Mh akut kontakt toxicitsi teszt 214 es szm

Méh akut kontakt toxicitási teszt 214 -es számú OECD teszt Készítette: Veres Rita

Tartalom n n n n n A méh jellemzése Teszt jellemzése Méhek begyűjtése Vizsgálati dobozok követelményei Méhek etetése Teszt előkészítése A teszt folyamata A teszt kiértékelése Vizsgálati jelentés tartalma

A méh jellemzése A méhek a hártyásszárnyúak rendjébe tartoznak, közeli rokonságban állnak a darazsakkal és a hangyákkal. Megközelítőleg 20 000 fajt ismerünk. Az Antarktiszt kivéve valamennyi kontinensen megtalálhatóak. A legkisebb méh 2, 1 mm hosszú, míg a legnagyobb 39 mm. A méhek nektár és pollen fogyasztására adaptálódtak, ebből nyerik az energiát és a fehérjéket, a pollenek többségével lárváikat táplálják.

Teszt jellemzése Az akut toxicitási teszt peszticidek, növényvédő szerek és egyéb vegyi anyagok hatását vizsgálja felnőtt dolgozó méhek esetében. A mérés végpontja a méhek letalitása, illetve túlélése. Akkor nyilvánítható halottnak egy méh, ha teljesen mozdulatlan. A teszt időtartama 48 óra. Ha a teszt során a halálozási ráta nagyobb, mint 10%, akkor a teszt meghosszabbítható, maximum 96 órásra.

Méhek begyűjtése 1 n n n Ugyanahhoz a fajhoz tartozó fiatal, kifejlett dolgozó méheket kell gyűjteni. Hasonló korú, megfelelően táplált, egészséges, betegségtől menetes, ismert előéletű és fiziológiai állapotú méheket kell begyűjteni. A méheket a felhasználás reggelén kell begyűjteni, illetve előző este, ebben az esetben a következő napig vizsgálati körülményeknek megfelelően kell tartani őket.

Méhek begyűjtése 2 n n Kora tavasszal, ill. késő ősszel kerülni kell a begyűjtést, mert ez idő alatt a méhek fiziológiája változik. Ebben az időszakban végzett vizsgálatokhoz a a méheket inkubátorban kell nevelni, „méh kenyérrel” és cukoroldattal kell etetni. A méh kenyér porcukorból és mézből gyúrt cukorlepény. Vegyi anyagokkal (pl. antibiotikummal) kezelt méhek esetében a kezelés végétől számított 4 hétig nem használhatóak fel toxikológiai vizsgálatokra.

Vizsgálati dobozok követelményei n n n A teszt során a méheket vizsgálati dobozokban tartják. A vizsgálati doboz legyen könnyen tisztítható, jól szellőző. A doboz készülhet rozsdamentes acélból, dróthálóból, műanyagból, és fából is. A teszt során egy dobozban 10 méh tartható. A doboz méretét úgy kell meghatározni, hogy a méheknek elegendő hely legyen.

Méhek etetése n n A méheket a vizsgálat alatt 500 g/l koncentrációjú cukoroldattal lehet etetni. Az etetés egy „etetővel” végezhető. Az etető egy üvegcső, mely kb. 50 mm hosszú, 10 mm széles, az egyik vége leszűkített, kb. 2 mm átmérőjű.

A teszt előkészítése n n A vegyi anyag különböző dózisait el kell készíteni. A vizsgálat során minden egyes dózis esetében teszt és kontrollcsoportot kell alkalmazni, 3 -3 párhuzamost kell mérni. Oldószer, ill. nedvesítőszer alkalmazása esetén további kontroll méréseket kell végezni, vizsgálni kell, hogy ezen szerek milyen hatással vannak a méhekre. A vegyi anyag alkalmazása előtt a befogott méheket szén-dioxiddal, vagy nitrogénnel el kell kábítani

A teszt folyamata 1 n n Dózisok felvitele: 1μl előre meghatározott koncentrációjú oldatot applikátorral kell felvinni a méh potrohának háti oldalára. Vizsgálati körülmények: 25 ± 2°C-os sötét helyen kell tartani a méheket, fontos a relatív páratartalom (50 -70%), melyet a vizsgálat során fel kell jegyezi.

A teszt folyamata 2 n n n Időtartam: 48 óra, illetve hosszabbított vizsgálat esetében 96 óra. A mortalitást fel kell jegyezni a vizsgálat kezdetétől számítva 4. , 24. , 48. órában, illetve hosszabbított mérés esetén 72. , 96. órában. Észrevételek feljegyzése: normálistól eltérő viselkedés.

A teszt kiértékelése 1 n n n A mortalitási adatokból dózis-hatás görbék készítésével meg lehet határozni a 24 és 48 órás LD 50 értékeket, illetve meghosszabbított mérés esetében a 72 és 96 órás LD 50 értéket. A mérési időpontokban következő képlettel kiszámítható a halálozási ráta: H=100*(Nk-Nminta)/Nk, ahol: Nk: a kontrollban életben maradt méhek száma (db), Nminta: a mérendő mintában életben maradt méhek száma (db) A halálozási rátát a koncentráció logaritmusának függvényében ábrázoljuk, majd a grafikonról leolvasható az adott időponthoz tartozó LD 50 érték.

A teszt kiértékelése 2 A dózis-válasz görbéről leolvasható az LD 50 érték, melynek mértékegysége μg vizsgált anyag/méh. Halálozási ráta % n ED 20 ED 50 log vegyi anyag koncentráció μg/méh

Vizsgálati jelentés tartalma n n n Vizsgált anyag jellemzői (fizikai-kémiai tulajdonságok) Méhek jellemzői (tudományos név, származás, életkor, befogás módszere, időpontja) Vizsgálati körülmények (hőmérséklet, relatív páratartalom, elhelyezési körülmények, ketrec jellemzői, vizsgálat időpontja, eredmények, dózis-válasz görbék, LD 50 értékek, megfigyelések)

Források: n n Wikipédia http: //hu. wikipedia. org/wiki/M%C 3%A 9 hek OECD Guideline for Testing of Chemichals 214 Honeybees, Acute Contact Toxicity Test http: //lysander. sourceoecd. org/vl=24528214/cl=17/ nw=1/rpsv/cgibin/fulltextew. pl? prpsv=/ij/oecdjournals/1607310 x/ v 1 n 2/s 15/p 1. idx

Képek forrása: n http: //members. iif. hu/visontay/ponticulus/rovatok/errata /csakany_mmm. html http: //tudatos. blogter. hu/359175/a_mehek_kommunikac ioja http: //www. origo. hu/tudomany/20081028 -allatvilagnegyig-tudnak-szamolni-a-mehek. html http: //www. biokontroll. hu/cms/index. php? option=com_ content&view=article&id=442: a-fhordaseltt&catid=109: bioallatoktartasa&Itemid=43&lang=hu http: //www. meheshetek. blogol. hu/ n http: //www. mezvilag. hu/kepgaleria. html n n