LE MILIEU A LA LYSINE DE TAYLOR LDC

LE MILIEU A LA LYSINE DE TAYLOR (LDC) Composition Source N Peptone Extrait de viande L-Lysine Glucose Pyridoxal phosphate Pourpre de Bromocrésol Rouge de crésol ED p. H = 6, 8 à 7 5 g 5 g 10 g 0, 5 g 0, 005 g 0, 01 g 0, 005 g qsp 1 L Source de C, N Acide aminé indispensable à la recherche de la LDC Source de C Vitamine PP , coenzyme des décarboxylases Indicateurs de p. H violet p. H basique ou neutre, jaune p. H acide Ensemencement 1 - Introduire une goutte de suspension dans le milieu. 2 - Agiter. 3 - Si le tube n’est pas plein, recouvrir d’un peu d’huile de vaseline. 4 - Incuber 24 heures à 37°C

LE MILIEU UREE INDOLE Acide aminé nécessaire à la recherche de la TDA et de la tryptophanase Composition Tryptophane Urée Phosphate monopotassique Phosphate bipotassique Chlorure de sodium Ethanol à 95° Rouge de phénol à 1% ED 0, 3 g 2 g 0, 1 g 0, 5 g 1 m. L 0, 25 m. L qsp 100 m. L Molécule azotée nécessaire pour la recherche de l’uréase Source de P Sels minéraux Solubilisation du tryptophane Indicateurs de p. H rouge p. H basique ou neutre, jaune p. H acide p. H = 7 Ensemencement 1 - Introduire 1 ou plusieurs colonies identiques dans le milieu. 2 - Agiter. 3 - Incuber 24 heures à 37°C.

Lecture des milieux Milieu LDC 2 nde lecture possible 1ère lecture possible Alcalinisation du milieu par formation d’un composé basique issu de la décarboxylation de la lysine par la LDC, la cadavérine : LDC + Le milieu est devenu jaune le p. H est acide par formation de composés acides issus de la fermentation du glucose par les bactéries. Il n’y a pas réalcalinisation du milieu : LDC -

Milieu urée-indole Recherche de l’uréase: lecture directe 1ère lecture possible Alcalinisation du milieu par formation d’un composé basique issu de l’hydrolyse de l’urée : UREASE + 2 nde lecture possible Le rouge de phénol reste orangé p. H neutre l’urée n’est pas hydrolysée, absence de l’enzyme chez les bactéries : UREASE -

Recherche de la TDA et de l’indole 2 gouttes de Fe. Cl 3 10 gouttes du milieu Pas de modification du milieu : TDA - Formation d’un précipité marron présence d’acide indole pyruvique : TDA + Reste de la culture 2 gouttes de réactif de Kovacs Présence d’un anneau orangé en surface absence d’indole : INDOLE - Présence d’un anneau rouge en surface formation d’indole à partir du Trp sous l’action de la tryptophanase : INDOLE +