Metody oznaczania biopierwiastkw Absorpcyjna spektrometria atomowa AAS MEp

Metody oznaczania biopierwiastków

Absorpcyjna spektrometria atomowa AAS MEp + hν MEk Absorpcja promieniowania przez wolne atomy Źródła promieniowania: lampy z katodą wnękową, lampy z wyładowaniem bezelektrodowym Atomizery: płomieniowe, elektrotermiczne, wodorkowe, z zimnymi parami rtęci, dla substancji stałych z atomizacją w plazmie laserowej Detektory: fotopowielacze Układ komputerowy

Fluorescencja rentgenowska Pomiar widm rentgenowskich powstałych w wyniku wzbudzenia próbki wysokoenergetycznym promieniowaniem rentgenowskim Źródła promieniowania: lampa rentgenowska Element rozszczepiający promieniowanie fluorescencyjne Detektory: liczniki Geigera-Mullera, liczniki scyntylacyjne, detektory półprzewodnikowe Układ komputerowy Metoda niedestrukcyjna

Fluorescencja rentgenowska

Spektrofotometria UV/Vis

Diagram poziomów energetycznych. Absorpcja promieniowania zachodzi w ciągu 10 -15 s, relaksacja związana z drganiami w cząsteczce – 10 -10 s, z przemianami wewnętrznymi – 10 -12 s, fluorescencja – od 10 -10 s do 10 -6 s (>10 -5 s – fosforescencja)

Zależność pomiędzy widmem absorpcji (wzbudzenia) i emisji (fluorescencji) Absorbancja fluorescencja

Zmieniając związek ulegający fluorescencji można obserwować inne jony np. Mg 2+, Na+, Cl-, K+, H+

NMR spektroskopia magnetycznego rezonansu jądrowego Jądra atomu posiadające spin różny od zera wykazują moment magnetyczny. NMR bada jego oddziaływanie z zewnętrznym polem magnetycznym.

NMR spektroskopia magnetycznego rezonansu jądrowego E fale radiowe

NMR

Spektrometria mas

Techniką SIMS badano czy jony Mg 2+ podczas filtracji do moczu wbudowują się w strukturę komórek nerek. Do organizmu wprowadzono izotop 26 Mg. Znaleziono go w strukturze komórek nerkowych.

osocze limfocyty erytrocyty

Mg w surowicy i erytrocytach u zdrowych i chorych ludzi Erytrocyty surowica

Częstość hipomagnezemii u krytycznie chorych po operacjach % Całkowite stężenie w surowicy Mg 2+ w erytrocytach

Porównanie metod oznaczania i. Mg w komórce fluorymet ria 31 P NMR Punkt 0 (AAS) Stan Próbki Żywa komórka Żywy organizm Wynik Rozkład stężeń Czas Analizy ? Jakie jony Punkt 0 UV/Vis SIMS ISE Mikroel ISE KONE Populac Pojedyn ja kom cza kom Pojedyn cza kom Populacj a kom Rozkład stężeń Średnie stęż. Rozkład stężeń Lokalne stężenie Średnie stęż. < 1 godz Ok. 1 godz ? ? Ok. ½ godz Ca, Mg, H K, Na, Cl, H H, Ca, Mg Mg, Ca Mg Mg, K, Na, Cl, H Ile jednocześ nie 1 1 wiele Koszt droga średnia tania automatyz acja Wprow Wyniki + + -+ -+ ? ? - -+ Zakres Stężeń