MALDI Bio Typer Arintha Biotech 201006 1 MALDI

MALDI Bio. Typer Arintha Biotech 2010/06 1

MALDI Bio. Typer Identificazione batterica MALDI Biotyper Il sistema Bruker di nuova generazione Arintha Biotech 2010/06 2

L’identificazione Una corretta identificazione poggia le sue basi sul riconoscimento delle caratteristiche più salienti e specifiche espresse dal microrganismo da identificare Arintha Biotech 2010/06 3

L’identificazione Con adatte osservazioni e prove sperimentali si determina il maggior numero di caratteristiche del batterio e i dati ottenuti si confrontano con le descrizioni delle varie specie esistenti in letteratura. Arintha Biotech 2010/06 4

Criteri 1. 2. 3. 4. 5. 6. Caratteri colturali Aspetti morfologici Comportamenti metabolici Composizione chimica Individualità antigenica Costituzione genica Arintha Biotech 2010/06 5

Le tecniche 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. Piastre con terreno cromogenico Test biochimici in provetta/su colonia Gallerie di identificazione Elettroforesi Pulsata su gel (PFGE) Citofluorimetria Immunoenzimatica Immunofluorescenza FISH, Microarray FT-IR FAME GC/MS (esteri metilici degli acidi grassi Sequenziamento del DNA ribosomale PCR Tutte queste tecniche presentano un elevato costo e richiedono tempi di analisi lunghissimi Ognuna ha una definita finalità Arintha Biotech 2010/06 6

L’idea L’identificazione e la classificazione dei microrganismi possono essere realizzate utilizzando la spettrometria di massa Maldi TOF, ovvero misurando il profilo proteico di batteri, lieviti e muffe. La elevata riproducibilità è assicurata dalla misura delle proteine ad elevata abbondanza, tra cui molte proteine ribososomiali. Poiché le proteine ribosomiali sono parte del funzionamento cellulare, sono presenti in tutte le cellule viventi. Pertanto l’impronta proteica che il Maldi Bio. Typer determina non è influenzata da variabilità nelle condizioni di crescita o ambientale Vantaggio fondamentale per ottenere e generare robuste biblioteche di microrganismi. Arintha Biotech 2010/06 7

MALDI TOF MS Arintha Biotech 2010/06 8

Procedura analitica Arintha Biotech 2010/06 9

Campi di applicazione Arintha Biotech 2010/06 10

Vantaggi Arintha Biotech 2010/06 11

Vantaggi Arintha Biotech 2010/06 12

Vantaggi Arintha Biotech 2010/06 13

Libreria Arintha Biotech 2010/06 14

Interpretazione Arintha Biotech 2010/06 15

software Arintha Biotech 2010/06 16

Correlazioni Arintha Biotech 2010/06 17

Studi interlaboratori Arintha Biotech 2010/06 18

Risultati Arintha Biotech 2010/06 19

Colonie miste Arintha Biotech 2010/06 20

Riesami Arintha Biotech 2010/06 21

Risoluzione Arintha Biotech 2010/06 22

Tempi di analisi Arintha Biotech 2010/06 23

Valutazioni Arintha Biotech 2010/06 24

Valutazioni Arintha Biotech 2010/06 25

Conclusioni • • • Minima preparazione del campione Analisi veloci ed accurate, elevata riproducibilità Basso costo del consumabile Libreria di 3300 microrganismi Continuo aggiornamento della libreria e suo ampliamento La libreria può essere aggiornata dall’utilizzatore con microrganismi da lui stesso identificati Arintha Biotech 2010/06 26

Arintha biotech srl Arintha Biotech 2010/06 27