test razgradnje hipurne kiseline vfdvdcv Campylobacter spp. MARIJAN MATEJČIĆ Pozitivan Negativan
Ponavljanje (odgovori na sljedeća pitanja): 1. Koji su glavni čimbenici virulencije Campilobacter spp. ? 2. Koji je najčešći uzorak za analizu Kampilobaktera? 3. Zašto se najčešći uzorak nasađuje na selektivne hranjive podloge? 4. Osim C. fetus ostale vrste roda se inkubiraju na kojoj temperaturi kroz koji vremenski period? 5. Testom razgradnje hipurne kiseline razlikujemo koje dvije vrste iz roda Kampilobakter? Campylobacter spp. MARIJAN MATEJČIĆ
- Slides: 8