Micro RNA mi RNA Piccole molecole di RNA

Micro RNA (mi. RNA) • Piccole molecole di RNA (20 -22 nt) • Prodotte da precursori di 90 -100 nt trascritti autonomamente (anche policistronici) o maturati da introni • Si legano a m. RNA che hanno sequenze complementari • Presenti in tutti gli eucarioti

Conservazione dei mi. RNA

Strutture secondarie dei pre-mi. RNA

Organizzazione dei geni di mi. RNA

Biogenesi dei mi. RNA

Biogenesi dei mi. RNA

Regolazione mediata dai mi. RNA

Studio della funzione dei mi. RNA

Meccanismo di azione dei mi. RNA

Regolazione dei mi. RNA (regolatori "sponge")

MONDO A RNA (RNA WORLD)

Diversità degli organismi

CARATTERISTICHE DI UN "SISTEMA VIVENTE" ® replicazione ® evoluzione

DOGMA CENTRALE DNA RNA proteine

CAPACITA' DELL'RNA ® RNA come genoma ® RNA come catalizzatore

RNA come genoma

RNA come enzima

Apparecchio di Miller (1953)

Sintesi prebiotiche

DIFFICOLTA' DELLE SINTESI PREBIOTICHE ® rese basse ® ribosio instabile (isomeri) ® legame glicosidico a o b ® fosfato solo al 3' e 5' ® legami fosfodiesterici solo 5'-3'

Sintesi dei precursori del DNA

Cofattori di enzimi proteici

Origine dei cofattori

FUNZIONI DELL'RNA NELLA CELLULA MODERNA ® traduzione r. RNA, m. RNA, t. RNA ® maturazione r. RNA sno. RNA, RNasi MRP ® splicing sn. RNA, introni gruppi I e II ® maturazione t. RNA RNasi P ® sintesi DNA primers, telomerasi ® traslocaz. proteine srp. RNA

PERCHE' L'RNA? ® l'RNA deve essere venuto prima del DNA ®l'RNA deve essere venuto prima delle proteine ® molti coenzimi hanno un ribonucleotide nella struttura ®l'RNA può agire come catalizzatore

EVOLUZIONE SINTESI PROTEICA 1) t. RNA 2) t. RNA sintetasi 3) protoribosoma 4) codice genetico 5) m. RNA 6) proteine

PASSAGGIO RNA DNA 1) sintesi dei precursori del DNA 2) trascrizione inversa 3) replicazione 4) trascrizione

Scala temporale dell'evoluzione

Evoluzione prebiotica

SELEX (SYSTEMATIC EVOLUTION OF LIGANDS BY EXPONENTIAL ENRICHMENT) es. affinity column

Primo esperimento SELEX

Selezione di un RNA con capacità di legame

Specificità del legame

Selezione di una RNA polimerasi

Scheme for the function of different snm. RNAs by targeting bacterial or eukaryal m. RNAs or pre-m. RNAs leading to regulation of gene expression. Binding of a sno. RNA to the splice-site of a eukaryal pre-m. RNA or involvement in m. RNA editing and modification has recently been proposed as one of several alternatives for a functional role, but remains to be experimentally verified.