MICROSCOPA MICROSCOPA Oculares Revolver Objetivos Platina Condensador Cabeza

MICROSCOPÍA

MICROSCOPÍA Oculares Revolver Objetivos Platina Condensador Cabeza Brazo Pinza Macrométrico Micrométrico Lámpara Base Desplazador de la platina

MICROSCOPÍA Tamaño total del aumento de la imagen: es el tamaño que resulta de multiplicar las X del objetivo por las X del ocular. Ej. Objetivo de 25 X / Ocular de 10 X = 250 X Objetivo de 40 X / Ocular de 10 X = 400 X Poder de resolución: es la medida de la capacidad del microscopio para separar claramente dos puntos que se encuentran muy juntos, es decir, es la capacidad de resolver detalles. El poder de resolución de un microscopio óptico es de alrededor de 0. 25 micras.

$MICROSCOPÍA Índice de refracción: es la velocidad a la que es atravesado un objeto$

MICROSCOPÍA Índice de refracción: es la velocidad a la que es atravesado un objeto por una onda luminosa, es una medida de la densidad óptica de un objeto. Refracción simple o Isotropía: se da cuando una muestra, al ser atravesada por un rayo luminoso, dispersa la luz a la misma velocidad en todas las direcciones, es decir, que su índice de refracción es el mismo en cualquier dirección. Ej. El agua, el cristal, y muchos tejidos. Birrefringencia o Anisotropía: se da cuando una muestra, al ser atravesada por un rayo luminoso, no dispersa la luz a la misma velocidad en todas las direcciones, es decir, su índice de refracción no es el mismo en cualquier dirección. Estas estructuras se verán oscuras al microscopio óptico. Ej. Fibras musculares, algunas fibras del tejido conectivo y gotitas de lípidos intracelulares.

MICROSCOPÍA De luz visible Óptico De polarización De contraste de fase De campo oscuro Luz invisible Luz ultravioleta Electrónico: Electrónico de transmisión Electrónico de centelleo

MICROSCOPÍA

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Son los diversos métodos o maneras de preparar los tejidos para su estudio al microscopio, de modo que preserven sus características lo más parecidas posible a su estado natural.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Tejidos vivos Vital Supravital Tejidos muertos

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Obtención de la muestra Fijación Deshidratación y aclaramiento Inclusión o embebimiento Corte Tinción Montaje

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Consiste en tomar la muestra de tejido del animal o individuo. Muestra: Porción de tejido que se va a estudiar. Las principales fuentes de obtención de muestras son: Biopsias Procedimientos quirúrgicos Autopsias

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Consiste en tratar la muestra con sustancias químicas, llamadas fijadores, para evitar la autólisis y mantener el tejido con la menor alteración post morten posible.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Fijadores SIMPLES Formalina Alcohol Ácido Acético Ácido Ósmico Ácido Pícrico Bicromato de Potasio Bicloruro de Mercurio COMPUESTOS Líquido de Bouin 1. Formalina 2. Ácido Acético 3. Ácido Pícrico Líquido de Zenker 1. Formalina 2. Bicloruro de Mercurio 3. Bicromato de Potasio

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Deshidratación: tiene como finalidad eliminar toda el agua del tejido pasándolo por baños de grados crecientes de alcohol etílico, que van desde el 50% hasta el 100%. Aclaramiento: consiste en tratar el tejido con una sustancia que elimine el exceso de alcohol y se mezcle con el medio de inclusión.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Deshidratante Alcohol en grados crecientes Aclaradores Xilol Benceno Cloroformo Aceite de Cedro Tolueno

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Es infiltrar la muestra de tejido en una sustancia que le proporcione un soporte firme para facilitar el corte del tejido en porciones muy delgadas.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Medios de Inclusión Parafina Celoidina

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Consiste en seccionar la muestra en rebanadas muy delgadas para que puedan ser atravesadas por la luz y vistas al microscopio. Para esto se usa el Micrótomo con el cual se obtienen cortes de 3 a 10 micras de espesor.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Micrótomo

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Consiste en teñir los diversos componentes celulares y tisulares de la muestra para destacar su contraste natural.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Consiste en colocar el corte delgado de la muestra en un portaobjeto; se le añade una gota de medio de montaje y se cubre con un cubreobjeto. Luego se deja secar para su posterior observación y preservación por largo tiempo.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Medio de montaje Bálsamo de Canadá

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Se usan las mismas técnicas histológicas pero con modificaciones, como por ejemplo: • Cortes más finos, pequeños y frescos ya que los cambios postmorten son más evidentes. • Se sustituye la parafina por plástico como Epon y Araldita. • Se usan colorantes más pesados.

$TÉCNICAS HISTOLÓGICAS En esta técnica, el tejido se congela y se fractura con un$

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS En esta técnica, el tejido se congela y se fractura con un instrumento de corte, se mantiene al vacio y se calienta brevemente para gravar la superficie de corte en un material pesado y esta silueta se observa en el microscopio de transmisión o de centelleo.

ARTEFACTOS

ARTEFACTOS Pliegues y arrugas Encogimientos Precipitados Desprendimientos Mella en la cuchilla Manejo poco cuidadoso Degeneración post mortem

ARTEFACTOS

COLORANTES

COLORANTES Son sustancias químicas que pueden conferir color a los cuerpos. En histología, los colorantes son sales neutras que tienen radicales tanto ácidos como básicos, por lo que pueden ser ácidos, básicos y neutros.

COLORANTES Son sales neutras cuya propiedad colorante está en el radical ácido. Tienen carga negativa. Tiñen las estructuras de rojo o rosado y estas estructuras son llamadas acidófilas, aunque son básicas en sí mismas. Ej. El citoplasma. Son colorantes ácidos: Eosina, el Ácido Pícrico, Rojo de Trípano, etc.

COLORANTES Son sales neutras cuya propiedad colorante está en el radical básico. Tienen carga positiva. Tiñen las estructuras de azul o morado y estas estructuras son llamadas basófilas, aunque son ácidas en sí mismas. Ej. El núcleo. Son colorantes básicos: Hematoxilina, colorantes básicos de las anilinas, etc.

COLORANTES Sales cuya propiedad colorante está tanto en el radical ácido como en el básico por lo que tienen tanto carga negativa como positiva, y tiñen las estructuras tanto ácidas como básicas. Ej. El rojo neutro.

COLORANTES Según los componentes que tiñen Generales Tiñen todos los elementos Específicos Tiñen componentes particulares

COLORANTES Por el radical colorante Básicos Ácidos Neutros Por el color que transmite Ortocromáticos Metacromáticos Inocuos Vitales Supravitales

COLORANTES Hematoxilina y Eosina Tricrómico de Mallory-Azan Plata Tricrómico de Masson PAS Azul de toluidina

COLORANTES Mitocondrias Aparato de Golgi Células adiposas Neurofibrillas Cuerpos de Nissl Lámina basal Sangre Glucógeno Proteoglucanos Moco ADN Fibras elásticas Fibras reticulares Fibras colágenas Verde Janus. Sales de plata y Ácido Ósmico. Colorantes de Sudán. Sales de plata, oro y Azul de Metileno. Azul de toluidina. Sales de plata y Ácido Peryódico de Schiff (PAS). Métodos de Romanovsky: Leishman y Giemsa. Carmín de Best, PAS. Musicarmin y PAS. Reacción de Feulgen. Orceína (café) y Fucsina Resorcina (azul oscuro o morado). Sales de plata (Argirófilas: Impregnación argéntica) y PAS. Eosina (rojo). Tricrómico de Mallory-Azan (Azul brillante). Tricrómico de Masson (Verde). *Hematoxilina y eosina: combinación de colorantes más usada en histología.