Laboratorio rea Tecnologa de Produccin Ingeniero Carlos Cantera

• Laboratorio Área Tecnología de Producción, Ingeniero Carlos Cantera • Centro de Investigación y Tecnología del Cuero , CITEC • Campus Tecnológico CIC- INTI cueros • Camino Centenario y 505, MB Gonnet- La Plata

OBJETIVOS • General : Desarrollo de depilado enzimático • Específico : Vulnerar la epidermis del bovino para permitir la difusión de preparados enzimáticos comerciales. Los procesos difusivos, a través de los estratos de la epidermis, desempeñan un papel preponderante para que las enzimas alcancen más rápidamente sus sitios de acción y expresen su actividad depilatoria. La epidermis se presenta como una barrera a la que es necesario atravesar para que las enzimas lleguen a destino. • Yates, J. R. Studies in depilation. IX. Effect of skin thickness and diffusion on the rate of depilation of sheepskins, J. Am. Leath. Chem. Ass, 64, 71 -81, 1969

Empleo de Microscopía Óptica, Microscopía Electrónica de Transmisión y Espectroscopía FT-Raman en el análisis de la epidermis bovina • En este trabajo se analizaron a escala de laboratorio mediante Microscopía óptica, Microscopía Electrónica de Transmisión y Espectroscopía FT-Raman las modificaciones a nivel morfológico y molecular la epidermis del bovino luego de exponerla a tratamientos que intentan vulnerarla.

Reactivos utilizados para vulnerar la barrera epidermis • SO 3 Na 2 (sulfitólisis) queratina • Dodecilsulfato de sodio ( SDS) emulsifica lípidos intercelulares Ensayos preliminares a escala de laboratorio evidenciaron que SDS+sulfito de sodio+ Tripsina, sobre sustrato epidermis , aumentaban la degradación del sustrato Cantera, C. S. ; Goya, L. ; Galarza , B. Hair saving unhairing process. Part 5 -Characterization of enzymatic preparations applied in soaking and unhairing processes; J. Soc. Leath. Tech. Chem. 2003; 87 : 69 -77.

epidermis

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Microscopía Óptica MICROSCOPÍA ÓPTICA 22 horas • SO 3 Na 2 + SDS 5 horas • Preparado enzimático comercial derivado de proteasas animales ( tripsina)+Proteasa alcalina 17 horas • Coloración Tricrómica Control

Microscopía Electrónica. DE de TRANSMISIÓN Transmisión – MET MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA 5 horas SO 3 Na 2 + SDS Preparado enzimático comercial ( proteasa de origen animal , tripsina ) 2 horas 3 horas sulfito de sodio 1, 23 g/l : Se encontró separación entre lámina basal y capa basal del epitelio.

Corte semifino, Azul de toluidina Sulfito de sodio 1, 23 g/l 2 h+ preparado enzimático comercial de origen pancreático 3 h.

N M- ML/13/06 SULFITO 1 N MN N 1 * * LM * Estrato basal. 1 - espacio intercelular N- núcleo. M- melanosoma. LM- Lámina basal espacio modificado*

Espectroscopía FT- Raman Trozos de piel bovina de 10 cm x 10 cm se cubrieron durante 24 horas con: • Terpenos • Emulsión acuosa a base de : surfactantes y terpenos • Buffer de bicarbonato (control)

Figura 9

Resultados FT- Raman • los espectros obtenidos en la región entre 2800 cm-1 a 3050 cm -1 corresponden al espectro vibracional de los enlaces C-H mayoritarios en la composición lipídica. • Fue posible adaptar la técnica a pesar de las dificultades que presenta la piel del bovino, pelos gruesos, espesor del estrato corneo, distribución de lípidos intercelulares

CONCLUSIONES Conclusiones FT-Raman : fue posible adaptar la técnica a pesar de las dificultades que presentaba la piel del bovino: • Manto de pelos gruesos • Espesor del estrato corneo • Distribución de lípidos intercelulares Microscopía Electrónica de Transmisión: los resultados preliminares demostraron que es una herramienta útil para evaluar los pretratamientos y tratamientos utilizados para aflojar el pelo del bovino