LES GROUPES SANGUINS 1 ImmunoHmatologie tude des systmes

LES GROUPES SANGUINS 1

Immuno-Hématologie Étude des systèmes de groupes sanguins et des implications immunologiques qui en résultent 2

GROUPE SANGUIN Ensemble d’allo-antigènes : q génétiquement déterminés q présents à la surface des membranes des cellules du sang q pouvant induire, lors de la perfusion thérapeutique d’un composant cellulaire, une allo-immunisation q 23 systèmes de groupes sanguins 3

Antigène/Immunogénicité Antigène Entité biologique capable d’être reconnue et identifiée comme étrangère par le système immunitaire d’un organisme, de manière spécifique, en vue de son élimination ou de sa tolérance n Immunogénicité Capacité d’un antigène à induire la fabrication d’anticorps dirigés contre lui n Plus un antigène est immunogène, plus il induit une réponse anticorps forte. 4

Antigène n Xéno - Ag = Ag d’espèces différentes n Allo - Ag = Ag d’individus de la même espèce n Auto – Ag = Ag de l’individu lui-même 5

Anticorps (ou immunoglobulines) n n Molécules possédant une fonction immunologique Produites par les lymphocytes B Glycoprotéines présentes dans le sérum Synthétisées en réponse à l'introduction d'antigènes dont l'organisme est dépourvu et capable de se lier spécifiquement avec lui 5 types : n immunoglobulines G (Ig. G) = 70% n immunoglobulines A (Ig. A) = 15% (salives, muqueuses - génito-urinaires, trachéobronchiques -, lait) n immunoglobulines M (Ig. M) = 10% n n immunoglobulines D (Ig. D) = 1% fonction ? immunoglobulines E (Ig. E) = traces, immunité antiparasitaire et hypersensibilité (asthme, rhinite allergique) 6

Anticorps - classification n Les anticorps sont dits : q naturels : existant en l’absence de toute stimulation antigénique étrangère, apparaissent de façon spontanée (sans notion de grossesse ou de transfusion préalable) q q q immuns : induit par une stimulation d’un antigène étranger Immunisations secondaires à une infection, vaccination, transfusion (anticorps du système anti-Rhésus) Allo anticorps produit en réponse à la stimulation d’un antigène provenant d’un sujet étranger de même espèce (ex. transfusions sang) Auto anticorps dérèglement du système immunitaire. Anticorps fabriqués par un individu contre ses propres antigènes (LED, anémies hémolytiques auto immunes) 7

Anticorps - classification n Les anticorps sont dits : q réguliers lorsqu'ils sont toujours présents quand l'antigène correspondant est absent (exemple : un sujet de groupe A a toujours des anti-B dans son plasma) q irréguliers dans le cas contraire n 4 combinaisons théoriques q "réguliers immuns" : jamais rencontré q "irréguliers naturels" : exceptionnel n En pratique : q les anticorps naturels sont réguliers, par exemple les anti-A et anti-B de classe Ig M. Ils doivent toujours être pris en compte sous peine d'engendrer un accident transfusionnel gravissime q les anticorps immuns sont irréguliers, par exemple l'anti-D du système Rhésus. 8

Evolution de la réponse immunitaire humorale dans le temps 9

Problèmes transfusionnels n Principe général : ne pas laisser se produire réaction antigène - anticorps. En transfusion, deux situations : n En pratique, n q q l'introduction d'antigènes dans un organisme qui possède l'anticorps correspondant crée un conflit ( transfusion de concentrés érythrocytaires ou plaquettaires). La transfusion de plasma incompatible n'entraîne pas les mêmes risques, à condition de ne pas dépasser 3 UA de Plasma 10

Réaction Ag / Ac n n n Réaction Ag / Ac agglutinations ou hémolyse Incident Choc Ac agglutinants ou hémolysants Techniques d’agglutinations artificielles vont permettre: q q déterminer certains groupes sanguins et phénotypes sanguin recher la présence de certaines agglutinines irrégulières 11

Conditions de l'immunisation n 1. Introduction de globules rouges étrangers 12

Conditions de l'immunisation n 2. Immunogénicité des antigènes n Certains antigènes sont plus fortement immunogènes, d'autres moins D > [C-c-E-e-K] > les autres n Ce n'est pas parce qu'un antigène est faiblement immunogène qu'il n'est pas dangereux 13

Conditions de l'immunisation 3. Terrain n Certains sujets sont bons répondeurs, d'autres moins n Les femmes s'immunisent 2 fois plus souvent que les hommes n En pathologie : q q les cirrhoses hépatiques favorisent les immunisations les déficits immunitaires les diminuent 14

Groupe sanguin ABO Le groupe sanguin ABO est défini par la présence ou l’absence d’allo – antigènes génétiquement déterminés à la surface des cellules dont les GR ET q d’anticorps régulièrement présents dans le sérum, correspondant à l'antigène ou aux antigènes absent(s) à la surface des GR q q Le plus important des systèmes à respecter en transfusion sanguine de par l’existence d’ anticorps naturels 15

GROUPE SANGUIN - ABO ANTIGENE : Allo-Ag o molécule commune (antigène H) présente sur tous les GR quel que soit le groupe A, B, O, o porté par la membrane du GR o antigène érythrocytaire ou agglutinogène o génétiquement induit o Confère une identité propre à l’hématie qui le porte o détermine des catégories différentes de sang = groupes sanguins Propriétés: n n Immunogénité Réactivité antigénique: doit réagir avec les éléments du système immunitaire qu’il a activé découvert en 1901 par Karl Landsteiner 16

SYSTEME ABO – antigènes antigène A (A 1 et A 2) antigène B 2 agglutinogènes Antigène A et Antigène B antigènes A et B Aucun antigène L’antigène H commun à tous les Globules rouges (si absence d’Ag H alors le groupe est dit BOMBAY – rare +++) 17

SYSTEME ABO – antigènes lgène localisé sur le chromosome 9, 2 loci PHENOTYPES GENOTYPES père mère antigènes A 1 A 1 A 2 A 1 0 A 2 A 2 O B B B 0 A 1 B A 1 B A 2 B O O O A 1 A 2 B 18

SYSTEME ABO - anticorps n Présents régulièrement dans sérum en l’absence de l’antigène correspondant (anticorps ou agglutinines) n Se combinent de façon spécifique aux antigènes qui leur correspondent n Anticorps : q q Naturels ou immuns Réguliers ou irréguliers 19

Les anticorps naturels réguliers n n n Dans le sérum, sans stimulation extérieure apparente Naturels Réguliers (toujours présents) Apparition spontanée chez le nourrisson de 3 à 6 mois (n. né agglutinines de la mère) Réagissent avec l’antigène présent sur les GR (théorie de Landsteiner) dans le système ABO Agglutination à T° ambiante De Classe Ig. M Dépistés par l’épreuve de SIMONIN-MICHON 20

Les anticorps naturels réguliers L’agglutinine bêta = l’anticorps anti-B 2 agglutinines (AG) correspondant chacune à un des deux agglutinogènes (AC) L’agglutinine alpha = l’anticorps anti-A 21

Les anticorps naturels irréguliers n n n De classe Ig. M ou Ig. G Fortement hémolysants Dépistés par RAI Ag Ac A 2 Anti B (régulier) Anti A 1(irrégulier) 22

Les anticorps IMMUNS n n De classe Ig. G Acquis par stimulation immune, q Allo immunisation, n n q n n n (la Hétéro immunisation, n n Origine transfusionnelle accidentelle : sang A patient O Immunisation maternelle aux Ag. A ou B d’origine fœtale mère est de groupe O et s’immunise le plus souvent contre Ag A) Produits médicamenteux vaccins sérums anatoxine diphtérie, tétanos, Dangereux en transfusion accident d’hémolyse (les Ac du donneur agressent les GR du receveur) Irréguliers Traversent le placenta Dépistés et identifiés par RAI 23

Anticorps anti H n Très rares sujets dits « Bombay » qui ne possèdent pas l’antigène H commun au GR (et donc les antigènes A et B) présentent dans le sérum un anticorps naturel anti-H n Ne doivent être transfusés qu’avec du sang de donneur de même phénotype (Bombay) 24

Réaction d’agglutination n Lorsque l’agglutinine (Ac. ) rencontre l’agglutinogène (Ag. ) qui lui correspond réaction d’agglutination, détruisant les GR n Chez un même sujet, il ne peut exister à la fois l’agglutinine et l’agglutinogène correspondant : cela implique qu’il existe 4 groupes 25

A (42%) B (10%) Globule rouge Antigène A Globule rouge Antigène B Sérum Anticorps anti-A AB (3%) Globule rouge Sérum Antigènes A et B Aucun Anticorps O (45%) Globule rouge Aucun Antigène Sérum Anticorps anti-A et anti-B 26

INCOMPATIBILITE SANGUINE n Notion importante pour transfuser n Étant données les réactions que peuvent engendrer la rencontre de l’antigène et de l’anticorps correspondant, il peut exister des phénomènes d’incompatibilité entre le sang des sujets appartenant à des groupes sanguins différents : le sérum des uns agglutinant les globules rouges des autres 27

Les anticorps naturels anti -B du receveur s’attaquent aux GR « B » transfusés Si un sujet de groupe A reçoit du sang de groupe B ( très grave) Les anticorps anti-A transmis du donneur s’attaquent aux GR du receveur (moins grave car les anticorps transfusés sont dilués dans le plasma du receveur, donc peu d’action) 28

C’est la raison pour laquelle il faut tester la compatibilité sanguine avant de transfuser un patient en réalisant un groupage sanguin Deux méthodes épreuve de BETH-VINCENT = Présence ou absence de l’Ag A, B, AB à la surface du GR en présence d’un sérum test connu (anti A 1 – anti B – anti AB) épreuve de SIMONIN-MICHON = Présence ou absence d’Ac naturels réguliers (ou irréguliers) en présence d’hématies-tests A 1 et B. 29

Technique de groupage n n 2 prélèvements différents (moments différents ) 2 personnes différentes q q n prélèvement épreuve 2 épreuves différentes q q Beth-Vincent / Simonin-Michon Nécessité absolue de concordance entre les 2 épreuves (et avec résultats antérieurs, si connus) 30

Anti-A Anti-B Anti-AB A B O A B AB O Test de Beth-Vincent Epreuve de Simonin-Michon identification des AG érythrocytaires identification des AC sériques 31

32

GROUPE ETUDIE EPREUVE DE BETH-VINCENT (sérums- test) EPREUVE DE SIMONIN (globules-test) Anti-A Anti-B Anti-AB GR A GR B A Agg - Agg B - Agg Agg - AB Agg Agg - - O - - - Agg 33

Règles de compatibilité en transfusion de GR A AB O B 34

Règles de compatibilité en transfusion de plasma A O AB B 35

SYSTEME RHESUS n Ag découvert dans le sérum d’un singe : Macacus rhésus (1940) Comprend 5 antigènes principaux D, C, E, c, e À la surface exclusive des GR L’antigène D dominant est le plus immunogène (anti. D, anti. E, antic, anti. C, antie) Le sujet qui possède l’antigène D (RH 1) est dit rhésus positif (Rh+ / 85%) Et celui qui ne le possède pas est dit rhésus négatif (Rh- / 15%) Existence de « D faible » ou « Du » Rhésus + n Nécessite 2 déterminations / 2 prélèvements n n n 36

SYSTEME RHESUS n n n n Les anticorps anti-Rh ne sont normalement pas présents. Ils sont formés par un sujet Rh- lors de leur contact avec des substances Rh+ Immuns , Irréguliers : q Grossesse q TS De classe Ig. G Agglutinants à 37° Identifiés par la RAI Passent la barrière placentaire responsables de la Maladie Hémolytique du Nouveau-Né Existent dans le cadre d’une auto immunisation Anémie Hémolytique Auto-Immune 37

A. Transfusions compatibles RH 1 (D-) RH 1 + (D+) 38

B. ACCIDENTS D’INCOMPATIBILITE a) LA 1 TRANSFUSION DE SANG Rh+ 2 Accident d’incompatibilité 39

b) INCOMPATIBILITE FOETO-MATERNELLE Accident d’incompatibilité / maladie hémolytique du nouveau né 40

Prévention La mère RH 1 NEG (D-) L’enfant RH 1 POS (D+) hématies fœtales allant dans le sang de la mère lors de l’accouchement, de trauma ou d’examens invasifs Injection de Gamma globulines Anti D à la mère Le plus tôt possible : limite des 72 h naissance enfant La réponse immunitaire De la mère est bloquée Il n’y pas formation d’anticorps anti D Chélateur (détruit) des globules Rouges de l’enfant présents Dans le sang de la mère 41

c) ACCIDENTS LIES AUX AUTRES ANTIGENES DU SYTEME RHESUS n La présence d’antigènes C (RH 2) et E (RH 3) se retrouvent aussi bien chez les sujets RH 1 et RH-1 n Les incidents d’incompatibilités avec ces antigènes ne sont pas exceptionnels Absence de réaction Immunisation Hémolyse dans un 2ème temps 42

3. LES AUTRES SYSTEMES n Le système KELL (KEL 1, KEL 2, …) n Le système DUFFY (FY 1, FY 2, … ) n Le système KIDD (JK 1, JK 2, … ) n Le système MNSs (MNS 1, MNS 2, … ) 43

KELL n Antigène q q q n strictement érythrocytaire : Kell (KEL) 9 % de la population est KEL 1+ (K) très immunogène autre antigène : Cellano (KEL 2) (k) phénotype habituel KEL 1 -, KEL 2+ Anticorps q q Anti-KEL 1 Allo immunisation : grossesse, TS Ig. G Identifiés par RAI 44

Duffy n Antigènes q q n FY 1 (Fy a) et FY 2 (Fy b) Strictement érythrocytaire Anticorps : q q Allo-immunisation : grossesse , TS Anti-FY 1 (Fy a) (Ig. G), le plus immunogène Identifiés par RAI Irréguliers chez polytransfusé (++) 45

KIDD n Antigènes q q n JK 1 (Jka) et JK 2 (Jkb) Strictement érythrocytaire Anticorps q q q Allo immunisation : grossesse , TS Anti-JK 1 dangereux en TS Difficile à détecter chez le polytransfusé (perfide) Accident hémolytique ou TS inefficace inexpliquée présence parfois difficile à mettre en évidence (soupçonnée) q 46

Système P n n Antigène : P 1, P 2 Anticorps q q Dangereux naturels anti-P P, P 1, Pk Système Lewis n n Antigènes : LE 1 (Lea), LE 2 (Leb) ne faisant pas partie de la membrane du GR mais collés de façon réversible à sa surface Anticorps dangereux en TS si actifs à 37° C et hémolysants in vitro Pas de MHNN car le système Lewis est élaboré seulement après la naissance Système I et i 47

SECURITE TRANSFUSIONNELLE n 2 OBJECTIFS q Prévention des accidents transfusionnels de type immunologiques : en évitant le conflit entre les Ag. du receveur et les Ac. du donneur, apportés par le PSL cellulaire groupage / RAI n en évitant la production d’Ac. à l’origine d’un futur conflit, suite à l’immunisation par les Ag du donneur produit phénotypé n q Prévention des maladies infectieuses transmissibles par la transfusion 48

SECURITE TRANSFUSIONNELLE n ACTIONS Connaissances des comptabilités dans le groupe ABO q Réalisation minutieuse du groupage ABO/Rhésus et Phénotypage érythrocytaire RH-K : q n n q q q RAI Transfusion en produits déleucocytés, légalement obligatoirement CPU n n n q femme enceinte polytransfusé avant TS Au lit du patient Contrôle des Antigènes du PSL Dernier verrou avant la transfusion Information des patients légalement obligatoires 49

GROUPAGE SANGUIN n n n n Identification parfaite : vérifier identité (CNI) Attention orthographe identité Attention homonyme Ne prélever qu’un seul malade à la fois (éviter croisement de tube) Étiqueter les tubes au lit du patient (Répartition d’un même prélèvement dans 2 tubes différents interdit) Contrôle particulièrement vigilant chez les sujets comateux et nouveaux-nés 50

Recherche d’Anticorps irréguliers anti érythrocytaires - RAI n n n Recherche dans sérum du malade de la présence éventuelle d’Ac. irréguliers Sur tube EDTA (Mauve) Durée de validité en France : trois jours / 72 h Indispensable pour transfuser A répéter chez le polytransfusé Obligatoire chez la femme enceinte pour assurer le diagnostic et le suivi de la maladie hémolytique du nouveau-né 51

REGLES TRANSFUSIONNELLES n n Transfusion d’hématies apporte des antigènes Transfusion de plasma transfère des anticorps n Ne jamais introduire un antigène chez un receveur qui a l’anticorps correspondant dans son plasma n TS où le donneur et le receveur ont le même groupe ABO sont toujours compatibles Hématies du groupe O peut être transfusées à A, B, AB, O donneur universel Les receveurs de groupe AB peuvent recevoir des GR O, A, B, AB receveur universel n n 52

PHENOTYPAGE ERYTHROCYTAIRE Ag sur GR ABO DCEce Kk Fya. Fyb Jk Jkl MNS Lea Leb Rh Phénotypé Phénotypage élargi 53

PHENOTYPAGE ERYTHROCYTAIRE q Sang phénotypé a un double objectif : n Prévenir les accidents hémolytiques transfusionnels chez les receveurs porteurs d’anticorps érythrocytaires (sujets immunisés) n Prévenir de l’allo-immunisation contre les antigènes pour des sujets à RAI négative q Femme enceinte q TS chronique de GR Nécessite un suivi avec recherche RAI 54

CMV négatif n n CMV = Cytomégalovirus. 85% des donneurs ont des Ac. Anti-CMV Sans gravité pour adulte Intérêt q q q Immunodéprimé Transplanté, Receveur de moelle osseuse (Nouveaux-nés) 55

C. LE SYSTEME HLA n H (Human) L (Leucocyte) A (Antigen) n Les diverses cellules de l’organisme possèdent également des antigènes spécifiques (rejet lors de greffe). Ces phénomènes de rejet sont dus à l’existence d’un système antigénique sur une majorité de cellules dont les cellules sanguines, d’où le nom du système HLA n Ce système particulièrement complexe s’exprime à la surface des GB et de presque tous les tissus de l’organisme 56

n Ce système est important pour le sujet qui va recevoir des transfusions ou subir un traitement avec des produits sanguins contenant des GB n Son organisme se défendra contre les antigènes étrangers HLA en pouvant produire des anticorps. Il peut s’immuniser avec les PSL : plaquettes en particulier C’est pourquoi les dérivés sanguins sont systématiquement déleucocytés lors des traitements transfusionnels 57